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TLR7/8配体R-848体外诱导小鼠脾细胞产生IgG2a的研究被引量：3: 2010年; 目的检测TLR7/8配体R-848是否能够诱导naive小鼠的脾B细胞和纯化B细胞活化、增殖及产生抗体。方法磁珠分选出纯化的B细胞,将制备好的脾细胞或纯化B细胞,与R-848共培养,流式细胞术检测R-848对B细胞活化和增殖的影响;ELISA检测R-848是否能够诱导脾细胞产生IgG2a和IgG1,并检测与抗体产生相关的细胞因子的产生。结果 R-848上调B细胞表面活化分子CD25和CD80的表达,促进B细胞活化和分裂;R-848以剂量依赖方式诱导小鼠脾细胞产生IgG2a和IgG1;同时诱导脾细胞产生IFN-γ、IL-12P40、IL-10和IL-6。结论 R-848直接作用于B细胞促进其活化和分裂;R-848促进脾细胞产生大量的IgG2a,可能与其增强IFN-γ、IL-6和IL-10的产生有关。; 沈二霞吴长有; 关键词：B细胞 IGG2A IFN-Γ

小鼠脾细胞CD4^+ CD25^+调节性T细胞的表型特征被引量：5: 2006年; 观察CD4+CD25+T和CD4+CD25-T细胞的表型和细胞因子的表达。自小鼠脾脏制备单个细胞悬液,分离CD4+T细胞、CD4+CD25+和CD4+CD25-T细胞,进行细胞表面标记,激活后进行细胞内细胞因子染色,利用流式细胞仪在单个细胞水平上分析细胞表面分子、转录因子和细胞因子表达之间的关系。结果:在CD4+T细胞中,约有7.8%的细胞同时表达CD25分子。与CD4+CD25-T细胞相比,CD4+CD25+T细胞CD44的表达略有增加,CD45RB的表达明显下降,CTLA-4和Foxp3明显增加。以同时表达CTLA-4和Foxp3的细胞为主,其次为单独表达Foxp3的细胞。细胞因子的研究结果表明,与CD4+CD25-T细胞相比,CD4+CD25+T细胞IL-2、IFN-γ明显减少,而只产生IL-10的细胞略有增加。CD4+CD25+调节性T细胞无论在表型、转录因子的表达以及细胞因子表达方面均于非调节性T细胞不同。; 杨滨燕沈二霞吴长有; 关键词：CD4^+CD25^+T细胞细胞表型

CD4^+CD25^+调节性T细胞对B细胞免疫应答的抑制作用被引量：13: 2006年; CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg细胞)主要来源于胸腺,在体内外抑制CD4+或CD8+T细胞的活化及增殖,是维持自身免疫耐受的重要机制之一。近来研究发现该调节性T细胞除了能够抑制T细胞的免疫应答外,还能够抑制B细胞免疫应答,包括抑制B细胞活化和抗体生成,从而抑制主要由抗体介导的自身免疫性疾病的发生。; 沈二霞吴长有; 关键词：CD4^+CD25^+TREG细胞 B细胞

川崎病患者血清IL-10水平及意义: 2015年; 目的通过检测川崎病(KD)患者血清白细胞介素10(IL-10)的表达水平,探讨其水平变化与川崎病病情发展及冠脉损害(CAL)的关系,为川崎病的防治提供基础理论依据。方法选取符合50例川崎病患者为研究对象,同时选取年龄和性别相匹配的正常健康儿童20例为对照组,采用酶联免疫吸附试验检测血清IL-10水平,采用超声心动图检测患者冠状动脉扩张程度,并进行独立及配对样本的t检验分析,所有结果以P<0.05为差异有统计学意义。结果 1 KD急性期及亚急性期患者IL-10水平均显著高于恢复期及正常对照组(P<0.05);2 KD急性期无CAL亚组IL-10水平较CAL亚组及对照组显著升高(P<0.05),CAL亚组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 KD患者急性期、亚急性期血清IL-10水平显著升高,但仅其中无合并CAL患者血清IL-10水平显著升高,提示IL-10可能参与了川崎病的免疫学发病机制,并且对于冠脉内皮细胞损伤起保护作用。; 谢海瑞沈二霞赖丽丽颜海青张茜欧阳伶钟苑春陈妙婷; 关键词：川崎病冠脉损害

TLR7/8配体R-848体外抑制小鼠纯化B细胞产生IgE的机制研究: 2011年; 目的:观察TLR7/8配体R-848对小鼠纯化B细胞产生IgE的调节作用及其可能机制。方法:制备小鼠脾细胞悬液,用磁珠分选出脾细胞中的CD19+B细胞;纯化的B细胞在基础培养液、含anti-CD40+IL-4加或不加R-848的培养液:采用ELISA的方法检测IgE的浓度;流式细胞术检测B细胞的活化情况;CFSE标记B细胞,培养后检测细胞的分裂情况。结果:R-848以剂量依赖方式抑制anti-CD40+IL-4诱导的B细胞产生IgE,增强anti-CD40+IL-4诱导的B细胞的活化。R-848能够直接作用于B细胞,抑制anti-CD40+IL-4诱导的B细胞分裂。结论:R-848抑制B细胞产生IgE,可能与其抑制anti-CD40+IL-4诱导的B细胞的分裂有关。; 沈二霞吴长有; 关键词：IGE

PIKA佐剂在体内外诱导小鼠免疫应答的探讨被引量：5: 2006年; 目的探讨PIKA佐剂在体内外诱导小鼠的免疫应答。方法体外将小鼠脾淋巴细胞与不同浓度PIKA佐剂培养后,ELISA检测细胞因子IFN-γ、IL-12p40的产生,FACS检测细胞的增殖及活化。体内将PIKA佐剂经小鼠腹腔注射后,检测不同时间点血清中IFN-γ、IL-12p40、IL-6、TNF-α等细胞因子的产生。结果PIKA佐剂体外呈剂量依赖性诱导小鼠脾细胞产生IFN-γ和IL-12p40。细胞亚群分析的结果表明,PIKA可显著刺激B细胞和NK细胞活化、增殖。体内注射PIKA佐剂后可诱导细胞因子IFN-γ、IL-12p40、IL-6、TNF-α的产生,但产生的时间点不同。结论PIKA佐剂体内外直接通过诱导细胞因子的产生,B细胞和NK细胞的活化和增殖,而促进免疫应答反应。; 李丽沈二霞黄俊王永生马瑞冯炼强李烈涛林海祥吴长有; 关键词：皮卡佐剂 B细胞 NK细胞

儿童哮喘危险因素的Meta分析及归因危险度百分比的探讨被引量：6: 2013年; 目的：分析儿童哮喘发病相关危险因素，为临床早期干预提供依据。方法；收集国内1995年1月～2012年11月公开发表的关于儿童哮喘发病危险因素的研究文献进行Meta分析及人群归因危险度百分比，查找儿童哮喘发病危险因素。结果：个人过敏史、特应性体质、家族哮喘史、一二级家族过敏史、感冒、呼吸道感染、环境因素包括异味、吸烟、吸。人物等是发生儿童哮喘的危险因素，母乳喂养是保护因素。危险因素权重估计分别为个人过敏史11．15％，特应性体质14．29％，家族哮喘史19．17％，一二级家族过敏史21．44％，诱因1感冒、呼吸道感染26．22％，诱因2环境异味、吸烟、吸人物等7．73％。结论：对于特应性体质儿童提倡母乳喂养，尽量避免呼吸道感染，避开常见吸人性过敏原或可预防儿童哮喘发生。; 谢海瑞胡罡沈二霞林宇毛艳萍; 关键词：儿童哮喘 META分析

新型调节性T细胞:iTR35被引量：4: 2012年; 调节性T细胞是不同于Th1和Th2的具有调节功能的T细胞群体,因其具有免疫抑制功能,在多种免疫性疾病中起重要的调节作用,近年日益受到人们的广泛关注。最近的研究证明IL-35能够诱导生成一种新型调节性T细胞,这种新型调节性T细胞通过分泌IL-35和IL-10起免疫抑制功能,称为"iTr35"。与TGF-β诱导的iTreg不同,iTr35不表达Foxp3,其功能的维持也与Foxp3无关。更为重要的是,与TGF-β诱导的iTreg相比,iTr35在体内非常稳定,因此人们推测iTr35在感染耐受的形成中起重要的作用。; 沈二霞; 关键词：IL-35 TGF-Β FOXP3 调节性T细胞

广州管圆线虫感染小鼠脾脏T淋巴细胞亚群和细胞因子的变化: 2012年; 目的观察小鼠感染广州管圆线虫后脾脏T淋巴细胞亚群及其细胞因子分泌水平的变化。方法用从感染褐云玛瑙螺分离的广州管圆线虫第3期幼虫感染BALB/c小鼠,感染后第19d及第25d分批处死小鼠,分离脾细胞,使用细胞内细胞因子荧光染色方法,用流式细胞仪检测脾脏淋巴细胞中的T细胞亚群的含量,用双抗夹心ELISA法检测脾细胞培养上清细胞因子的浓度。结果与对照组比较,感染小鼠脾脏CD4+、CD4+IL-4+T淋巴细胞比例显著上升,而CD4+IL-17+、CD4+IFN-γ+T淋巴细胞比例显著下降;脾细胞培养上清细胞因子IL-4水平明显升高,而IL-17水平明显下降。同时,感染程度和感染时间等因素也可造成脾脏T淋巴细胞亚群及其细胞因子分泌水平的变化。结论小鼠感染广州管圆线虫后,表现以脾脏CD4+T淋巴细胞大量增殖和Th2型淋巴细胞极化为特点。; 罗晓东沈二霞陈代雄丁雪李华; 关键词：广州管圆线虫 T淋巴细胞亚群细胞因子

免疫磁珠两步法体外分离纯化小鼠脾脏CD4^+CD25^+调节性T细胞的应用研究被引量：1: 2011年; 目的研究免疫磁珠两步法体外分离纯化小鼠脾脏CD4+CD25+调节性T细胞(regu-latory T cells,Treg)的效果。方法将C57BL/6(H-2b)小鼠脾脏剪碎、过滤、去除红细胞后离心洗涤,获得小鼠脾细胞悬液。用Ficoll法分离获得单个核细胞后,通过免疫磁珠阴性加阳性选择两步法分离获得CD4+CD25+Treg和CD4+CD25-Treg。用流式细胞仪检测所获得CD4+CD25+Treg的纯度,并比较纯化分离前后脾脏CD4+CD25+Treg的比例,用台盼蓝染色后计算CD4+CD25+Treg的细胞存活率,并对分离后的细胞表型进行鉴定。结果免疫磁珠阴性加阳性选择两步法纯化分离后CD4+CD25+Treg的纯度为(88.7±2.9)%,分离前CD4+CD25+Treg的平均比例为11.6%,纯化分离后CD4+CD25+Treg的平均比例为93.7%。细胞存活率为(93.7±4.1)%。与CD4+CD25-Treg相比,CD4+CD25+Treg的CD44表达略有增加(P>0.05),CD45RB的表达明显下降(P<0.05),CTLA-4和Foxp3的表达明显增加(均为P<0.05)。结论使用免疫磁珠两步法分离纯化,能避免激惹CD4分子,可获得高纯度且具有天然CD4+CD25+Treg表型的细胞。; 黄克力朱平卢聪朱小兰麦明杰沈二霞吴若彬刘怀普黄晶晶王巍谢波; 关键词：CD4+CD25+调节性T细胞流式细胞术小鼠

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沈二霞

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