沈晓波
- 作品数:4 被引量:13H指数:2
- 供职机构:南京工业大学化学化工学院材料化学工程国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划江苏省博士后科研资助计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:化学工程生物学更多>>
- Gluconobacter oxydans NH-10中短链D-阿拉伯糖醇脱氢酶的研究被引量:2
- 2010年
- 以氧化葡萄糖酸杆菌(Gluconobacter oxydans)NH-10基因组DNA为模板,扩增得到D-阿拉伯糖醇脱氢酶基因arDH,将其克隆到大肠杆菌表达载体JM109(DE3)中进行诱导表达。SDS-PAGE电泳分析ArDH的分子量约为30kDa,是一个短链脱氢酶,既能催化D-阿拉伯糖醇氧化为D-木酮糖,又能催化D-木酮糖还原为D-阿拉伯糖醇。催化氧化反应时,对D-阿拉伯糖醇的Km为60.67mmol/L,Vmax为0.803U/mg;它能同时依赖于NAD+和NADP+,但是更加偏好辅酶NAD+;最适pH为12.0。还原反应对D-木酮糖的Km为36.39mmol/L,Vmax为1.71U/mg;最优pH为7.0,最适温度均为30℃。
- 戴小燕沈晓波朱宏阳徐虹
- 关键词:氧化葡萄糖酸杆菌克隆
- 利用纤维床反应器固定化发酵生产丙酸被引量:7
- 2008年
- 构建了一种纤维床反应器(FBB),并将其应用于丙酸的生产。将棉纤维绕成桶状,固定于反应器中,即可用于丙酸固定化发酵。以40g/L的葡萄糖为碳源,与游离细胞相比,利用FBB生产丙酸,丙酸产量由14.58g/L提高至20.41g/L,发酵时间由120h缩短至60h。研究了不同糖浓度条件下FBB生产丙酸情况,并将补料策略应用于丙酸发酵中。结果表明:补料发酵能够有效改善Propionibacterium freudenreichii CCTCC M207015在高糖条件下丙酸对葡萄糖转化率较低、副产物较多的问题。经补料发酵280h,丙酸产量达45.91g/L,丙酸质量约占有机酸总质量比例为72.31%。
- 冯小海吴波沈晓波徐虹
- 关键词:PROPIONIBACTERIUM丙酸补料发酵
- 利用纤维床反应器固定化发酵生产丙酸
- 本文构建了一种纤维床反应器(FBB),并将其应用于丙酸的生产。将棉纤维绕成桶状,固定于反应器中,即可用于丙酸固定化发酵。以40 g/L的葡萄糖为碳源,与游离细胞相比,利用FBB生产丙酸,丙酸产量由14.58 g/L提高至...
- 冯小海吴波沈晓波徐虹
- 关键词:丙酸生物化学发酵工艺
- 文献传递
- Gluconobacter oxydans木糖醇脱氢酶基因的克隆表达及木糖醇的转化分析被引量:4
- 2009年
- 从氧化葡萄糖酸杆菌(Gluconobacter oxydans)的基因组DNA上扩增出木糖醇脱氢酶基因xdh,构建了诱导型表达载体pSE-xdh,导入E.coliJM109后获得了高效表达木糖醇脱氢酶基因的重组菌JM109/pSE-xdh。通过HisTrap HP亲和层析和SephacrylS-300分子筛两步纯化从细胞中得到纯酶,并对酶学性质进行研究。XDH最适还原反应的pH值为5.0,最适还原反应的温度为35℃;最适氧化反应的pH值为11.0,最适氧化反应的温度为30℃。重组菌中的XDH依赖NADH,对NADH的米氏常数Km=57.8 mmol/L,最大反应速率Vmax=1209.1 mmol/(ml.min)。重组菌的XDH酶活力为13.9 U/mg。利用重组菌和原始菌混合静止细胞转化D-木酮糖,16 h28.0 g/L D-木酮糖生成16.7 g/L木糖醇,而原始菌单独转化只生成8.3 g/L木糖醇。
- 沈晓波齐向辉朱宏阳徐虹
- 关键词:木糖醇脱氢酶克隆木糖醇