李雪莲
- 作品数：14 被引量：43H指数：4
- 供职机构：郑州大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 超氧化物歧化酶在现代寄生虫学中的研究进展被引量：2
- 2005年
- 李雪莲史兆兴武峰
- 关键词：超氧化物歧化酶寄生虫学免疫介质
- 环介导等温扩增(LAMP)技术检测旋毛虫DNA的研究
- 旋毛虫病(Trichinellosis)是一种较为严重的人兽共患寄生虫病，主要因宿主生食或半生食了含有旋毛虫幼虫囊包的肉类引起。该病地理分布广泛，在过去的两个世纪里，全球许多地区有旋毛虫病暴发流行的报道，被称为再度肆虐的...
- 李雪莲
- 关键词：旋毛虫病环介导等温扩增流行病学调查动物模型
- 志贺菌属逃避宿主固有免疫系统的机制研究进展
- 2013年
- 肠黏膜上有多重先天免疫防御系统,当发生细菌感染时,可以向免疫系统传递信号,抵御细菌的入侵,而且使被破坏或衰老的上皮细胞再生;然而肠黏膜致病菌具有的多重致病机制可以适应宿主的炎性反应和免疫反应,能使宿主细胞死亡并操控宿主细胞存留的信号通路。这些特性使致病菌能够适应肠黏膜环境,破坏细胞功能和免疫功能,从而使致病菌对宿主的感染更易发生。本文综述了宿主对细菌感染的抵抗机制和志贺菌属逃避宿主固有免疫系统的机制。
- 杨展王思淼崔茜刘威王雪松邹大阳李雪莲李环王玉飞黄留玉袁静
- 关键词：志贺菌属宿主免疫系统细菌感染
- 人铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆表达及活性鉴定被引量：4
- 2006年
- 目的获得高表达人铜锌超氧化物歧化酶(hCu/Zn-SOD)的工程菌。方法采用RT-PCR技术从人胃组织总RNA中分离扩增了hCu/Zn-SOD的cDNA序列,将该基因重组到T7启动子控制下的分泌型表达载体pET22b(+)中,构建了表达质粒pETSOD,并转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达。采用SDS-PAGE、蛋白质免疫印迹分析其活性。结果该工程菌可高表达一相对分子质量大约16kD的蛋白,与抗人Cu/Zn-SOD多克隆抗体有特异的免疫反应,表达量可达菌体可溶性蛋白的20%以上,且具有特异性SOD酶活性。结论该菌株分泌表达了有天然酶活性的hCu/Zn-SOD,为大量制备hCu/Zn-SOD和下一步研究工作奠定了基础。
- 李雪莲武峰史兆兴
- 关键词：铜锌超氧化物歧化酶分泌表达大肠杆菌
- 双歧杆菌中胆盐水解酶的研究进展被引量：3
- 2012年
- 胆盐水解酶的特性及生理功能已成为研究热点。我们探讨了国内外关于双歧杆菌中胆盐水解酶的生化特性、降胆固醇机理及其生理作用几个方面的研究进展,以期对研究双歧杆菌胆盐水解酶,以及双歧杆菌及其制品的开发利用有一定的指导意义。
- 李云梅郭晶李雪莲魏晓袁静杜双奎
- 关键词：双歧杆菌胆盐胆盐水解酶
- 登革病毒组织培养技术被引量：6
- 2002年
- 目的 :探讨对登革病毒敏感性不同的几株蚊子细胞和哺乳动物细胞的体外培养技术。方法 :对白纹伊蚊C6/3 6细胞、伪盾伊蚊Ap 61细胞和三株哺乳动物细胞LLC MK2 细胞、Vero细胞、BHK 2 1/3 1细胞进行体外培养 ,把登革病毒转染到上述细胞中 ,经传代培养后 ,在显微镜下观察。结果 :通过观察结果及时改进各细胞株的培养基的配制、消化方法和传代比例 ,各细胞株均能生长良好、单层致密、无污染 ,登革病毒转染实验呈阳性结果。结论 :实验结果证明白纹伊蚊C6/3 6细胞、Ap 61细胞、LLC MK2 细胞、Vero细胞、BHK 2 1/3 1细胞均为登革病毒敏感细胞 ,其中白纹伊蚊C6/3 6细胞敏感性较高 ,随着新的克隆细胞株的体外培养技术的成熟 ,组织培养已成为登革病毒分离。
- 李雪莲武峰王莹
- 关键词：登革病毒组织培养技术C6/36细胞VERO细胞
- 基于颜色判定的环介导恒温扩增法快速检测副溶血性弧菌被引量：5
- 2011年
- 利用DNA环介导恒温核酸扩增法(LAMP)针对副溶血性弧菌特异基因tlh基因设计4条引物,通过引物特异性识别tlh基因上的6个独立区域来快速检测副溶血性弧菌.LAMP反应的过程中会产生白色沉淀焦磷酸镁,故可以通过监测浊度来判定反应结果.实时浊度仪监测反应结果表明,LAMP反应在60～65℃恒温条件下50min内完成;如果在反应前添加羟基萘酚兰(HNB),蓝色的阳性结果很明显区别于紫色阴性结果;LAMP方法的最低检出限为9.74pg/μL,PCR方法最低检出限为97.4pg/μL,LAMP方法检测灵敏度是PCR方法检测灵敏度的10倍,且具有良好的特异性.LAMP方法用于快速检测副溶血性弧菌具有检测过程简单、实验装置简便、反应结果肉眼可辨别、灵敏度高和特异性强的特点,所以LAMP方法检测副溶血性弧菌特别适合用于现场和基层检疫及医疗单位的快速诊断.
- 刘威邹大阳尹志涛刘大伟李雪莲魏晓王雪松姜铮袁静黄留玉
- 关键词：副溶血性弧菌
- 人铜锌超氧化物歧化酶真核表达载体的构建及在酿酒酵母中的分泌表达被引量：6
- 2007年
- 目的:探讨酿酒酵母中人铜锌超氧化物歧化酶(hCu/Zn-SOD)的分泌表达。方法:采用RT-PCR技术从人胃总RNA中分离扩增hCu/Zn-SOD的cDNA,与酿酒酵母交配因子(MF)α信号肽编码序列融合,将融合基因插入大肠杆菌-酵母细胞穿梭型质粒pYES2.0,构建真核分泌表达质粒pYES-MS,将其转化入酿酒酵母的缺陷型菌株INVSc1中,用半乳糖进行诱导表达,采用SDS-PAGE、蛋白质免疫印迹分析及电泳谱活性染色测定表达产物分泌情况及其活性。结果:该工程菌可高效表达一相对分子质量约为21000的蛋白并与兔抗人Cu/Zn-SOD多抗有特异的免疫反应,同时在培养基上清中检测到此表达蛋白的分泌,具有特异性SOD酶活性。结论:作者成功构建了pY-ES-MS/INV菌株,该菌株大量表达有天然酶活性的hCu/Zn-SOD,并有部分hCu/Zn-SOD分泌到酵母细胞外,为开发hCu/Zn-SOD的基因工程产品奠定了良好的基础。
- 李雪莲马一君武峰史兆兴王恒梁黄留玉
- 关键词：酿酒酵母分泌表达
- 用环介导等温扩增技术快速检测粪便样本中的沙门菌被引量：7
- 2014年
- 目的：建立快速检测粪便样本中的沙门菌的环介导等温扩增技术（LAMP），并着重在灵敏度和特异性方面对此方法进行评价。方法：利用LAMP针对沙门菌特定基因invA（靶基因）设计的6条特异引物，通过引物特异性识别特定基因invA上的8个独立区域来快速检测沙门菌；LAMP反应过程中会产生白色沉淀焦磷酸镁，故可以通过监测浊度来判定反应结果。结果：实时浊度仪监测反应结果表明，LAMP反应在60～65℃等温条件下50min内完成；如果在反应前添加羟基萘酚兰，蓝色阳性结果很明显区别于紫色阴性结果；LAMP的最低检出限为6．97pg/μL，PCR为69．7pg/μL，LAMP方法的检测灵敏度是PCR的10倍，且具有良好的特异性。结论：LAMP方法用于快速检测沙门菌，具有检测过程简单、实验装置简便、反应结果肉眼可辨、灵敏度高、特异性强的特点，对非沙门菌菌株的结果呈阴性，表明引物设计有很好的特异性。对粪便样本进行检测，发现具有同样的敏感性和特异性。这表明LAMP法是潜在的和有价值的在粪便样本中直接检测沙门菌的方法，具有快速、简便、低成本的特点。LAMP法适用于快速临床诊断。
- 刘威李环邹大阳杨展赵向娜李雪莲崔茜王思淼黄思妺闫夏贝魏晓王雪松尹志涛黄留玉袁静
- 关键词：沙门菌环介导等温扩增技术
- 超氧化物歧化酶在酿酒酵母中的分泌表达
- 背景和目的
超氧化物歧化酶/(SOD/)是一种广泛存在于动物、植物、微生物中的金属酶,按其结合的金属离子可分为Cu//Zn-SOD、Mn-SOD、Fe-SOD三种,它们主要催化超氧化物阴离子自...
- 李雪莲
- 关键词：酿酒酵母分泌表达免疫印迹分析活性染色
- 文献传递
