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涂宣林
作品数:
7
被引量:42
H指数:3
供职机构:
上海医科大学
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发文基金:
国家高技术研究发展计划
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相关领域:
生物学
医药卫生
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合作作者
宋后燕
上海医科大学上海医学院
朱运松
上海医科大学
曹世龙
上海医科大学
冉瑞琼
上海医科大学
曹晓运
上海市肿瘤研究所
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上海医科大学
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上海市肿瘤研...
作者
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涂宣林
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曹世龙
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生物工程学报
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上海医科大学...
年份
4篇
1998
2篇
1996
1篇
1992
共
7
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基因工程链激酶的中试研究
被引量:3
1996年
链激酶是急性心肌梗塞溶栓治疗的特效药物。我们利用基因工程方法在大肠杆菌中高效表达重组链激酶,用10L发酵罐对工程菌进行高密度、高表达发酵,通过简便的复性和纯化流程,一次能够获得纯度达98%以上、比活性9~10万IU/mg的r-SK,可分装300~400个剂量静脉注射用r-SK冻干粉制剂。形成了中试规模的批量生产能力。
任军
黄阳滨
汤其群
吴晓俐
涂宣林
顾银良
朱运松
宋后燕
关键词:
基因工程
链激酶
中试
心肌梗塞
溶栓疗法
肺癌P16基因纯合缺失、突变、表达及临床意义
被引量:4
1998年
目的探讨P16基因的改变与肺癌生物学行为的关系。方法控制正常细胞对肿瘤组织污染后,用聚合酶链反应一单链构型多态性分析(PCR-SSCP)和免疫组织化学法对60例肺癌组织P16基因纯合缺失、突变、表达进行了研究。结果小细胞肺癌无P16基因纯合缺失、突变和蛋白表达异常。非小细胞肺癌P16基因纯合缺失率和突变率分别为40.5%和5.7%且与肿瘤细胞的分化程度、组织类型、转移和预后明显相关。非小细胞肺癌P16蛋白表达缺失率为42.3%,与p16基因纯合缺失有高度的一致性,两者的缺失符合率为76%。结论P16基因异常和失活可能与非小细胞肺癌的组织学类型、分化和预后有一定关系。
冉瑞琼
曹晓运
涂宣林
傅晓颖
宋后燕
曹世龙
关键词:
肺肿瘤
P16基因
聚合酶链反应
基因缺失
P.pastoris高效表达外源蛋白的研究进展
被引量:19
1998年
Pichiapastoris表达系统具有原核细胞和哺乳类细胞表达系统的特点,已广泛地应用于表达外源基因。为获得高质量外源蛋白的表达而进行了大量研究并取得了许多进展,如构建并筛选多拷贝的由AOX启动的表达盒,优化培液组分,减少蛋白降解,分泌蛋白的纯化和N-连接寡糖链的特点。
涂宣林
宋后燕
关键词:
酵母
外源蛋白
寡糖链的研究进展
被引量:2
1998年
糖蛋白糖链的合成受很多因素影响 ,本文着重讨论宿主因素的影响 。
涂宣林
宋后燕
关键词:
宿主细胞
抗原性
血浆清除率
糖蛋白
t-PA cDNA的克隆及其在毕赤酵母中的表达
被引量:12
1998年
应用PCR方法,在tPAcDNA5′端引入合适的限制酶位点和酵母分泌信号肽,与酵母表达载体pPIC9重组,构建表达质粒pSTEY,利用LiCl转化法转化酵母菌YS108,在MM和MD平板上筛选表型,PCR筛选tPAcDNA与酵母染色体整合而形成的阳性克隆,阳性克隆经甲醇诱导表达后,用SDSPAGE证明表达产物的分子量为6kDa左右,用酪蛋白板溶圈法测定tPA的活性。Muts表型菌表达产物活性最高为2500IU/ml,Westernblot证实表达产物具有天然tPA分子的免疫原性。
涂宣林
朱运松
宋后燕
关键词:
纤溶酶原激活剂
T-PA
酵母
CDNA
质粒
Arg-Gly-Asp三肽顺序在细胞粘连中的作用
1992年
许多复杂的生命现象如细胞分化、免疫反应、血液凝固、伤口愈合、肿瘤的形成、浸润、转移均与细胞粘连有关。细胞粘连使细胞能接受信息,并作出合适的反应以调节细胞的行为,因而了解细胞粘连的分子机制有其独特的应用价值。近年来分子生物学。
涂宣林
朱运松
关键词:
细胞
t-PA cDNA基因在CHO细胞中的稳定表达
被引量:2
1996年
建立稳定表达人组织型纤溶酶原激活剂(tissue-typeplasminogenactivator,t-PA)的细胞株。将t-pAcDNA连接在真核表达载体pcDNA3的HindⅢ位点,构建成重组质粒pcDNA3tPA,用磷酸钙介导的贴壁细胞转染法导入哺乳动物中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中,G418筛选培养后形成阳性克隆。结果:培养液中重组t-pA(Recombinantt-pA,rt-pA)活性>6000IU/106细胞d-1.Northern杂交证实t-PAcDNA基因的转录。高表达细胞连续传代10次后,培液中rt-pA活性未见明显变化。结论:转染t-PAcDNA基因的CHO细胞已形成稳定的工程细胞。
彭鲁英
涂宣林
朱慧
张艳玲
陈幼妹
宋后燕
关键词:
T-PA
卵巢细胞
CHO
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