游上游
- 作品数：35 被引量：63H指数：5
- 供职机构：武汉市儿童医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金武汉市卫生局临床重点学科研究项目武汉市卫生局资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 双向电泳测定血清α_1酸性糖蛋白异质体的改进
- 2004年
- 胡红兵邱艳游上游
- 关键词：血清
- 呼吸道合胞病毒感染SPC-A1相关新基因zlg10con的电子克隆及分析和验证被引量：1
- 2003年
- 通过mRNA差异显示法获得了与呼吸道合胞病毒感染SPC A1细胞相关的 5 2个表达序列标签(EST)片段 ,其中的一个EST片段 g10 1在RSV感染后的细胞中高表达 .采用生物信息学原理和方法对g10 1进行了鉴定后预测这是一个新基因片段 ,经电子克隆获得了 76 1bp的延伸产物 ,并且通过了实验验证 .该基因片段含有一个典型的 5 4个氨基酸的ORF ,命名为zlg10con 。
- 李蕾赵东赤张楚瑜李乐游上游黄静宁
- 关键词：呼吸道合胞病毒SPC-A1细胞电子克隆表达序列标签
- 武汉地区儿童感染的革兰阴性杆菌质粒AmpC酶基因型调查
- 2008年
- 虞涛李长振鲍连生杨劳荣游上游
- 关键词：质粒儿童分子流行病学
- 血清CMV DNA荧光定量PCR方法的建立与初步应用被引量：1
- 2006年
- 吴旗邹俊煊虞涛张楚瑜游上游
- 关键词：巨细胞病毒荧光定量聚合酶链式反应
- 肺出血新生大鼠肺组织前列环素和血栓素B_2的变化被引量：1
- 2009年
- 目的观察肺出血新生大鼠肺组织6-酮-前列腺素(6-k-PG)、血栓素B2(TXB2)的动态变化,探讨新生儿肺出血的发病机制。方法新生大鼠40只,随机分为实验1组、实验2组、实验3组及正常对照组,每组10只。实验1、2、3组大鼠背部皮下注射1g/L肾上腺素注射液0.5mL/kg后放4℃冷室。实验1组1h后拿出,断头处死;实验2组4h拿出,断头处死;实验3组4h拿出后复温,同时注射肾上腺素1次,剂量不变,间隔1h再注射1次,剂量加倍,出冷室后2h断头处死。肉眼观察其肺组织大体病理情况,将结果分为5级:Ⅰ级正常肺,Ⅱ级肺水肿,Ⅲ级点状肺出血,Ⅳ级局灶性肺出血,Ⅴ级弥散性肺出血。采用放射免疫法测定其肺组织6-k-PG和TXB2水平。结果1.肺大体病理改变:实验1组Ⅱ级肺9只、Ⅴ级肺1只;实验2组Ⅱ级肺6只、Ⅴ级肺4只;实验3组Ⅲ级肺4只、Ⅳ级肺1只、Ⅴ级肺5只;正常对照组大鼠Ⅰ级肺10只,组间比较差异有极显著意义(P<0.01)。Ⅴ级肺电镜下见肺泡腔内有出血,部分气血屏障结构模糊。2.实验1组肺组织TXB2水平与实验2组、实验3组及正常对照组比较均明显下降(Pa<0.05)。实验1组6-k-PG/TXB2值与实验2组、实验3组及正常对照组比较均明显增高(Pa<0.05)。结论在新生大鼠肺出血的形成过程中,前列环素(PGI2)作用相应增加,PGI2使血管通透性增加,参与肺出血的发生。
- 吴春英游上游鲁建生胡红兵康世秀周泉孙金枝
- 关键词：血栓素B2前列环素出血
- 抗AIF单链抗体的构建与高效表达
- 2005年
- 目的获得具有生物活性的抗酸性同功铁蛋白(AIF)单链抗体。方法利用重组噬菌体抗体库技术从杂交瘤细胞4c9中分别克隆小鼠抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因,成功构建AIF4c9scFv基因,并将其亚克隆于原核表达载体pET28a,转化E.coliBL21(DE3),经IPTG诱导表达。表达产物经镍鏊合层析柱复性后,用ELISA和Westernblotting检测表达蛋白与AIF的结合特性。结果AIF4c9scFv表达蛋白在细胞质中主要以不溶性包涵体形式存在,优化后的柱内复性程序可从高浓度的包涵体变性蛋白中高效复性AIF4c9scFv表达蛋白,其回收率可达75%左右。AIF4c9scFv复性蛋白可特异识别AIF抗原,具有良好的AIF抗体活性,其亲和力常数(KDscFv)为7.29×10-8mol/L。表达菌体的功能性AIF4c9scFv抗体产量约为62mg/L。结论在大肠杆菌中高效表达的抗AIFScfv经柱内复性后具有较好的生物学活性。
- 艾洪武郭军庆游上游
- 关键词：单链抗体包涵体
- 抗AIF单链抗体在大肠杆菌中的可溶性表达和鉴定
- 2006年
- 目的:获得具有生物活性的抗酸性同功铁蛋白(AIF)单链抗体(scFv)。方法:将AIF4c9scFv基因亚克隆于原核表达载体pPOW3,构建重组表达质粒pPOW4c9,电转化大肠杆菌DH5α,以温度诱导重组抗AIFscFv表达,经镍螯合层析柱纯化后,用ELISA和Westernblot检测表达蛋白与AIF的结合特性。结果:抗AIFscFv抗体在大肠杆菌中获得可溶性表达,亲和力常数KD为3.18×10-8mol/L;纯化后的可溶性AIFscFv含量约为1.6mg/L。重组蛋白能特异识别AIF,并且具有良好的抗体生物学活性。结论:在大肠杆菌中表达并纯化了特异性可溶性抗AIFscFv抗体。
- 艾洪武郭军庆游上游
- 关键词：单链抗体可溶性表达
- 抗酸性同功铁蛋白重组免疫细胞因子的制备及其特性研究
- 2005年
- 目的构建并表达抗酸性同功铁蛋白(acidicisoferritin,AIF)的免疫细胞因子,并研究其抗肿瘤特性。方法在克隆小鼠趋化因子CXCL10全长基因的基础上,构建抗AIF单链抗体与CXCL10组成的重组免疫细胞因子,并在小鼠骨髓瘤细胞NSO中进行表达;使用流式细胞技术(FCM)和体外细胞趋化试验等方法来研究该重组蛋白的抗肿瘤特性。结果重组免疫细胞因子(IP10scFv)真核表达产物的相对分子质量(Mr)约为41.1×103,纯化后的蛋白浓度为68mgL,抗体亲和常数(KDIP10scFv)为2.28×10-8molL。IP10scFv能够特异识别分泌AIF的SMMC7721细胞,并能与激活后的小鼠T淋巴细胞表面CXCR3受体特异性结合,对小鼠激活的T淋巴细胞有较强的趋化作用。结论成功地制备了抗AIF单链抗体与趋化因子CXCL10构成的重组免疫细胞因子,该免疫细胞因子是肿瘤治疗的潜在制剂。
- 游上游郭军庆艾洪武陈柳
- 关键词：免疫细胞因子肿瘤重组蛋白小鼠骨髓瘤细胞SMMC7721细胞抗肿瘤特性T淋巴细胞
- 酸性同功铁蛋白单克隆抗体免疫学特性的研究
- 1999年
- 目的：探讨抗不同组织酸性同功铁蛋白（ＡＩＦ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的免疫学特性。方法：应用聚焦层析技术分别从人胎盘和原发性肝癌组织中分离出低ｐＩ值的ＡＩＦ，常规制备ＭｃＡｂ和进行免疫组织化学测定。结果：共筛选到５株抗人胎盘ＡＩＦ和２株抗人原发性肝癌（ＰＨＣ）ＡＩＦ的ＭｃＡｂ，即２ｆ８、４ｇ７、４ｇ８、５ｃ３、７ａ９和４ｃ９、４ｅ２。抗ＡＩＦＭｃＡｂｓ均与各自ＡＩＦ分子上不同抗原决定簇结合，其中针对不同组织ＡＩＦ的ＭｃＡb５ｃ３和４ｅ２作用于同一抗原决定簇。使用ＭｃＡｂ２ｆ８和４ｃ９，对正常肝组织、慢性肝炎与肝硬化和ＰＨＣ肝组织进行了免疫组织化学检查，其阳性率分别为２ｆ８：０、１０．０％、７６．３％；４ｃ９：０．６．７％、８１．６％。结论：人胎盘和ＰＨＣ组织ＡＩＦ中存在着共同的抗原决定簇，抗ＰＨＣＡＩＦＭｃＡｂ在免疫诊断中优于抗人胎盘ＡＩＦＭｃＡｂ。
- 游上游张楚瑜黄巍易先平
- 关键词：单克隆抗体免疫组织化学
- 湖北地区住院儿童产超广谱β内酰胺酶基因型与相耐药性分析
- 虞涛游上游杨劳荣罗德娟鲍连生刘秀珍尉庭华邱艳胡红兵
- 为了解该地区住院患儿分离产ESBLs大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的感染情况和流行病学特征，课题组对该院2004年5月-2005年5月临床分离的120株产ESBLs大肠埃希菌和克雷伯菌的耐药性及ESBLs基因亚型进行了分析研究...
- 关键词：
- 关键词：医院感染基因型耐药性儿童传染病
