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封闭CD28-B7和OX40-OX40L共刺激通路诱导异种胰岛移植物耐受的研究被引量：1: 2005年; 抑制T细胞的活化可以有效延长移植物的存活时间.研究表明,在体外混和淋巴细胞反应体系中分别加入CTLA4Ig和OX40Ig蛋白,可以强烈地抑制T细胞的增殖.用链脲佐菌素(200mg/kg)腹腔注射诱导糖尿病小鼠,在进行胰岛移植的?1天,经尾静脉输注5×108pfu AdCTLA4Ig-IRES-OX40Ig,胰岛移植物的存活时间明显延长(100.3±14.94)天,n=6,并对外源性葡萄糖的刺激反应正常,Th1型细胞分泌细胞因子的能力明显受到抑制,表明重组腺病毒AdCTLA4Ig-IRES-OX40Ig在小鼠体内可以高效地表达CTLA4Ig和OX40Ig分子,并且诱导对大鼠胰岛移植物的耐受,提示其在器官移植耐受的诱导中具有潜在的应用价值.; 王光明奉友刚郝洁李爱玲高翔谢蜀生; 关键词：异种胰岛移植 G蛋白尾静脉

小鼠趋化因子CCL19Ig融合蛋白表达载体的构建、表达及鉴定: 2006年; 通过特异引物扩增出去掉终止密码的mCCL19编码序列,经酶切、亚克隆、拼接构建了真核表达载体pcDNA3.1-mCCL19Ig,酶切和测序鉴定插入序列;将重组质粒转染CHO细胞进行体外表达,通过RT-PCR、Western blot鉴定目的基因的表达,利用趋化小室法测趋化活性。结果测序证实重组表达载体含mCCL19编码序列和人IgG1 Fc段序列,其序列分别与GenBank中公布序列比对一致,IgG1 Fc段读码框未发生改变;Western blot结果证实转染了pcDNA3.1-mCCL19Ig的CHO细胞培养上清中有相对分子质量为38 000的融合蛋白mCCL19Ig表达;体外趋化实验表明融合蛋白mCCL19Ig对小鼠脾细胞有趋化活性,且呈剂量依耐关系。; 奉友刚曾甫清王光明李爱玲郝杰李翀袁国红高翔谢蜀生; 关键词：趋化因子 CCL19 重组融合蛋白基因表达趋化活性

抗TCRαβ单抗联合供体骨髓细胞输注诱导小鼠皮肤移植耐受的研究被引量：2: 2004年; 探讨抗TCRαβ单克隆抗体联合大剂量供体骨髓细胞输注方法对同种异基因小鼠皮肤移植耐受诱导的促进作用。第 0天 ,C5 7BL/ 6 (H 2 b,B6 )小鼠尾静脉注入 2× 10 8BALB/c (H 2 d,B/c )来源的骨髓细胞 ,同时腹腔注射抗TCRαβ单克隆抗体5 0 0 μg ;第 6天进行皮肤移植 ;在不同的时间对B6小鼠进行迟发型超敏反应 (DTH )、混合淋巴细胞反应 (MLR )等耐受状态进行检测 ,并进行MLR的IL 2逆转实验、过继转移实验和嵌合状态分析以初步探讨耐受形成机制。结果显示 ,经抗TCRαβ单克隆抗体联合大剂量供体骨髓细胞输注处理的B6小鼠的供体皮肤移植物平均存活 5 0 4d ,显著长于其他各组 (P <0 0 0 1)。相对于正常对照组小鼠 ,耐受B6小鼠在DTH和MLR中均表现出显著的低反应性 (P <0 0 0 1)。IL 2逆转实验结果表明克隆无能参与了移植耐受的形成。体内、外过继转移实验均显示耐受B6小鼠脾细胞中存在抑制细胞活性。嵌合体检查结果表明在耐受B6小鼠的胸腺和脾脏中均形成了混合嵌合体 ,在皮肤移植后第 15、 30和 70天时脾脏内供体来源嵌合体水平依次为 15 86 % ,10 5 7%和 1 77% ,胸腺中依次为 8 19% ,5 72 %和 1 87% ,嵌合体水平随时间而下降。这些表明 ,抗TCRαβ单抗联合大剂量供体骨髓细胞输注可以在异基因成年小?; 马建波刘家望李爱玲王光明郝洁谢蜀生; 关键词：骨髓细胞输注皮肤移植移植耐受

可调控表达IL-2基因骨髓基质细胞促进异基因骨髓移植小鼠免疫功能重建被引量：1: 2003年; 目的　探讨可调控表达IL 2基因的骨髓基质细胞系对异基因骨髓移植小鼠免疫功能重建的促进作用。方法　构建四环素诱导的表达小鼠IL 2基因的逆转录病毒载体 ,转染包装细胞PT6 7,感染骨髓基质细胞系QXMSC1(H 2 d) ,构建可诱导表达IL 2基因的工程化骨髓基质细胞系QXM SC1tet on IL 2。受体小鼠C5 7BL 6 (H 2 b)经γ射线致死剂量照射后 ,输入供体BALB c(H 2 d)骨髓细胞1× 10 7 只 (去除T细胞 ) ,同时输注骨髓基质细胞QXMSC1tet on IL 2 5× 10 5 只。灌服多西环素 (Dox)诱导IL 2表达。于骨髓移植 (BMT)后 30d、6 0d检测小鼠脾细胞对ConA的反应强度 ,空斑形成细胞(PFC)数和迟发型超敏反应 (DTH) ,脾细胞中T辅助细胞前体频数 (HTLp)及移植后小鼠脾脏T细胞亚群CD4 + CD8+ 的比值 ,评价BMT后免疫功能的恢复情况。结果　成功建立四环素诱导IL 2基因表达的基因工程化骨髓基质细胞系QXMSC1tet on IL 2。异基因BMT、联合输注QXMSC1tet on IL 2能显著提高BMT小鼠脾细胞对ConA的反应 ,增加脾脏淋巴细胞HTLp及PFC数目 ,并使DTH反应增强 ,改善小鼠脾脏T细胞亚群CD4 + CD8+ 的比值。结论　共输注可调控表达IL 2基因的骨髓基质细胞可促进异基因移植小鼠免疫功能重建。; 蒋激扬李爱玲刘翠青王光明马建波谢蜀生; 关键词：异基因骨髓移植白细胞介素-2 免疫重建骨髓基质细胞

重组腺病毒AdCTLA4-FasL联合供者骨髓细胞输注促进混合嵌合体形成和小鼠皮肤移植耐受被引量：2: 2005年; 在不对受体去髓处理的情况下,用重组腺病毒AdCTLA4-FasL结合供者骨髓移植诱导混合嵌合体和同种皮肤移植耐受,结果显示,获得了持久宏嵌合体(macrochimerism)(140d时,供体细胞>20%).同时,这种嵌合体促进了稳定的供体特异性耐受,BALB/c小鼠的皮肤移植物在B6受体小鼠中长期存活(平均存活时间(themeansurvivaltime,MST)大于200d),而来源于ICR小鼠的第三者皮肤移植物被该嵌合体小鼠正常排斥.用该方法处理的B6小鼠在接受皮肤移植14d后,辅助性T淋巴细胞前体(HTLp)和细胞毒T淋巴细胞前体(CTLp)的频数降低到很低的水平,表明AdCTLA4-FasL能够迅速促进全面的外周耐受,从而有利于供体骨髓细胞植入.接受皮肤移植140d后,供体皮肤仅在形成长期嵌合体的受体小鼠中继续存活,这些小鼠体内供体特异性的HTLp和CTLp的频数减少,提示长期的皮肤移植物耐受与稳定的混合嵌合体有关,中枢性T细胞删除可能是耐受维持的主要机制.; 奉友刚王光明郝洁李爱玲袁国红李翀曾甫清谢蜀生; 关键词：移植耐受混合嵌合体 CTLA4-FASL 重组腺病毒嵌合体耐受

腺病毒载体介导的CTLA4-Ig基因转移促进异基因小鼠皮肤移植耐受被引量：5: 2004年; 目的　探讨CTLA4 Ig重组腺病毒 (AdCTLA4 Ig)促进“脾细胞 (spleencells ,SP) +环磷酰胺 (cyclophosphamide ,CP)”系统诱导移植耐受的作用及其机制。方法　BALB c(H 2 d)小鼠经尾静脉注射C57BL 6(H 2 b,B6)小鼠脾细胞和AdCTLA4 Ig颗粒 ,48h后腹腔注射环磷酰胺 ,并同天进行皮肤移植 ,于耐受 2 5d时对受体小鼠进行混合淋巴细胞反应 (mixedlymphocytereaction ,MLR)、迟发型超敏反应 (delayedtypehypersensitivity ,DTH)等耐受状态的检查。结果　B6小鼠的皮肤移植物在耐受的BALB c小鼠中存活期特异延长。MLR和DTH检验证明BALB c小鼠对B6小鼠的脾细胞产生特异性耐受 ,对无关第三者ICR小鼠的脾细胞仍表现出强烈免疫应答。结论　AdCTLA4 Ig颗粒可以明显促进“细胞 +环磷酰胺”诱导的异基因皮肤移植耐受 ;; 马建波郝洁王光明李爱玲张庆殷金永柱谢蜀生; 关键词：皮肤移植基因转移

多西环素诱导表达下IL-3基因转染小鼠骨髓基质细胞促进造血被引量：5: 2003年; 本研究探讨用多西环素调控IL 3基因表达的小鼠骨髓基质细胞系对小鼠造血干细胞增殖分化的促进作用。构建含小鼠IL 3基因逆转录病毒载体系统 ,转染小鼠骨髓基质细胞系 ,获得QXMSC1Tet on IL 3;体外加入多西环素诱导IL 3基因表达并检测IL 3表达活性 ;观察细胞培养条件上清液对造血祖细胞集落形成单位的作用及QXMSC1Tet on IL 3与骨髓细胞共培养对造血干细胞增殖分化的影响。结果表明 :多西环素提高了QXMSC1Tet on IL 3细胞系IL 3的表达 ,促进骨髓造血祖细胞克隆形成数 ;与骨髓细胞共培养可促进造血干细胞的增殖分化。结论 :应用多西环素诱导外源基因转染的骨髓基质细胞IL 3的表达。; 蒋激扬李爱玲谢蜀生; 关键词：多西环素 IL-3 骨髓基质细胞基因转染

CTLA4Ig和OX40Ig的表达及其生物学活性研究被引量：3: 2005年; 目的　构建p3.1 /CTLA4Ig- IRES- OX4 0Ig真核表达载体,共同表达CTLA4Ig和OX4 0Ig,通过体外实验初步研究其生物学特性。方法　通过特异引物扩增OX4 0胞外区的cDNA ,经酶切、亚克隆、拼接构建了真核表达载体p3.1/ CTLA4Ig IRES- OX4- 0Ig,并使之在体外进行表达,用RT- PCR、SDS- PAGE和Westernblot鉴定目的基因的表达,ELISA法测定目的基因的表达水平和混合淋巴细胞反应研究其抑制免疫应答的效应。结果　测序证实所扩增的PCR产物是OX4 0胞外区的cDNA ,其序列与GenBank中的相一致;成功构建了p3.1 -CTLA4Ig IRES- OX4 0Ig真核表达载体;RT -PCR、SDS -PAGE和Westernblot结果显示,表达的蛋白为CTLA4Ig和OX4 0Ig ,ELISA结果提示,该两种蛋白均得到了高效表达,混合淋巴细胞反应结果证实转染了p3.1/ CTLA4Ig- IRES- OX4 0Ig的CHO细胞培养上清可以有效地抑制异基因淋巴细胞的刺激作用,其抑制效果强于转染p3.1 /CTLA4Ig和p3.1 /OX4 0Ig的CHO细胞培养上清。结论　成功构建了含CTLA4Ig和OX4 0Ig的真核表达载体,并在体外能够同时得到表达;体外实验证实该两种分子协同作用可以有效抑制免疫应答,并且优于该两种分子单独作用时的抑制效果。; 王光明杨阳李爱玲郝洁高翔谢蜀生; 关键词：CTLA4IG 生物学活性 ELISA法 T细胞器官移植排斥

IL-7基因转染的骨髓基质细胞促进异基因骨髓移植小鼠免疫功能重建的研究: 李爱玲; 关键词：骨髓移植移植物排斥

胃癌高发区人群胃粘膜病变与胃液分析及NPRO合成的相关研究: 李爱玲; 关键词：胃癌高发区胃粘膜病变胃液分析

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