杨海麟 作品数:131 被引量:586 H指数:12 供职机构: 江南大学生物工程学院 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家自然科学基金 工业生物技术教育部重点实验室基金 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 生物学 化学工程 环境科学与工程 更多>>
迷迭香抗氧化剂的提取方法研究 被引量:24 2002年 本文介绍了一种两步法从迷迭香植物中提取天然抗氧化剂的方法。先用低沸点有机溶剂进行粗提 ,然后经真空蒸馏去除敏感的色泽和风味物质 ;或用硅胶柱层析分离得到较高纯度的抗氧化剂。将硅胶柱液相色谱层析与真空蒸馏分离得到的抗氧化剂进行抗氧化性能的比较 ,发现后者能获得更高纯度的抗氧化剂。 杨海麟 鲁时瑛 杨胜利 王武关键词:迷迭香 天然抗氧化剂 Burkholderia cepacia中具有解脂作用的胆固醇酯酶的酶学特性 被引量:2 2019年 为了更好地应用于工业领域,系统研究Burkholderia cepacia ZWS15胆固醇酯酶(EC 3.1.1.13 cholesterol esterase,CHE)的酶学特性。通过DEAE离子交换从该菌发酵液中获得一种CHE,并探讨其有机溶剂与表面活性剂耐受性,以及底物水解特性。CHE在pH 5.5~9.0保持稳定,最适反应温度为40℃,在70℃温育2 h仍能保留70%以上的酶活,具有显著耐热性;在50%(体积分数)有机溶剂或5%(体积分数)表面活性剂存在下也具有较高酶活。飞行时间质谱鉴定该酶分子质量为37 kDa,其与胆固醇酯酶(源于洋葱伯尔霍尔德菌,Burkholderia cepacia)及脂肪酶(源于假单胞菌属,Pseudomonas sp.)具有较高匹配度。与商品化酶相比,CHE不仅具有胆固醇酯酶活性(对长链胆固醇酯类底物有明显偏好性),还具有解脂功能(可作用于三酰基甘油酯及对硝基苯酯)。该酶的优良性能可为其在食品、诊断、制浆造纸等领域的工业应用提供参考与借鉴。 孙柳青 吴梦棋 张玲 武迪 辛瑜 杨海麟关键词:BURKHOLDERIA 热稳定性 有机溶剂耐受性 一种啤酒酵母浓度在线检测仪 仪器根据超声波在发酵液中的传播速度与酵母浓度和温度之间的相互关系,实现酵母浓度的在线检测,所用超声波换能器的中心频率为5.6MHz,文中给出了传感器的温度补偿经验算式,为提高测量精度和消除温度等的影响,实际测量时使用了两... 吕霞付 杨海麟 王武 邓明晰关键词:超声波 在线检测 啤酒酵母 文献传递 乳糖诱导E.coli发酵生产FAD为辅基的葡萄糖脱氢酶 2019年 黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)为辅基的葡萄糖脱氢酶(FAD-GDH,EC1.1.5.9),具有辅基结合紧密、催化效率高的优点,可替代目前诊断用葡萄糖氧化酶应用于血糖指标的临床生化检测。本文选取Burkholderia cepacia的葡萄糖脱氢酶基因(gdh)构建表达质粒pTrc99a-gdh,转化E. coli BL21(DE3)。异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导发酵,通过酶活测定及聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,获得可溶性表达的FAD-GDH,分子量约为60000。利用乳糖替代IPTG作为诱导剂,摇瓶水平初步探索诱导条件,酶活达到994U/L。7.5L发酵罐放大培养该菌,采用梯度流加补料策略,分阶段温度控制,并采用不同的乳糖流加速率进行诱导。当采用0.3mL/min的乳糖流加速率时,酶活达22200U/L,菌体量达69.48g/L。经过镍柱层析,最终获得纯酶的比酶活104.5U/mg。为医用诊断原料用酶葡萄糖脱氢酶新酶种的工业化生产提供借鉴。 张玲 宋祖坤 林荣 王男 杨海麟关键词:黄素腺嘌呤二核苷酸 葡萄糖脱氢酶 乳糖诱导 层析分离 三种浸提方法从普通小球藻中提取油脂的比较研究 被引量:11 2013年 分别采用直接浸出、索氏提取和超声波辅助提取三种方法从小球藻(Chlorella vulgaris C9-JN2010)藻粉中提取油脂。选择了三种方法各自的最适提取剂,研究了提取时间对提取率的影响以及提取方法对小球藻油脂肪酸组成的影响。结果表明,三种方法的提取率最高可分别达到84.06%、89.11%和88.66%,所得油脂在脂肪酸组成上无明显差别。超声波辅助提取法的提取效率最高、具有工业放大的前景。小球藻油中亚麻酸、亚油酸等多不饱和脂肪酸含量较高,可作为功能性油脂进行开发。 张梦 程露萍 李昌灵 李宇佶 杨海麟关键词:普通小球藻 提取率 脂肪酸组成 微板核酸杂交检测芽孢杆菌属的方法建立 2015年 以白酒发酵过程中的优势菌枯草芽孢杆菌为模式菌株,针对具有高保守性及特异性的16SrRNA设计一组核酸探针,建立了对芽孢杆菌属进行定性和定量分析的新型的微板核酸杂交检测方法,优化了关键检测条件。结果表明,当S1酶反应温度为42℃时,芽孢杆菌属检测探针能分开目标序列仅差一个碱基的近缘属。当捕获探针和信号探针工作浓度均为5nmol/L,与分析探针杂交温度都为50℃,杂交时间分别为60min和15min时,检测信号的强弱与细菌数呈良好的线性关系,能实现定量检测,灵敏度高达1.33×102cells/mL。本方法提供了一个快速定性定量的检测技术,具有很好的应用于白酒发酵过程中芽孢杆菌属实时监测的潜力。 刘婷 冯守帅 辛瑜 王武 杨海麟关键词:芽孢杆菌属 RNA 产黄嘌呤氧化酶节杆菌X7产酶条件优化 被引量:4 2007年 对节杆菌X7产黄嘌呤氧化酶条件进行了研究.结果表明,最佳产酶条件为:葡萄糖15g/L,酵母膏4 g/L,黄嘌呤14 mmol/L,KCl 10 g/L,发酵时间26 h,产酶活力提高至315.84U/g,每L发酵液总酶活为638 U. 夏小花 杨海麟 王武关键词:黄嘌呤氧化酶 产酶条件 耐盐硫氧化菌的筛选、鉴定及脱硫性能研究 被引量:9 2015年 【目的】从典型自然环境中筛选耐盐高效硫氧化菌,研究其生长特性,并进行初步脱硫实验。【方法】以硫代硫酸钠为唯一能源底物的培养基富集脱硫菌,经过3次平板划线培养、纯种分离后得到纯种培养。经过革兰氏染色、平板菌落形态观察及形态学特征研究,并结合16S r RNA基因序列分析及分子系统发育树的构建结果,确定菌株的种类。【结果】从上海外高桥某发电厂冷却水池中筛选分离出一株硫代硫酸盐去除率高、耐盐性较强的细菌,命名为CYJN-1。该菌为革兰氏阴性菌,短杆状,鉴定为那不勒斯菌(Halothiobacillus neapolitanus)。H.neapolitanus CYJN-1具有较强适应盐度变化的能力,菌株生长的盐度范围为0-5%(Na CI,质量体积比)。菌株最适生长条件为:温度30°C、p H 7.0、底物浓度为20 g/L。在此条件下,该菌对硫代硫酸钠的去除率可达98%。【结论】H.neapolitanus CYJN-1耐盐性较强,硫代硫酸盐去除率高,在生物脱硫、生物冶金等领域都具有潜在的应用前景。 陈金才 冯守帅 高凯 计云鹤 罗斌 杨海麟关键词:生物脱硫 基于生物条形码探针和金纳米颗粒的大肠杆菌O157:H7检测 被引量:5 2011年 建立一种基于生物条形码探针和金纳米颗粒(gold nanoparticles,AuNPs)对致病性大肠杆菌O157:H7检测的新方法。用生物功能化的磁性纳米颗粒(magnetic nanoparticles,MNPs)和AuNPs与目标物大肠杆菌O157:H7进行免疫反应,形成MNPs/目标物/AuNPs"三明治"式复合体。利用去杂交将AuNPs上标记的条形码DNA释放出来,通过DNA探针杂交条形码DNA引起AuNPs颜色变化来确定大肠杆菌O157:H7的存在,这种颜色变化很容易用裸眼观察到并且可以通过紫外-可见吸收光谱定量分析,该方法在纯样品和牛奶中最低检测限为102CFU/mL,检测范围为102~106CFU/mL。应用基于生物条形码探针和AuNPs对大肠杆菌O157:H7检测具有准确、快速、操作简单的优点,为食品安全监测提供了新的方法。 蒲小平 杨海麟 周楠迪关键词:磁性纳米颗粒 金纳米颗粒 紫外-可见分光光度法 大肠杆菌O157:H7 亚铁离子和吲哚丁酸促进裂殖壶菌产DHA及发酵验证 2019年 为提高裂殖壶菌产DHA的生产强度,筛选比较出对裂殖壶菌生长和产油有显著影响的促进因子,发现Fe^2+对Schizochytruim sp.AB-610生长有显著的促进作用,吲哚丁酸(IBA)对裂殖壶菌生长和产油有双重促进作用。在此基础上进行了两因素(Fe^2+和IBA)、三水平响应面实验,通过响应模型得到最优添加方案。在摇瓶发酵中得到验证后,继而在NBS 7.5 L发酵罐内测定对照组Schizochytruim sp.AB-610的发酵特性曲线,依据其发酵规律,将发酵周期分为菌体适应期、快速生长期、油脂快速积累期、油脂返耗期。测定了Fe^2+和IBA对7.5 L发酵罐中裂殖壶菌培养和发酵的特征曲线,并与对照组进行多参数比对,发现添加双促进因子可加大快速生长期的细胞生长速率,延长生物量增长的时间,生物量和DHA产量皆得到提高。最终使Schizochytruim sp.的DHA生产强度提高了51.22%。 李亚妃 赵犇 Martha Daniel Mbifile 杨海麟 王武关键词:发酵 亚铁离子 吲哚丁酸