滕智平
- 作品数:39 被引量:170H指数:7
- 供职机构:中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金卫生部科学研究基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 腺病毒伴随病毒表达载体表达人乳头瘤病毒18型E6E7基因构建及其转化作用的鉴定被引量:1
- 2003年
- 目的 探讨人乳头瘤病毒 (HPV)的E6E7基因在细胞恶性转化中所起的作用。方法 将人乳头瘤病毒 (HPV)的E6E7基因克隆至腺病毒伴随病毒表达载体中 ,通过包装的重组病毒感染 ,将E6E7基因导入并整合到永生 2 93细胞的基因组中。结果 本研究成功地构建了HPV18E6E7AAV病毒并感染了永生 2 93细胞 ,PCR Southern杂交分析表明E6E7基因在转化细胞 2 93TL中确有表达 ,转化细胞 2 93TC和 2 93TL具有明显的转化表型 ,和亲本 2 93细胞相比 ,生长速度快 ,接触抑制消失 ,集落形成率提高 2 0倍 ,且集落明显增大 ,形成时间短。结论 成功地构建了HPV18E6E7AAV病毒 ,HPV18E6E7基因可引起永生化人上皮细胞 2 93的恶性转化。此病毒可用于感染正常上皮细胞 。
- 岑山滕智平张月沈忠英许锦阶杜宾曾毅
- 关键词:人乳头状瘤病毒依赖病毒
- 乙型肝炎病毒和黄曲霉素协同作用诱发人肝细胞癌细胞株的建立被引量:2
- 2001年
- 为了研究人乙型肝炎病毒 (HBV)和黄曲霉素 (AFB1)在肝癌发生过程中的作用 ,我们用HBV感染的人胚胎肝细胞移植至裸鼠背部皮下 ,以后每周皮下注射AFB1,在裸鼠体内成功地诱发了人肝细胞癌。选 3只裸鼠所形成的肿瘤组织 ,分别再接种裸鼠传代。在裸鼠体内传至 5代后 ,将瘤组织在体外培养、传代 ,建立了 3个肝癌细胞株 ,分别为CBH - 1a、CBH - 1b和CBH - 2。对 3个细胞株进行生物学特性分析发现 ,细胞生长迅速 ,接触抑制消失 ,细胞增殖核计数Ki6 7阳性细胞占 38 2 %。用EMA单抗检测证实为人来源细胞。核酸原位杂交显示 ,细胞中HBV-X和HBV-S基因阳性 ,PCR可扩增出X 基因 ,证明HBV基因已到瘤细胞中。 3个细胞株细胞再接种裸鼠皮下 ,可再生成肿瘤。此实验证明了HBV协同AFB1在人肝细胞癌发生过程中的病因作用。同时 。
- 郭秀婵蓝祥英周玲滕智平张永利陈炯玉沈忠英曾毅
- 关键词:乙型肝炎病毒黄曲霉素肝癌细胞株癌变
- 应用生物素标记探针进行细胞原位杂交检测人鼻咽癌细胞株中的EB病毒LMP基因被引量:7
- 1994年
- 应用生物素标记探针进行细胞原位杂交检测人鼻咽癌细胞株中的EB病毒LMP基因滕智平,曾毅(中国预防医学科学院病毒学研究所北京100052)关键词原位杂交,EB病毒LMP基因,鼻咽癌我们曾用PCR和同位素标记探针的核酸杂交技术,检测人鼻咽癌体外培养细胞株...
- 滕智平曾毅
- 关键词:原位杂交疱疹病毒
- 在AIDS病人和非AIDS的卡波西肉瘤病人中检测HHV-8基因和抗体被引量:5
- 1998年
- 在AIDS病人和非AIDS的卡波西肉瘤病人中检测HHV-8基因和抗体滕智平冯加武王爱霞王自春余红徐莲芝C.Wood耿运琪曾毅作者单位:100052北京中国预防医学科学院病毒学研究所(滕智平王自春曾毅);天津南开大学生命科学院(冯加武耿运琪);广州海员...
- 滕智平冯加武王爱霞王爱霞王爱霞王自春C.Wood耿运琪余红
- 关键词:卡波西肉瘤抗体
- 人免疫缺陷病毒1(HIV-1)膜蛋白基因片段在酵母中的克隆表达
- 1999年
- 目的为获得足够量的膜糖蛋白,以便于对不同HIV分离株膜糖蛋白的结构与功能进行进一步的研究。方法从人免疫缺陷病毒1(HIV-1)HXB2分离株原病毒基因组的重组质粒pHXB2中克隆了两段膜糖蛋白基因(ENV)片段。以酵母穿梭诱导表达质粒pYES2为载体,构建了两个相应的重组表达质粒pYENV1和pYENV2;进一步利用大肠杆菌β-半乳糖苷酶基因(β-lacZ)构建了HIV-1膜外糖蛋白DNA片段与β-lacZ基因的融合表达质粒。将此3种质粒分别转化单细胞真核生物酿酒酵母BJ1991,得到的转化子经半乳糖诱导表达后进行菌体全蛋白的SDS-PAGE分析。结果克隆的基因片段在酿酒酵母中产生了分子质量为50×103的特异性诱导蛋白;对含此融合表达质粒的酵母转化子半乳糖诱导后表达产物的免疫检测表明,与对照菌株相比,融合表达产物具有和HIV-1阳性血清抗体反应的抗原性。结论可通过β-半乳糖苷酶活性的测定直接指示抗原片段的表达;
- 刘巍峰高东王祖农滕智平岑山滕智平
- 关键词:HIV-1ENV基因癌基因蛋白质类
- 新城疫病毒作为疫苗载体的研究进展
- 2009年
- 随着分子生物学领域的飞速发展,重组病毒载体成为当今病毒基因工程研究的热点之一,现有的病毒疫苗载体也存在各自的优缺点,安全有效性都有待进一步证实,应用较广泛的腺病毒虽然有表达水平高、容量大等优点,但是其在成人中感染率极高,现有的宿主免疫会局限载体的复制并降低其免疫原性。而新城疫病毒NDV(Newcastle disease virus)作为负链RNA动物病毒,与常用病毒载体相比较,不仅具有安全、有效、成本低廉等特点,而且作为限制宿主病毒,在人群中感染率极低,不存在先有免疫对抗原表达的影响。
- 周媛滕智平曾毅
- 关键词:新城疫病毒疫苗载体免疫原性宿主免疫分子生物学
- 四硫化四砷诱导急性早幼粒细胞凋亡的机制被引量:6
- 2006年
- 目的:研究四硫化四砷在抗急性早幼粒细胞白血病中诱导细胞凋亡的分子机制。方法:应用cDNA微矩阵技术检测四硫化四砷作用前后NB4细胞基因表达图谱。筛选出有差异表达的与细胞凋亡相关蛋白类基因,合成相应的引物,用RTPCR方法检测口服四硫化四砷的急性早幼粒细胞白血病(APL)患者缓解前后外周血细胞凋亡相关蛋白类基因的表达,分析四硫化四砷诱导早幼粒细胞凋亡的途径。结果:通过基因微矩阵技术分析发现,四硫化四砷作用NB4细胞有差异表达的细胞凋亡相关蛋白类基因包括编码凋亡蛋白酶活化因子基因(Apaf1),比值为2.910;编码细胞凋亡相关蛋白PNAS2基因,比值为0.420。RTPCR检测口服四硫化四砷APL患者缓解前后外周血Apaf1比值2.33,caspase9比值3.21,PNAS2比值0.99。结论:四硫化四砷对NB4细胞的细胞凋亡效应主要涉及两个基因表达的改变:细胞凋亡蛋白酶活化因子(Apaf1)基因的表达上调和细胞凋亡相关蛋白PNAS2基因表达的下调。APL患者PNAS2基因表达没有明显的改变,可能与使用其他药物的影响有关。Apaf1和caspase9表达相应的增高提示,四硫化四砷诱导APL细胞凋亡可能是通过以线粒体介导的凋亡通路为主的活化途径,而不是通过死亡受体途径。
- 滕智平张萍主鸿鹄郝红缨秦效英郝乐徐红陆道培
- 关键词:砷剂细胞凋亡
- EB病毒在鼻咽癌细胞株的长期存在及其与促癌物协同诱发鼻咽癌
- 曾毅滕智平刘振声李保民纪志武
- 主要内容:一、EB病毒与鼻咽癌细胞。我们应用敏感技术和方法证明了高分化鼻咽癌细胞株,及低分化癌细胞株中都存在EB病毒的基因及表达产物,由此推论其它头颈部癌瘤也可能与EB病毒有关。二、完整的EB病毒在促癌物协同作用下能诱发...
- 关键词:
- 关键词:疱疹病毒鼻咽癌细胞株细胞癌变
- 多瘤病毒基因载量与免疫抑制剂剂量相关性的研究
- 2008年
- 目的研究异基因干细胞移植免疫抑制剂的剂量与多瘤病毒载量的关系,预防移植后出血性膀胱炎的发生。方法收集122例干细胞移植患者的血液和同期尿液及1例移植后连续8个月外周血和同期尿液,提取尿液DNA,合成多瘤病毒BKV基因引物探针,荧光定量PCR法检测病毒基因载量和荧光偏振免疫法测定血液环胞素A浓度,动态观察分析二者之间的关系。结果当血液环胞素A浓度高于86~105ng/ml,尿液BKV—DNA病毒检测阳性,尿液BKV,DNA病毒载量随着血液环胞素A浓度而改变,二者呈线性关系。结论当机体处于免疫抑制状态时BKV病毒-DNA的载量与使用免疫抑制剂的剂量有关,增加了移植后诱发出血性膀胱炎的危险性。
- 蔡鹏滕智平吴彤张建峰刘颖王筝郑晚霞徐国林童春容
- 关键词:免疫抑制剂膀胱炎
- 人T细胞白血病病霉Ⅰ型env基因的克隆与表达
- 1995年
- 本文通过聚合酶链式反应(PCR),从整合有人T细胞白血病病毒Ⅰ型(HTLV-I)的MT-2细胞株中,扩增出HTLV-I外膜蛋白(env)的全基因(1.45kb),并成功地克隆入pUC19载体,构建成env基因克隆env/pUC19.利用原核高效表达载体pGEX-2T,在大肠杆菌中有效地表达了与谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合的env羧基末端抗原的重组蛋白,融合基因的转录由tac启动子调控。SDS-PAGE结果表明,有一约52kD的目的蛋白带,表达量占菌体总蛋白的10%;WesterNblott及ELISA结果显示,表达产物能与HTLV-I多抗血清结合。本研究为研制HTLV-I的诊断试剂及进一步了解env的免疫学和生物学性质打下了基础。
- 段震峰滕智平曾毅
- 关键词:白血病病毒ENV基因基因克隆