毛爱军
- 作品数:16 被引量:231H指数:9
- 供职机构:中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划中国科学院知识创新工程国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学化学工程农业科学轻工技术与工程更多>>
- 里氏木霉内切-β-葡聚糖酶Ⅱ基因在毕赤酵母中的表达及酶学性质研究被引量:35
- 2004年
- 采用外显子拼接的方法,以里氏木霉Trichoderma reesei基因组 DNA 为模板,克隆出内切-1,4-β-D-葡聚糖酶II基因egl2的全编码序列,将其插入巴斯德毕赤酵母Pichia pastoris表达载体pPIC9K中,并位于α-因子信号肽序列的下游,获得重组质粒pQY2025。重组质粒线性化后用电穿孔法导入毕赤酵母Pichia pastoris菌株GS115中,经大量筛选,获得高效分泌表达内切葡聚糖酶II的毕赤酵母工程菌株Gp2025。用甲醇诱导培养基进行摇瓶发酵,培养基中内切葡聚糖酶II的活力可达1573.0U/mL,同时对重组内切葡聚糖酶II的性质进行了初步研究。
- 乔宇毛爱军何永志刘伟丰董志扬
- 关键词:里氏木霉基因毕赤酵母
- 一株生产木聚糖酶的巴氏毕赤酵母及其构建方法与应用
- 本发明公开了一株生产木聚糖酶的巴氏毕赤酵母及其构建方法与应用,本发明提供的生产木聚糖酶的巴氏毕赤酵母(Pichia Pastoris)PGX722,已于2002年11月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中...
- 董志扬毛爱军祝令香
- 文献传递
- 荷斯坦奶牛瘤胃微生物元基因组BAC文库的构建与分析被引量:28
- 2007年
- 采用未培养技术和脉冲场电泳技术直接从瘤胃微生物提取到大小在2Mb左右混合微生物DNA,经HindⅢ不完全酶切获得50~100kbDNA片段,将其连接在pCC1BAC载体上,转化E.coliEPI300,得到瘤胃微生物BAC文库,经对文库的鉴定分析,该文库的平均插入片段54.5kb,空载体率小于2%,库容837Mb,共保存15360个克隆。通过对该文库进行部分酶活性筛选,获得具有淀粉酶活性的克隆16个;纤维素酶活性的克隆26个,而且能降解纤维素的克隆中25个呈现多酶活性。这些结果表明该文库具有重要研究价值。
- 朱雅新王加启马润林黄力董志扬毛爱军罗淑萍
- 关键词:瘤胃微生物细菌人工染色体文库
- 扣囊复膜孢酵母β-葡萄糖苷酶基因在毕赤酵母中的克隆与表达被引量:10
- 2005年
- 利用PCR技术,从扣囊复膜孢酵母的总DNA中扩增得到β-葡萄糖苷酶(β-Glucosidase)基因(BGL1),长度为2596bp,连接到pGEM-T载体上,用限制性内切酶切下目的基因,插入到巴斯德毕赤酵母表达载体pPIC9K中,使之位于α-因子信号肽下游,且与之同框,构建成重组质粒pSHL9K。通过电转化将重组质粒pSHL9K插入到PichiapastorisGS115菌株染色体中,获得高效表达BGL1基因的毕赤酵母重组工程菌株。重组酶的最适温度为50℃,最适pH为5.4。培养基中β-葡萄糖苷酶活性最高可达47U/mL。
- 邵金辉赵云毛爱军朱雅新董志扬江宁
- 关键词:Β-葡萄糖苷酶
- 多粘芽孢杆菌 (Bacillus polymyxa) β-葡萄糖苷酶基因在大肠杆菌中的表达、纯化及酶学性质分析被引量:28
- 2004年
- 从多粘芽孢杆菌 (Bacilluspolymyxa 1 794 )中克隆得到 β_葡萄糖苷酶基因bglA。将其构建在大肠杆菌 (Es cherichiacoli)表达载体pET2 8a(+)上 ,转化E .coliBL2 1,获得重组工程菌BL1979。重组表达的 β_葡萄糖苷酶的酶活力达到 2 4 7IU mL ,经镍柱纯化后的 β_葡萄糖苷酶最适温度为 37℃ ,最适pH值为 7 0 ,该酶经纯化后纯度可达92 7%。用非变性梯度聚丙烯凝胶电泳发现该酶具有多种寡聚体形式 ,经荧光底物活性染色表明这些寡聚体均具有
- 赵云刘伟丰毛爱军江宁董志扬
- 关键词:Β-葡萄糖苷酶多粘芽孢杆菌
- 黑曲霉糖化酶和木聚糖酶基因在工业用酿酒酵母中的共表达被引量:8
- 2004年
- 构建了黑曲霉糖化酶、木聚糖酶基因双表达的酵母YIp型载体pNEW4,通过与G418抗性质粒共转化,将糖化酶和木聚糖酶基因表达元件整合到多倍体酒精生产用酵母S. cerevisiae2.346染色体上,获得了整合型分泌表达这两种酶的工业酿酒酵母工程菌株GX11,研究了重组糖化酶和木聚糖酶在酵母工程菌中的表达及性质。
- 李海燕毛爱军何永志董志扬
- 关键词:糖化酶木聚糖酶
- 耐碱性木聚糖酶基因在短小芽孢杆菌中高效分泌表达的研究被引量:14
- 2004年
- 从木聚糖酶高产短小芽孢杆菌 (Bacilluspumilus)BP5 1中克隆得到木聚糖酶基因xynA ,将其构建在芽孢杆菌表达载体pWH1 5 2 0中得到重组质粒pWSX1 1。xynA由木糖诱导xylA启动子调控xynA表达。采用同源高效表达策略 ,以原生质体转化方法将pWSX1 1转回原始菌株BP5 1中 ,获得重组菌株BPX1 1。通过木糖诱导重组菌株中的xy nA基因高效分泌表达 ,使木聚糖酶产酶活力比原菌株BP5 1提高了 87% 。
- 刘伟丰毛爱军祝令香赵云董志扬
- 关键词:木聚糖酶耐碱性短小芽孢杆菌分泌表达
- 耐碱性木聚糖酶高产基因工程菌构建及应用
- <正>内切β-1,4-木聚糖酶[EC3.2.1.8]是木聚糖酶系中最主要的酶,它通过催化水解木聚糖主链内部的β-1,4-木糖苷键来降解木聚糖,其产物以寡聚木糖、木二糖为主伴有少量的木糖。随着木聚糖酶在造纸、饲料及食品发酵...
- 刘伟丰毛爱军祝令香于巍赵云董志扬
- 文献传递
- 一种木聚糖酶及其生产方法与专用生产菌株
- 本发明公开了一种木聚糖酶及其生产方法与专用生产菌株,本发明提供的生产木聚糖酶的巴氏毕赤酵母,是基因组中包含有与序列表中序列1的DNA序列至少90%同源性或相同性的DNA序列的巴氏毕赤酵母。巴氏毕赤酵母(Pichia Pa...
- 董志扬毛爱军祝令香
- 文献传递
- 纤维素酶在木质纤维素生物质转化中的应用研究被引量:38
- 2004年
- 选育得到纤维素酶高产菌株里氏木霉突变菌株 (Trichodermareesei) 81 3A ,优化了其发酵产酶条件。利用该菌株所产纤维素酶对天然木质纤维素的水解糖化过程进行研究 ,确定了实验条件下最优的糖化条件 (温度 5 0℃ ,pH 4 5 ,酶浓度 6~ 8FPU mL ,底物浓度 2 % )。以玉米叶和杨树叶为天然纤维素原料 ,水解糖化率分别达到 86 2 %和 5 6 0 %。通过酿酒酵母 (Saccharomycescerevisiae)将糖化液转化为酒精 ,产乙醇浓度达到 5 %~ 5 8% ,转化率为79 4 %~ 92 1 %。
- 沈金龙毛爱军王远亮江宁董志扬
- 关键词:纤维素酶木质纤维素生物转化菌株