杜波
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
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- 激光共聚焦显微镜在新生大鼠耳蜗组织染色中的应用
- 2008年
- 本文目的是探讨耳蜗组织免疫荧光染色及激光共聚焦显微镜技术的应用。分离新生大鼠耳蜗,培养于胶原支持物上,采用0.25mM的顺铂作用24h,NF-200免疫荧光染色,激光共聚焦显微镜下观察顺铂对耳蜗毛细胞和神经元的毒性作用。结果显示,顺铂对培养的耳蜗毛细胞的损伤没有频率特异性,毛细胞缺失可出现在整个基底膜;谷氨酸盐受体抑制剂-CNQX与顺铂同时作用耳蜗基底膜的神经元损伤程度与单纯顺铂组没有明显差别。结论表明,顺铂能够导致耳蜗毛细胞丢失和形态改变。对耳蜗神经元的损伤可能是顺铂对神经元的直接毒性。
- 孟召祥王苹李庆智王心蕊杜波
- 关键词：耳蜗激光共聚焦显微镜免疫荧光染色
- 小胶质细胞活化刺激骨髓间充质干细胞释放胶质细胞源性神经营养因子保护多巴胺能神经元的实验被引量：5
- 2010年
- 背景:目前尚未见骨髓间充质干细胞对活化的小胶质细胞特异性反应的报道,且有关骨髓间充质干细胞在特定微环境下如何维持多巴胺能神经元的存活也缺乏相应的实验证据。目的:观察骨髓间充质干细胞在活化的小胶质细胞刺激下保护多巴胺能神经元存活的作用。方法:取Wistar大鼠,贴壁法分离培养骨髓间充质干细胞,体外培养并活化小胶质细胞,酶消化法培养中脑多巴胺能神经元。实验分为5组:骨髓间充质干细胞组;小胶质细胞组;脂多糖+小胶质细胞组;骨髓间充质干细胞+脂多糖+小胶质细胞组;分别取各实验组的培养上清,对中脑多巴胺神经元进行培养。单纯多巴胺能神经元组采用体积分数为10%胎牛血清+DMEM/F12进行培养。采用免疫荧光技术检测不同微环境对多巴胺能神经元存活的影响及不同微环境对骨髓间充质干细胞释放胶质细胞源性神经营养因子的影响。结果与结论:含有骨髓间充质干细胞的实验组胶质细胞源性神经营养因子的释放量均较相应的对照组高。酪氨酸羟化酶免疫荧光染色结果发现,单纯多巴胺能神经元组神经元的存活率为15%;小胶质细胞组多巴胺能神经元的存活率为10%;骨髓间充质干细胞组多巴胺能神经元的存活率为35%;脂多糖+小胶质细胞组多巴胺能神经元的存活率为5%;而骨髓间充质干细胞+脂多糖+小胶质细胞组多巴胺能神经元的存活率达到了28%,高于除骨髓间充质干细胞组外的其他各组(P<0.05)。此外体外培养多巴胺能神经元存活率随培养时间延长下降,但含有骨髓间充质干细胞实验组的多巴胺能神经元存活率明显高于相应对照组。提示小胶质细胞活化刺激骨髓间充质干细胞上调胶质细胞源性神经营养因子表达,使得多巴胺能神经元免受毒素的损害,抑制了多巴胺能神经元的延迟性死亡。
- 范东艳王苹刘然牛凤兰杜波
- 关键词：多巴胺能神经元骨髓间充质干细胞胶质细胞源性神经营养因子小胶质细胞帕金森病
