李艺
- 作品数：11 被引量：46H指数：2
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- 雌二醇人工抗原的合成及间接竞争ELISA标准曲线的建立被引量：2
- 2014年
- 琥珀酸酐法将雌二醇（E2）衍生化,再用碳二亚胺法（EDC）将半抗原与BSA和OVA偶联,制备免疫原和检测抗原,紫外扫描和红外光谱鉴定表明人工抗原合成成功,E2与BSA偶联比为12.3∶1。将E2-BSA免疫BALB/c小鼠,细胞融合技术筛选抗E2杂交瘤细胞株,制备单克隆抗体。结果表明,筛选的3株杂交瘤细胞E2D5、E3F7和E4A6抗体效价均在8×104以上。以E3F7细胞株建立间接竞争ELISA（icELISA）标准曲线,其线性范围为0.06~66.2μg/L,检测限和IC50值分别为0.03和0.76μg/L,除与去氢甲睾酮22.9%的交叉反应率外,与其他化合物无交叉反应。本研究为开发ELISA试剂盒,检测食源性动物产品中E2残留奠定基础。
- 姜金庆李新朋李艺
- 关键词：雌二醇人工抗原单克隆抗体间接竞争ELISA
- 氟喹诺酮类药物多残留酶联免疫检测方法的建立被引量：23
- 2014年
- 【目的】氟喹诺酮类药物(FQs)在畜牧业中广泛用于预防和治疗细菌性疾病,不合理使用导致在动物性食品中残留,严重危害消费者健康,其检测受到世界各国重视。制备抗多种FQs单克隆抗体(m Abs),建立间接竞争ELISA(ic ELISA)检测方法,为动物性食品中FQs多残留检测奠定基础。【方法】环丙沙星(CPFX)羧基上引入氨基丁酸后为半抗原(CPFX-A),质谱鉴定;分别用碳二亚胺法(DDC)和混合酸干法将半抗原与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联合成免疫原(CPFX-A-BSA)和包被原(CPFX-A-OVA),紫外和红外光谱鉴定是否偶联成功;CPFX-A-BSA免疫Balb/c小鼠,间接ELISA和ic ELISA方法测定多抗血清效价和敏感性,选取抗血清效价高和敏感性好的鼠用于细胞融合;NS0细胞和脾细胞按1﹕5比例在PEG-1500作用下融合,筛选抗FQs杂交瘤细胞株,并进行效价、亚型、敏感性和交叉反应率鉴定;体内诱生腹水法制备m Ab,液体石蜡作为诱导剂,每只鼠注射108个杂交瘤细胞;选敏感性和广谱特异性好的腹水m Ab,建立ic ELISA标准曲线,对ic ELISA检测方法优化,在鸡肉中添加10种FQs进行测定,将测定结果与HPLC法比较,用SPSS 17.0软件进行显著差异性分析。【结果】半抗原改造和人工抗原合成成功;3只鼠血清效价均达到1﹕1.28×104以上,2号鼠血清效价最高(1﹕2.56×104),且IC50值最低(12.92 ng·m L-1),选择2号鼠作为细胞融合用鼠;4次亚克隆筛选并鉴定后获得3株敏感广谱特异的杂交瘤细胞,分别命名为2H5、3D11、4F4,细胞上清效价分别为1﹕1 600、1﹕1 600和1﹕800,腹水效价分别为1﹕1.6×106、1﹕8.2×105和1﹕8.2×105;ic ELISA方法的包被原浓度为1μg·m L-1,5%猪阴性血清4℃包被过夜,单抗1﹕40 000稀释,山羊抗鼠酶标二抗(Ga MIg G-HRP)1﹕8 000稀释;反应温度均为37℃,标准品与单抗同时加入反应15 min,洗板后加二抗反应25 min;显色10 min,2H5细胞株腹水敏感性和广谱特异性
- 李新朋姜金庆钱爱东王自良范国英单晓峰康元环李艺
- 关键词：环丙沙星氟喹诺酮类药物杂交瘤细胞株间接竞争ELISA
- 锌离子胶体金层析快速检测试纸条或试纸卡及制备方法
- 本发明公开一种锌离子胶体金层析快速检测试纸条或试纸卡及制备方法，试纸条结构包括支撑板、样品垫、金标抗体结合垫、包被膜和吸水垫，试纸条两端设有保护膜，所述样品垫、金标抗体结合垫、包被膜、吸水垫依次粘贴于支撑板上；金标抗体结...
- 王自良王爱萍范国英张海棠葛亚明王顺岗李艺丁函
- 文献传递
- 锌离子胶体金层析快速检测试纸条或试纸卡及制备方法
- 本发明公开一种锌离子胶体金层析快速检测试纸条或试纸卡及制备方法，试纸条结构包括支撑板、样品垫、金标抗体结合垫、包被膜和吸水垫，试纸条两端设有保护膜，所述样品垫、金标抗体结合垫、包被膜、吸水垫依次粘贴于支撑板上；金标抗体结...
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- 文献传递
- 动物性食品中氟喹诺酮类药物多残留检测研究进展被引量：19
- 2013年
- 氟喹诺酮类药物是一类人工合成的抗菌药物,在兽医领域应用广泛,但其残留对人畜危害严重。论文对动物性食品中氟喹诺酮类药物多残留检测方法进展做一综述,主要包括微生物法,高效液相色谱法,液相色谱-质谱法,薄层色谱法,毛细管电泳法,ELISA方法,免疫亲和色谱法,免疫传感器法,胶体金免疫层析法,电化学发光法,分析了不同多残留检测方法的优缺点,为生产选择检测方法提供建议,也为进一步研究氟喹诺酮类药物多残留检测提供参考。
- 李新朋姜金庆钱爱东丁菡李艺
- 关键词：氟喹诺酮类药物动物性食品多残留检测
- 一种氯羟吡啶胶体金层析检测试纸条或卡
- 本发明公开了一种氯羟吡啶胶体金层析检测试纸条或卡，包括衬板和在衬板上依次衔接的样品垫、金标结合垫、硝酸纤维素膜、玻璃吸水垫，所述金标结合垫为吸附有胶体金标记的抗氯羟吡啶单克隆抗体或多克隆抗体玻璃纤维棉，在所述硝酸纤维素膜...
- 张海棠范国英王自良姜金庆王淑云杨雪峰丁涵李艺
- 文献传递
- 一种基于直接竞争酶联免疫法检测铅离子试剂盒及其应用
- 本发明提供了一种基于直接竞争酶联免疫法铅离子检测试剂盒，包括：包被有羊抗鼠IgG二抗的检测板，所述检测板真空密封包装；所述羊抗鼠IgG二抗的包被浓度为50～200μg/mL；质量浓度为20～50μg/mL的酶标Pb‑IT...
- 姜金庆刘长忠张慧辉王自良杨雪峰李广领齐永华范国英张海棠李艺
- 重金属钼离子单抗的制备及其免疫学特性研究被引量：1
- 2015年
- 为了检测水质、土壤、食品中的重金属钼离子的残留,故制备用于钼离子检测用的单克隆抗体。采用已合成的钼离子人工抗原Mo6+-ITCBE-BSA免疫Balb/C小鼠,用间接ELISA和间接竞争ELISA法筛选出备用小鼠,用细胞融合技术筛选制作单克隆抗体。结果表明:筛选出4株特异性强、敏感度高的杂交瘤细胞,其中4B3杂交瘤细胞株间接ELISA检测培养上清抗体效价为1∶(3.6×102);体内诱生法制备腹水效价为1∶(5.12×105);杂交瘤核型鉴定结果显示4B3杂交瘤细胞株染色体数目平均为99.4。4B3杂交瘤细胞株用间接竞争ELISA结果显示,IC50值为23.4μg/L,与Cr3+-EDTA的交叉反应率为81.8%,与其他金属螯合物无交叉反应。说明Mo6+-EDTA-mAb可用于Mo6+污染检测的免疫学试验。
- 范国英王自良姜金庆黄华国张海棠丁菡李艺
- 关键词：钼离子单克隆抗体细胞融合技术
- 一种氯羟吡啶胶体金层析检测试纸条或卡
- 本发明公开了一种氯羟吡啶胶体金层析检测试纸条或卡，包括衬板和在衬板上依次衔接的样品垫、金标结合垫、硝酸纤维素膜、玻璃吸水垫，所述金标结合垫为吸附有胶体金标记的抗氯羟吡啶单克隆抗体或多克隆抗体玻璃纤维棉，在所述硝酸纤维素膜...
- 张海棠范国英王自良姜金庆王淑云杨雪峰丁涵李艺
- 文献传递
- 铅离子环境污染中直接竞争酶联免疫检测试剂盒及其应用
- 本发明提供了一种基于直接竞争酶联免疫法铅离子检测试剂盒，包括：包被有羊抗鼠IgG二抗的检测板，所述检测板真空密封包装；所述羊抗鼠IgG二抗的包被浓度为50～200μg/mL；质量浓度为20～50μg/mL的酶标Pb‑IT...
- 姜金庆刘长忠张慧辉王自良杨雪峰李广领齐永华范国英张海棠李艺
- 文献传递
