汪东篱
- 作品数：11 被引量：30H指数：3
- 供职机构：四川大学华西公共卫生学院更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 降血糖的天然食品被引量：2
- 2003年
- 汪东篱刘衡川汪川裴晓方旺拉
- 关键词：降血糖天然食品糖尿病蔬菜类
- 淋球菌临床分离株外膜蛋白PI基因序列与耐药性关系初探被引量：1
- 2007年
- 目的研究成都地区淋球菌临床分离株PI基因序列与青霉素和四环素耐药性的关系。方法用T-A克隆的方法得到H基因克隆重组子，对PI基因测序后，用序列分析软件进行分析。同时测定青霉素和四环素对淋球菌的最低抑菌浓度，比较耐药性与PI基因序列的相关关系。结果成功克隆并测序淋球菌H基因，17条PI序列根据blastn结果可分为PIA和PIB两类。序列在影响淋球菌耐药性的第120和121位的氨基酸序列仅有部分发生单位点的D突变，未见文献报道的双位点D突变。5-9、6-1两条序列在120位发生K突变，且2株菌的耐药性均处于中等水平，与文献报道一致。结论成都地区淋球菌临床分离株外膜蛋白PI的序列与染色体介导的青霉素和四环素耐药性可能存在一定的相关关系，是否与肼基因序列120和121位氨基酸残基突变相关，还有待调查更多的临床分离株。
- 雍刚汪东篱滕毅沈圣邱晋谢志梅裴晓方
- 关键词：淋球菌耐药性
- 婚检人群艾滋病性病健康教育干预效果分析被引量：1
- 2004年
- 裴晓方占利文华许欣余倩潘晓莉刘祥汪川林怡伶汪东篱孟玲
- 关键词：艾滋病病性性病婚检人群健康教育干预基础知识教育
- 沙门菌、志贺菌和大肠杆菌O157∶H7的多重PCR快速检测体系的初步探讨被引量：12
- 2005年
- 目的建立能在12小时内同时快速检测沙门菌、志贺菌和大肠杆菌O157∶H7的多重PCR体系。方法碱性蛋白胨水(BPW)非选择性增菌6h;100℃10min制备DNA模板;根据大肠杆菌O157∶H7的uidA基因、志贺菌的ipaH基因及沙门菌的invA基因序列设计各菌引物,进行PCR扩增及电泳检测。同时优化反应体系,测定体系灵敏度和特异性。结果该多重PCR体系能在12h内同时检测3种目的菌;灵敏度为10～30cfuml;通过对23株目的菌和15株非目的菌检测,提示该体系特异性高。结论初步探讨出能在12h内快速、灵敏、特异地同时测定沙门菌、志贺菌和大肠杆菌O157∶H7的多重PCR体系。
- 何超樊学军汪东篱刘丽英王翠苹裴晓方
- 关键词：多重PCR沙门菌志贺菌大肠杆菌O157:H7
- 淋球菌外膜蛋白NspA基因重组子的构建与表达被引量：3
- 2006年
- 目的构建淋球菌标准株外膜蛋白NspA基因重组子,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达外膜蛋白NspA。方法提取淋球菌标准株基因组DNA,PCR扩增其NspA基因,插入表达质粒载体pET-30c(+)中,构建pET-NspA重组子,转化表达宿主大肠杆菌BL21(DE3),异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达,SDS-PAGE和WesternBlot检测表达蛋白。结果成功构建了淋球菌标准株的pET-NspA大肠杆菌表达重组子,经IPTG诱导表达后,该蛋白在大肠杆菌中高效表达。结论淋球菌外膜蛋白NspA在大肠杆菌中的成功表达,为研究该蛋白的免疫学性能、制备抗体和研制预防淋病的疫苗奠定了基础。
- 占利张朝武汪东篱许欣孟玲何超周爱萍裴晓方
- 关键词：淋球菌蛋白质表达
- 淋球菌临床分离株PI基因序列的测定与分析被引量：3
- 2005年
- 目的 :分析比较 4株临床分离的淋球菌和 2株标准菌株外膜蛋白PI基因及蛋白质序列 ,初步探索我国淋球菌的变异情况 ,为淋球菌多态性研究、PI基因的表达和疫苗研制提供依据。方法 :构建pBS T PI克隆重组子并进行测序 ,用blastn和CLUSTALW分析基因和蛋白质序列的相似性 ,并与已发表的序列进行比较 ,预测并分析所得PI基因的loop (表面暴露区域 )结构。结果 :在GenBank中搜索到相似性大于 98%的序列 ,6条序列分别属于PIA和PIB两个亚型 ,其中PI 4的序列与GenBank中的相应序列有 18个位点的差异 ,可能为我国特有的流行株。位于 7个loop结构中的变异位点占 3条PIA蛋白间总变异的 6 7% ,占 3条PIB蛋白间总变异的 84 % ,变异程度较高。结论 :成功克隆了临床分离的淋球菌株和标准菌株的PI基因并进行序列分析 ,为深入研究我国流行的淋球菌菌株的多态性、PI基因的表达和疫苗研制奠定了基础。
- 汪东篱文华占利孟玲许欣雍刚裴晓方
- 关键词：淋球菌疫苗基因序列基因组
- 淋球菌外膜蛋白PI基因重组子的构建和表达被引量：1
- 2005年
- 目的 扩增四株淋球菌外膜蛋白 PI基因 ,构建 p ET30 b- PI- NG重组子 ,在大肠杆菌中诱导表达外膜蛋白 PI。方法 采集临床淋球菌四株 ,提取细菌基因组 DNA,PCR扩增外膜蛋白 PI基因 ,与克隆载体 p BS- T连接 ,构建 p BS- T- PI- NG重组子 ,测序 ,目的基因插入表达质粒载体 p ET30 b中 ,构建 p ET30 b- PI NG重组子 ,转化表达宿主大肠杆菌 BL 2 1(DE3) ,IPTG诱导蛋白质表达 ,SDS- PAGE初步分析。结果 成功构建了四株淋球菌的p ET30 b- PI大肠杆菌表达重组子 ,经 IPTG诱导表达后 ,其中三株获得表达的目的蛋白 PI。结论 本研究为 PI蛋白免疫学特性的研究、抗体制备、以及预防淋病疫苗的研制奠定了基础。
- 文华占利汪东篱许欣雍刚裴晓方
- 关键词：淋球菌蛋白质表达
- 不同因素对染菌湿巾样片回收菌数的影响
- 2005年
- 为研究不同因素对染菌湿巾样片回收菌数的影响,采用活菌计数法,对湿巾染菌时间、样片干燥程度和斜面培养条件等因素进行了试验观察.结果,随染菌样片放置时间的延长,回收菌数呈下降趋势;染菌样片完全干燥后的回收菌数比初始菌数显著性降低;金黄色葡萄球菌的斜面培养物在4℃放置18～24 h后制备的染菌样片,其回收菌数与不放者有明显差别.结论,染菌样片放置时间、菌片干燥程度及新鲜斜面经4℃保存等因素均影响样片上细菌的回收.
- 汪川张朝武汪东篱余倩
- 关键词：菌片
- 淋球菌外膜蛋白PI的克隆、序列分析及表达
- 目的:构建淋球菌PI基因T-A克隆重组载体，对PI基因进行序列分析，以寻找PI基因抗原稳定性位点;构建PI基因表达重组子，诱导表达及纯化重组PI蛋白，研究重组蛋白的功能，为后续PI蛋白免疫学特性的研究、抗体制备，及淋病疫...
- 汪东篱
- 关键词：淋球菌重组蛋白
- 文献传递
- 耐辐射奇球菌超氧化物歧化酶基因的克隆和表达被引量：4
- 2005年
- 目的 构建耐辐射奇球菌 (D.radiodurans)锰超氧化物歧化酶 (Mn- SOD)基因的原核表达重组子 ,并在 E.coli BL 2 1(DE3)中表达。方法 用 PCR方法自 D. radiodurans基因组中扩增 Mn- SOD目的片段。将该基因与原核表达质粒载体 p ET- 30 a(+)连接 ,构建重组质粒 p ET- SOD,并转化表达宿主菌 E.coli BL 2 1(DE3)。用异丙基硫代 -β- D-半乳糖苷 (IPTG)诱导重组 SOD蛋白表达 ,SDS- PAGE分析表达产物。结果 获得了 D . radioduransMn- SOD基因的 p ET原核表达重组质粒 ,该质粒经 IPTG诱导能在 E.coli BL 2 1(DE3)中高效表达目的蛋白 ,蛋白活性可达 5 180 0 U / g湿菌体。结论 成功构建了原核表达重组质粒 p ET- SOD,实现了 SOD在原核细胞中的高效表达 ,表达产物活性较高 ,为重组 D. radiodurans Mn- SOD的进一步研究和应用奠定了基础。
- 孟玲许欣汪东篱占利裴晓方
- 关键词：耐辐射奇球菌超氧化物歧化酶基因克隆
