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柯晓煜: 作品数：13 被引量：22H指数：3; 供职机构：华中科技大学同济医学院附属同济医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金浙江省医学会临床科研基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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湖北地区119例 HCV 1b 型 NS3丝氨酸蛋白酶区的序列变异研究: 2015年; 目的：分析丙型肝炎病毒（hepatitis C virus, HCV）1b 型非结构蛋白3（non-structure protein 3, NS3）丝氨酸蛋白酶区序列的变异规律及影响意义。方法使用基因型别特异性引物,通过巢式 PCR 的方法扩增119例慢性 HCV 1b 型患者血清中 HCV NS3区。对 PCR 产物进行测序后获得 NS3区核苷酸及氨基酸序列。分析119例 HCV 1b 型 NS3区序列的同源性及种系进化,分析 NS3丝氨酸蛋白酶区的变异情况及重要功能位点的突变情况。结果湖北地区 HCV 1b 型与 HCV 1b 型标准株及亚洲地区序列同源性较高,核苷酸序列同源性为85.94％及87.68％,氨基酸序列同源性可达96.83％及92.39％,而与欧美地区1b 型同源性较低,核苷酸序列同源性均为85.57％,氨基酸序列同源性分别为92.17％及93.38％。进化树分析提示湖北地区序列与中国其他地区序列亲缘性较接近,而与日本、东南亚地区及欧美地区的1b 型亲缘性较远。 NS3丝氨酸蛋白酶区185个氨基酸内有34个位点有氨基酸突变,但其重要的功能区包括催化酶底物特异性结合位点以及 Zn2﹢结合位点在所有序列中均高度保守,无一例发生突变。结论对湖北地区 HCV 1b型 NS3丝氨酸蛋白酶区的变异规律及生物学意义的研究进一步丰富和完善了对 HCV 1b 型基因组变异情况的认识。为了解 HCV1b 型在中国地区的进化过程提供一定理论基础。; 夏幼辰潘雯柯晓煜王华卢银平郑昕揭盛华何生松吴郡杨东亮; 关键词：丙型肝炎病毒 NS3

热休克蛋白90抑制剂17-AAG对乙型肝炎病毒复制的抑制作用被引量：1: 2012年; 目的探讨热休克蛋白90(HSP90)是否参与肝细胞转化生长因子(TGF)β信号通路的活化,以及HSP90对乙型肝炎病毒(HBV)复制的影响。方法 HSP90抑制剂17-AAG作用HepG2细胞,提取细胞总RNA,实时定量RT-PCR检测TGFβ下游信号分子PAI-1的表达。HepG2细胞用17-AAG预处理2 h,同时用TGFβ或TβR抑制剂SB431542作用后,将HBV复制型质粒HBV1.3转染细胞,第4 d提取HBV核心颗粒,Southern Blot检测HBV复制中间体,ELISA检测上清HBsAg的表达。结果 17-AAG能够下调HepG2细胞PAI-1的表达,HepG2细胞内HBV复制中间体表达水平明显降低,HBsAg的表达亦受到抑制,但上调或阻断TGFβ信号通路对HBV复制影响不明显。结论 HSP90参与肝细胞内TGFβ信号通路的活化,其抑制剂17-AAG能够抑制HBV的复制与蛋白表达,但该抑制作用与TGFβ信号通路活化无关。; 柯晓煜王秋景余源刘慎沛张春燕陈妍杨燕杨东亮; 关键词：转化生长因子Β

那可丁对人胰腺癌BxPC3细胞中HIF-1α及其靶基因VEGF表达的影响被引量：1: 2010年; 缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）是一种在哺乳动物组织中广泛存在的转录因子,它可诱导VEGF转录活性的增强和表达增加,在肿瘤细胞的能量代谢、血管生成、促进肿瘤增殖和转移中起重要作用.因此,抑制HIF-1α可能作为恶性肿瘤治疗的一个靶点.那可丁（noscapine）是一种阿片类生物碱.最新研究发现,那可丁能阻断HIF-1α的表达.此外,它还有抗血管形成的作用.本实验观察不同浓度的那可丁在氯化钴（CoCl2）诱导缺氧的状态下对人胰腺癌细胞株BxPC3细胞中HIF-1α、VEGF基因表达的影响,探讨那可丁作为新的化疗药物治疗胰腺癌的可行性.; 张翠芳赵秋柯晓煜廖宇圣; 关键词：人胰腺癌细胞株 HIF-1Α VEGF表达靶基因 VEGF基因表达

P-mTOR、HIF-1α、P-GP在胰腺癌中的表达及其临床病理意义: 2008年; 目的研究P-mTOR、HIF-α、P-GP三种蛋白在胰腺癌组织中的表达并探讨其临床病理学意义及三者之间的相关性。方法采用免疫组织化学SP法检测43例胰腺癌组织、9例慢性胰腺炎组织和8例正常胰腺组织中P-mTOR、HIF-1α及P-GP3种蛋白的表达。结果P-mTOR的阳性表达主要位于肿瘤细胞胞质,HIF-1α的阳性表达主要位于细胞核或细胞质,P-GP则主要位于细胞膜或细胞质。P-mTOR、HIF-1α、P-GP在胰腺癌组织中的阳性表达率分别为67.44%、69.77%和58.14%,三者在胰腺癌中的表达均明显高于其在正常胰腺组织中和慢性胰腺炎中的表达(分别为P<0.01和P<0.05)。P-mTOR、HIF-1α和P-GP的异常表达均与胰腺癌的淋巴结转移和TNM分期相关(P<0.05),与患者的性别、年龄、部位、分化程度和病理分型无关(P>0.05)。P-GP与P-mTOR、HIF-1α蛋白的表达之间均呈正相关,P-mTOR与HIF-1α蛋白的表达也呈显著正相关。结论胰腺癌组织中存在P-mTOR、HIF-1α和P-GP蛋白表达的上调。在胰腺癌中,P-mTOR可能上调HIF-1α的表达,而P-mTOR、HIF-1α可能通过促使或激活P-GP的过表达而参与胰腺癌的发生发展和侵袭转移。; 柯晓煜赵秋王渝廖宇圣刘志清; 关键词：胰腺癌免疫组织化学 P-MTOR HIF-1Α P-GP

胰腺癌组织存活素和极光B表达的相关性被引量：2: 2010年; 目的探讨凋亡抑制蛋白存活素(survivin)和极光B(AURORA-B)在胰腺癌组织中的表达与生物学行为之间的关系及两者的相关性。方法用免疫组织化学SP法检测45例胰腺癌和8例慢性胰腺炎及7例正常胰腺组织切片的survivin和AURORA-B的表达。结果45例胰腺癌中survivin和AURORA-B蛋白的阳性表达率分别为75.55%和53.33%;两者在7例正常胰腺组织中均未发现阳性表达;两者在8例慢性胰腺炎组织中的阳性表达率分别为25%和0。survivin的表达与组织学分级有关(P<0.05),而与临床分期和淋巴结转移关系不大(P>0.05),AURORA-B的表达与临床分期和淋巴结转移有关(P<0.05),而与组织学分级关系不大(P>0.05);survivin与AURORA-B的表达密切相关(P<0.05)。两者的表达与患者的性别、年龄、肿瘤的大小及部位均无关。结论survivin和AURORA-B密切相关,可能在胰腺癌的发生、发展过程中起关键作用,可能为胰腺癌的治疗和预防提供了新的靶点。; 谢祚启赵秋柯晓煜范学科刘志清; 关键词：胰腺癌免疫组织化学存活素

血清降钙素原动态检测在脑出血合并感染患者预后评估中的价值被引量：6: 2018年; 目的动态检测脑出血合并感染患者血清降钙素原(PCT)并研究其在预后评估中的价值。方法选择2014年8月-2016年9月ICU收治的脑出血患者120例为研究对象,根据患者是否合并感染分为感染组50例和未感染组70例,比较两组患者入住ICU后第1d、第3d、第5d和第7d血清PCT水平差异,分析感染组患者中死亡和存活患者血清PCT的差异,研究血清PCT在判断脑出血合并感染死亡的特异度和灵敏度。结果感染组脑出血患者入住ICU后第1d、第3d、第5d和第7d血清PCT分别为(3.18±1.04)、(5.72±1.54)、(4.92±1.36)和(2.21±0.95)ng/ml均高于未感染组患者(P<0.001)。感染组脑出血中死亡患者入住ICU后第1d、第3d、第5d和第7d血清PCT分别为(3.40±1.02)、(7.11±1.50)、(6.81±1.25)和(4.01±0.91)ng/ml高于存活脑出血患者(P均<0.05)。血清PCT在判断脑出血合并感染死亡的临界值为6.50ng/ml,特异性为0.620,灵敏度为0.840。结论脑出血合并感染患者血清PCT升高较明显,血清PCT在预测脑出血合并感染死亡中具有重要价值。; 龚燕梅柯晓煜蒋红梅沈祥波谭九根; 关键词：脑出血降钙素原

LY294002增强人胰腺癌PANC-1细胞对吉西他滨的敏感性: 目的：LY294002是一种广泛应用的PI3K 抑制剂，可特异性抑制PI3Kp110 亚单位的催化活性，可能通过抑制Akt的磷酸化水平而逆转其耐药性。本实验通过研究LY294002 联合吉西他滨对体外培养的人胰腺癌PAN...; 柯晓煜; 关键词：胰腺癌吉西他滨耐药性免疫组织化学; 文献传递

TSLC1和DAL-1/4.1B在胰腺癌中的表达及其临床意义被引量：6: 2008年; 目的:探讨TSLC1和DAL-1/4.1B两种蛋白在胰腺癌中的表达和临床病理意义.方法:采用免疫组织化学S-P法检测42例胰腺癌组织、11例胰腺炎组织和9例正常胰腺组织中TSLC1和DAL-1/4.1B两种蛋白的表达.结果:TSLC1、DAL-1/4.1B蛋白在胰腺癌组织中的阳性表达率均明显低于在正常胰腺组织和胰腺炎组织中的表达(30.95%vs77.78%,81.82%;28.57% vs 66.67%,81.82%,P<0.05或0.01).TSLC1和DAL-1/4.1B蛋白的异常表达均与胰腺癌的分化程度、淋巴结转移和TNM分期相关(P<0.05),而与患者的性别、年龄、部位和病理分型无关.在42例胰腺癌中TSLC1与DAL-1/4.1B蛋白表达呈显著正相关(rs=0.489,P<0.01).结论:胰腺癌中存在TSLC1和DAL-1/4.1B基因的失活和蛋白表达下调,二者可能通过TSLC1-DAL-1/4.1B级联反应共同参与胰腺癌的发生、发展和转移.; 刘志清赵秋李德民覃华王渝廖宇圣张翠芳柯晓煜; 关键词：胰腺癌免疫组织化学

丙型肝炎病毒1b型NS3基因扩增方案的改进: 2012年; 目的优化扩增武汉地区HCV1b型患者HCV非结构蛋白3(NS3)的cDNA,并进行测序。方法从患者血清中提取HCVRNA,采用型特异性引物扩增分型法检测HCV患者基因分型。设计3对外侧引物和3对内侧引物,采用套式PCR技术(方案一)分别扩增HCV1b型患者的HCVNS33个区段,然后用3对内侧引物进行测序。为了优化NS3扩增和测序效果和减少操作繁琐,对引物进行改进,设计1对外侧引物和1对内侧引物,采用改进的套式PCR技术(方案二)直接扩增HCV1b型患者的HCVNS3区,然后用3个正向引物和1个逆向引物进行测序。结果改进的套式PCR技术(方案二)与套式PCR技术(方案一)相比,操作较为简单,而且扩增效率增高,扩增效果较好。结论采用改进的套式PCR技术(方案二)扩增和测序HCVNS3区更迅速、有效、实用。; 柯晓煜丁红晖郭燕陈明发林永夏幼辰孙潺杨东亮吴珺; 关键词：HCV NS3 套式PCR

LY294002联合吉西他滨对胰腺癌PANC-1细胞p-Akt和MRP表达的影响被引量：2: 2011年; 目的:研究LY294002联合吉西他滨对体外培养的人胰腺癌PANC-1细胞内p-Akt和MRP表达的作用.方法:半定量RT-PCR和Western blot检测不同浓度的LY294002联合吉西他滨用药后PANC-1细胞内MRP mRNA以及p-Akt和MRP蛋白表达水平的变化.结果:LY294002联合吉西他滨能显著抑制PANC-1细胞内MRP mRNA的表达(1.47±0.03,1.31±0.05,1.02±0.04,0.76±0.06,0.37±0.02,P<0.05),亦显著抑制p-Akt和MRP蛋白的表达,并且这种抑制作用与药物浓度显著相关(p-Akt:0.80±0.02,0.63±0.01,0.52±0.01,0.41±0.02,0.35±0.02,P<0.05;MRP:0.93±0.05,0.87±0.03,0.81±0.03,0.71±0.02,0.40±0.03,P<0.05),在其浓度最大组抑制效应达到最大.结论:LY294002可能通过抑制PI3K/Akt信号途径抑制MRP mRNA和蛋白的表达,逆转肿瘤的耐药.; 柯晓煜王渝谢祚启刘志清赵秋; 关键词：LY294002 吉西他滨 PANC-1细胞 P-AKT

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