段现花
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 供职机构：徐州医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目徐州市科技发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 新生大鼠海马神经干细胞的离体培养及细胞连接的超微结构观察被引量：5
- 2013年
- 目的观察体外培养的新生大鼠海马神经干细胞球的超微结构特点。方法取处于指数期的原代培养7d的新生大鼠海马神经干细胞,常规制备透射电镜样品后,用日立H-600透射电镜观察并摄片。结果光镜下神经干细胞呈克隆球散在悬浮于培养基中,Nestin免疫荧光阳性;电镜下观察到神经干细胞相互间排列比较松散、核浆比例高,细胞间胞膜增厚,形成特化的结构,有的胞膜上可见胞吞/胞吐小泡。结论体外培养的新生大鼠海马神经干细胞间的细胞连接有间隙连接样结构,并可出现胞吞/胞吐功能,提示细胞间可进行相互交流,传递化学递质或电兴奋活动。
- 董富兴胡莹莹刘亚萍于红丽赵玉段现花董红燕徐铁军
- 关键词：海马神经干细胞细胞连接超微结构
- 新生小鼠海马神经干细胞体外培养条件下的增殖与分化被引量：4
- 2013年
- 背景:神经干细胞移植可用于中枢神经损伤的临床治疗。目的:观察新生小鼠海马神经干细胞在体外培养条件下的增殖和分化。方法:从新生昆明小鼠海马取材,采用机械分离法对原代细胞进行无血清培养,采用机械法复合酶消化法对原代细胞进行传代,以体积分数为10%胎牛血清诱导分化。免疫荧光行巢蛋白、β-微管蛋白Ⅲ和胶质纤维酸性蛋白染色,对培养的细胞进行鉴定。CCK-8法检测神经干细胞增殖能力。结果与结论:从新生小鼠海马分离得到的细胞具有连续传代形成克隆球的能力,克隆球呈巢蛋白免疫反应阳性;加入胎牛血清可诱导分化为β-微管蛋白Ⅲ和胶质纤维酸性蛋白阳性细胞。提示实验成功建立了体外培养新生小鼠海马组织分离和培养神经干细胞的方法,培养的神经干细胞在体外培养条件下保持着自我增殖和分化的潜能。
- 胡莹莹段现花陈梅王德广
- 关键词：干细胞神经干细胞细胞球
- 原代和传代大鼠海马神经球凋亡的激光共聚焦显微镜观察
- 以往对神经干细胞(NSCS)凋亡的研究是通过流式细胞仪间接检测早期凋亡的细胞。由于神经球中细胞的突起互相缠绕,通过胰酶消化和(或)机械吹打的有损伤的方法很难把神经球吹打成单细胞悬液,并且会出现大量NSCs损伤的现象,影响...
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- 大鼠羊膜上皮细胞的生物学特性
- 2013年
- 目的探讨建立大鼠羊膜上皮细胞分离、培养及鉴定方法及观察其生物学特性。方法从妊娠14～16 d的SD大鼠胎盘剥离羊膜,用胰蛋白酶消化法分离大鼠羊膜上皮细胞,采用免疫荧光细胞化学和流式细胞仪分析细胞表型特征;使用含有10%胎牛血清(FBS)和100 U/ml青霉素-链霉素(PS)溶液的DMEM/F-12的培养基进行细胞培养。结果每次采用胰蛋白酶消化法从1只孕鼠分离的上皮细胞数为(1～6)×105/ml,足够达到贴壁培养浓度。所分离的羊膜上皮细胞表达神经前体细胞特异性蛋白nestin和骨髓间充质干细胞表面标记蛋白CD29和CD44,但是未成熟神经元标记蛋白β-Ⅲ-tublin、星形胶质细胞标记物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)以及造血干细胞表面标记蛋白CD34表达阴性。在完全培养基培养条件下,羊膜上皮细胞生长增殖较快,原代培养1 w后即可传代。结论建立了大鼠羊膜上皮细胞分离、培养及鉴定的方法,大鼠羊膜上皮细胞具有神经前体细胞的特异标志和间充质干细胞的某些表型特征。
- 段现花王德广欧阳长杰曲德伟
