殷青青
- 作品数：6 被引量：11H指数：2
- 供职机构：山东大学更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 糖基化终末产物对SH-SY5Y细胞内质网应激的影响被引量：2
- 2012年
- 目的研究糖基化终末产物(AGEs)对体外培养的神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)内质网应激的影响,探讨AGEs在AD发病中的可能机制。方法以糖基化修饰的牛血清白蛋白(AGE-BSA)分别处理SH-SY5Y细胞0、12、24、48 h,蛋白质免疫印迹法检测内质网应激(ERS)相关蛋白GRP78、p-eIF2α、Caspase-12的表达水平。再将细胞随机分为正常对照组(NC组)、牛血清白蛋白对照组(BSA组)、AGE-BSA组、AGE-BSA+抗RAGE中和抗体组(RAGE-Ab组)、AGE-BSA+α-硫辛酸组(ALA组)、AGE-BSA+NADPH氧化酶抑制剂DPI组(DPI组)。蛋白免疫印迹法半定量检测各组细胞ERS相关蛋白表达水平变化,同样处理后用免疫荧光染色观察GRP78、p-eIF2α表达水平,应用活性氧荧光探针DCFH-DA检测各组细胞活性氧(ROS)水平。结果 AGE-BSA处理细胞24 h后免疫蛋白印迹可见GRP78、p-eIF2α出现表达高峰,同时荧光染色可见两者高水平表达,48 h后Caspase-12表达水平显著升高,且ROS水平达到NC组的6.95倍。与AGE-BSA组相比,RAGE-Ab组、ALA组、DPI组的ROS水平都有不同程度的降低(P<0.01),同时GRP78、p-eIF2α、Caspase-12的表达水平均有明显下调(P<0.01或P<0.05)。结论 AGEs可诱导SH-SY5Y细胞ROS产生,并通过启动氧化应激及内质网应激对细胞造成损伤。
- 董传芳刘雪平徐松王美霞殷青青孙志坚游丽
- 关键词：糖基化终末产物阿尔茨海默病活性氧内质网应激
- FPS-ZM1对糖基化终产物诱导海马区Aβ代谢水平的影响被引量：1
- 2014年
- 目的观察RAGE受体阻断剂FPS-ZM1对高级糖基化终产物(AGEs)诱导海马区Aβ及相关代谢因素表达水平的影响。方法将40只大鼠随机分为生理盐水组(NC组)、FPS-ZM1对照组、AGEs组和FPS-ZM1组。向大鼠海马区注射AGEs,以建立AGEs脑损伤模型,并用FPS-ZM1干预。造模3周后HE染色观察海马区神经元病理改变;Morris水迷宫实验检测逃逸潜伏期(EL);蛋白印迹法检测各组RAGE、p-NF-κB、BACE1和APP的蛋白表达;酶联免疫吸附法检测各组Aβ1-40、Aβ1-42的水平。结果与NC组、FPS-ZM1对照组相比,AGEs组及FPS-ZM1组海马神经元排列疏松,p-NF-κB、BACE1和APP的蛋白表达和Aβ1-40、Aβ1-42浓度均升高(P<0.01);但FPS-ZM1组上述改变均明显低于AGEs组,同时AGEs组RAGE表达明显增强,EL显著延长(P<0.01),但FPS-ZM1组与NC组和FPS-ZM1对照组相比无统计学差异(P>0.05)。结论 RAGE受体阻断剂FPS-ZM1能通过降低Aβ及相关代谢因素的表达水平,有效抑制AGEs所致的脑损伤。
- 孙梦晗洪艳侯训尧马莹娟申超殷青青陈健罗鼎真刘雪平
- 关键词：高级糖基化终末产物Β分泌酶AΒ
- 胰岛素抵抗大鼠脑组织损伤机制以及番茄红素的保护作用研究
- 研究目的： 观察胰岛素抵抗大鼠胰岛素敏感性、中枢胰岛素信号通路蛋白表达水平的变化以及番茄红素的干预作用;观察胰岛素抵抗大鼠脑组织认知功能、AGEs/RAGE、抗氧化系统产物、炎症反应因子、PPARγ表达等变化以及番茄红...
- 殷青青
- 关键词：番茄红素胰岛素抵抗
- 糖基化终末产物对SH-SY5Y细胞氧化应激及凋亡的影响被引量：4
- 2012年
- 目的研究糖基化终末产物(AGEs)对人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)凋亡的影响,探讨AGEs与阿尔茨海默病(AD)发病机制的关系。方法分别以不同浓度糖基化修饰的牛血清白蛋白(AGE-BSA)处理SH-SY5Y细胞48 h,选取AGE-BSA敏感浓度(200μg/mL)处理细胞不同时间,流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率,确定AGE-BSA诱导SH-SY5Y凋亡最佳浓度及时间。将细胞随机分为对照组、牛血清白蛋白(BSA)对照组、AGE-BSA组、AGE-BSA+抗RAGE中和抗体组、AGE-BSA+α-硫辛酸组、AGE-BSA+DPI(NADPH氧化酶抑制剂)组。FCM检测细胞凋亡率变化,Hoechst 33258染色观察细胞形态改变,应用活性氧荧光探针DCFH-DA检测活性氧(ROS)水平,Western blot测定Caspase-12的表达。结果细胞凋亡率随AGE-BSA浓度增加及作用时间延长而升高,200μg/mL AGE-BSA作用48 h细胞凋亡率从对照组的(2.23±0.08)%增加到(16.8±1.27)%(P<0.05),同时,Hoechst染核后可见典型凋亡形态改变,细胞内ROS水平显著增高,Caspase-12蛋白表达明显上调,与对照组相比差异显著(P<0.05),而分别用抗RAGE中和抗体、α-硫辛酸、DPI预处理后再加入AGE-BSA,各组与AGE-BSA组比较,凋亡率明显下降,ROS水平、Caspase-12蛋白表达均明显降低(P<0.05)。结论糖基化终末产物可刺激SH-SY5Y细胞产生大量ROS及活化Caspase-12介导细胞凋亡,通过阻断其与特异性受体RAGE结合或减少细胞内ROS可减轻细胞凋亡的发生。
- 董传芳刘雪平王美霞徐松殷青青孙志坚游丽
- 关键词：阿尔茨海默病活性氧CASPASE-12
- 糖基化终末产物对大鼠基底前脑胆碱能神经元的损伤作用被引量：1
- 2012年
- 目的研究糖基化终末产物(AGE-BSA)对原代培养的基底前脑胆碱能神经元形态、生存率、凋亡率、胆碱乙酰转移酶(ChAT)与乙酰胆碱酯酶(AchE)活性的影响。在体外水平研究AGEs在阿尔茨海默病(Alzheimer's dis-ease,AD)神经元缺失发生中的作用及其可能机制。方法原代培养大鼠基底前脑胆碱能神经元,观察细胞生长变化,进行免疫荧光细胞化学鉴定;用300μg/mLAGE-BSA以及糖基化终末产物受体(RAGE)中和抗体阻断处理原代培养的基底前脑胆碱能神经元,作用不同时间后置于倒置显微镜下观察细胞形态变化;采用MTT法检测神经元的存活率;采用流式细胞术检测神经元的凋亡率;经比色法检测ChAT和AchE的活性变化。结果 AGE-BSA干预胆碱能神经元72 h后,细胞形态发生明显损伤性变化,细胞存活率明显降低,凋亡率增高,ChAT活性明显下降,AchE活性明显升高;RAGE中和抗体阻断组72 h较之AGE-BSA组,细胞形态损伤变化较轻,生存率偏高,凋亡率较低,ChAT活性较高,AchE活性偏低,但比空白对照组生存率降低,凋亡率增高,ChAT活性明显下降,AchE活性明显升高。结论糖基化终末产物作用72 h可以引起胆碱能神经元的损伤,并造成ChAT活性下降和AchE活性明显升高,部分阻断其与特异性受体RAGE的结合可以减弱其损伤作用,提示糖基化终末产物通过其受体参与了对胆碱能神经元的损伤作用。
- 殷青青刘雪平董传芳董雪丽李艳菊罗鼎真侯训尧
- 关键词：阿尔茨海默病糖基化终产物胆碱能神经元胆碱乙酰转移酶乙酰胆碱酯酶
- 糖基化终末产物对大鼠海马结缔组织生长因子与炎症因子表达的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨糖基化终末产物(AGEs)对大鼠海马区结缔组织生长因子(CTGF)与炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF-α)表达的影响及其可能的机制。方法 50只Wistar大鼠随机分为5组(每组10只),各组用微量注射泵海马内注射法制造动物损伤模型。3周后:通过免疫组织化学检测各组大鼠海马转化生长因子β1(TGF-β1)、CTGF表达;通过Westernblot检测大鼠海马TGF-β1、CTGF以及炎症因子IL-1β和TNF-α表达并进行蛋白半定量分析。结果在AGE-BSA组大鼠的大脑海马区神经元内TGF-β1、CTGF着色呈棕黄色,颜色灰度明显高于正常对照组;AGE-BSA组TGF-β1、CTGF、IL-1β和TNF-α蛋白表达明显高于正常对照组(P<0.01);与AGE-BSA组比较,RAGE中和抗体组TGF-β1、CTGF、IL-1β和TNF-α蛋白表达明显减少(P<0.05)。结论糖基化终末产物通过与其受体(RAGE)结合促进TGF-β1的表达上调,进而导致海马区神经元内CTGF的高表达,而且可以造成炎症因子IL-1β和TNF-α表达增多。
- 殷青青侯亮王美霞徐松徐婧婧刘雪平
- 关键词：白细胞介素1Β肿瘤坏死因子Α糖基化终末产物结缔组织生长因子
