樊沛
- 作品数:6 被引量:68H指数:3
- 供职机构:西安交通大学医学院第二附属医院更多>>
- 发文基金:陕西省科技攻关计划国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 人胚嗅粘膜嗅鞘细胞的分离、培养和纯化被引量:1
- 2008年
- 目的采用经我们改良的差速贴壁法结合神经营养因子3(NT3)和低浓度血清的培养方法对人胚嗅粘膜嗅鞘细胞进行分离和原代纯化培养,探讨建立嗅粘膜嗅鞘细胞体外培养的方法。方法对差速贴壁后的人胚嗅粘膜嗅鞘细胞交替应用含10%胎牛血清和含2.5%胎牛血清、NT3的DMEM-F12培养基进行原代培养。观察嗅粘膜嗅鞘细胞的形态学变化,采用p75NTR和GFAP免疫细胞化学染色进行鉴定和纯度检测。结果人胚嗅粘膜嗅鞘细胞形态多呈双极、三极,伴有细长的突起。p75NTR和GFAP染色均呈阳性反应,体外培养9d时纯度可达83%。结论差速贴壁法结合低浓度血清和NT3应用可以分离培养出人胚嗅粘膜嗅鞘细胞。
- 历强贺西京石建峰王斌朱振中臧全金樊沛
- 关键词:嗅鞘细胞鼻粘膜细胞培养纯化
- 差速贴壁结合神经营养因子3体外纯化培养人胚嗅鞘细胞被引量:12
- 2007年
- 目的:采用差速贴壁结合神经营养因子3的方法对人胚嗅球嗅鞘细胞进行原代纯化培养,探讨简单实用的嗅鞘细胞体外培养方法。方法:将差速贴壁后人胚嗅鞘细胞间隔48h用含100mL/L胎牛血清和含NT3的DF12培养液交替进行体外培养。观察嗅鞘细胞的生长变化,采用形态学和P75免疫细胞化学染色进行细胞及纯度鉴定。结果:体外培养的人胚嗅鞘细胞P75染色呈阳性反应,呈双极、三极细胞,细胞突起细长,并可形成细胞突起网络。在体外培养9d时可以获得95%的嗅鞘细胞,12d时为83%,且细胞状态良好。结论:差速贴壁法结合间断NT3应用是一种简单实用的嗅鞘细胞纯化培养方法。
- 历强贺西京饶国洲董恩霞樊沛王斌朱振中臧全金
- 关键词:嗅鞘细胞细胞培养纯化
- 胸腰椎骨折内固定术后椎弓根螺钉断裂的原因分析及对策被引量:50
- 2007年
- 目的:探讨胸腰椎骨折内固定术后椎弓根螺钉断裂的原因以及预防措施。方法:对2000年6月至2006年9月应用椎弓根螺钉内固定系统治疗的273例资料完整的胸腰椎骨折病例进行回顾性分析,按照骨折类型、植骨融合方式、是否使用横杆以及内固定取出时间对椎弓根螺钉断裂者进行统计学分析。结果:发生椎弓根螺钉断裂22例,椎弓根螺钉断裂平均发生时间为术后19.9个月,大多(19/22)在取内固定物前复查X线片时发现。断钉发生率:爆裂型骨折患者(13/76)显著高于压缩型骨折(6/132)和骨折脱位型患者(3/65)(P<0.01);椎间植骨组(1/25)和后外侧植骨组(7/110)显著低于未植骨组(7/70)(P<0.05);未使用横杆组(8/49)显著高于使用横杆组(14/224)(P<0.05);术后12个月以上取出内固定组(9/97)高于6 ̄12个月取出内固定组(6/169)(P<0.05)。结论:椎弓根螺钉断裂可能与手术方式选择不当、植骨融合不当、未正确使用横连杆、内置物取出过迟有关。严格掌握手术适应证和手术时机、有效植骨融合、合理使用横杆以及及时取出内固定可有效防止椎弓根螺钉断裂发生。
- 历强贺西京王斌彭国栋樊沛臧全金
- 关键词:胸腰椎骨折椎弓根螺钉
- 成年大鼠侧脑室下区星形胶质细胞的分离培养及纯化研究被引量:1
- 2008年
- 成年哺乳动物侧脑室下区星形胶质细胞(AST)的神经干细胞特性研究是当前神经科学领域的热点,为了进一步了解AST生物学特性,体外培养是探讨AST细胞学特性的有力手段,而怎样通过体外培养得到高纯度的成年AST是亟待解决的问题。本研究以2.5月的成年大鼠侧脑室下区为实验材料进行AST培养,并对传统的培养方法进行改良。首先在AST培养基中增加B27添加剂,结合成年AST体外生长特性,采用低浓度血清(2.5%~5%)和血清浓度调整法对培养的AST进行纯化。然后采用GFAP免疫细胞化学染色方法对培养至14d的细胞进行鉴定及纯度检测,采用流式细胞仪检测B27添加剂对AST细胞周期的影响。结果显示:B27添加剂能有效促进体外培养的成年AST的生长和增殖,采用此方法培养的成年AST纯度达90%以上;B27添加剂与低浓度血清的组合以及根据细胞特性及时调整血清浓度是一种有效的纯化成年AST方法。本方法的建立可望为AST的神经干细胞特性研究提供理想的细胞模型。
- 朱振中贺西京杨浩历强樊沛臧全金杨平林江枫
- 关键词:细胞培养星形胶质细胞神经干细胞