李清艳
- 作品数：27 被引量：32H指数：4
- 供职机构：中国科学院天津工业生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国科学院“百人计划”天津市科技支撑计划重点项目更多>>
- 相关领域：生物学化学工程轻工技术与工程农业科学更多>>
- 一株生产番茄红素的重组菌及其应用
- 本发明公开了一株生产番茄红素的重组菌及其应用。本发明公开的重组菌1，按照包括下述步骤的方法构建：提高重组大肠杆菌中牦牛儿基牦牛儿基二磷酸合成酶的酶活；所述提高重组大肠杆菌中牦牛儿基牦牛儿基二磷酸合成酶的酶活的方法为将所述...
- 张学礼李清艳孙涛徐洪涛唐金磊马延和
- 文献传递
- 一种提高酿酒酵母生物转化生产氢化可的松产量的方法
- 本发明公开了一种提高酿酒酵母生物转化生产氢化可的松产量的方法。本发明提供的重组菌，按照包括如下步骤的方法制备：提高底盘酿酒酵母中SRP14蛋白的活性或其编码基因的表达量，得到重组菌；所述底盘酿酒酵母为表达氢化可的松合成系...
- 张学礼陈晶樊旭倩樊飞宇刘萍萍李清艳
- 虾青素合成菌株构建及其应用
- 本发明公开了虾青素合成菌株构建及其应用。本发明提供了重组菌，按照包括如下步骤的方法制备：使大肠杆菌中表达合成类胡萝卜素相关基因crtY基因、crtZ基因和crtW基因，且调控所述大肠杆菌中分子伴侣基因groES和groE...
- 张学礼李清艳唐金磊龚忠阔秦莹刘茹
- 文献传递
- 代谢工程改造甘油代谢途径提高β-胡萝卜素产量被引量：3
- 2017年
- 甘油是生物柴油的副产物,因其价格低廉和高还原性,成为生物发酵的重要碳源。为了进一步提高工程菌对甘油的利用能力,从而提高萜类化合物的合成能力,本研究从β-胡萝卜素高产菌CAR015出发,对其甘油代谢途径的多个基因进行了调控。首先敲除了编码3-磷酸甘油抑制子的glp R基因,然后分别用M1-37、M1-46和M1-93三个不同强度的人工调控元件对glp FK、glp D和tpi A三组基因进行单基因调控和多基因组合调控。研究发现用M1-46调控glp D基因后β-胡萝卜素产量达到了64.82 mg/L,是CAR015的4.86倍,甘油消耗速率也提高了100%;调控tpi A基因后β-胡萝卜素产量略有提高;调控glp FK基因后β-胡萝卜素产量略有降低。说明Glp D是甘油代谢途径中的关键限速步骤。Q-PCR结果表明,降低甘油代谢途径的glp D和glp FK基因转录水平,增加tpi A基因转录水平,可以增加细胞生长速度、提高β-胡萝卜素产量,可能是因为减少了丙酮醛毒性所致。组合调控glp D和tpi A基因,获得β-胡萝卜素产量最高菌株Gly003,其β-胡萝卜素产量达72.45 mg/L、产率达18.65 mg/g每克干细胞,分别是出发菌株CAR015的5.23倍和1.99倍。总之,Glp D是甘油代谢途径中的关键限速步骤,适当强度调控glp D,可以有效提高重组大肠杆菌的β-胡萝卜素产量。
- 董悦胡坤乐李兴林李清艳张学礼
- 关键词：Β-胡萝卜素萜类化合物大肠杆菌
- 生产β-胡萝卜素的重组微生物及构建方法与应用
- 本发明公开了MEP途径限速步骤发现、解除及其在萜烯类化合物生产中的应用。本发明提供了一种构建重组菌的方法，为提高产β‑胡萝卜素大肠杆菌中(E)‑4‑羟基‑3‑甲基‑2‑丁烯基‑焦磷酸合成酶基因ispG和(E)‑4‑羟基‑...
- 张学礼李清艳唐金磊毕昌昊
- 文献传递
- 一种提高酿酒酵母从头合成孕烯醇酮和黄体酮的菌株与应用
- 本发明公开了一种提高酿酒酵母从头合成孕烯醇酮和黄体酮的菌株与应用。本发明公开的提高酿酒酵母从头合成孕烯醇酮和黄体酮的菌株为敲除生产孕烯醇酮酵母底盘细胞或生产黄体酮酵母底盘细胞中的CCC1基因得到的重组酵母细胞。本发明得到...
- 张学礼樊旭倩樊飞宇许丽萍李清艳刘萍萍刘茹
- 虾青素合成菌株构建及其应用
- 本发明公开了虾青素合成菌株构建及其应用。本发明提供了重组菌，按照包括如下步骤的方法制备：使大肠杆菌中表达合成类胡萝卜素相关基因crtY基因、crtZ基因和crtW基因，且调控所述大肠杆菌中分子伴侣基因groES和groE...
- 张学礼李清艳唐金磊龚忠阔秦莹刘茹
- 文献传递
- 多个调控元件调控萜类合成途径基因表达提高β-胡萝卜素的生产被引量：12
- 2013年
- 强启动子对于获得目标产物最大代谢流量来说并不一定是最优的；相比之下，使用多个具有不同强度的调控元件对基因表达进行调控更有可能获得最优的表达强度。为了对比使用多个调控元件和使用强启动子调控萜类合成途径基因表达对β-胡萝卜素生产的影响，并通过对关键基因的组合调控提高β-胡萝卜素的生产。丈中使用6个强度差异很大的人工调控元件，对萜类合成途径的8个基因进行调控。对于不同的基因，其最适的调控元件强度各不相同。对8个基因的调控使β-胡萝卜素产量提高1．2～3．5倍。和以前报道不一样的是，文中发现用适当强度的调控元件对dxr、ispG和ispH基因进行调控后，也能提高β-胡萝卜素的生产。对dxs和idi基因的组合调控将β-胡萝卜素产量提高了8倍，最终β-胡萝卜素产量达17．59mg／g干重细胞。结果表明使用多个不同强度的调控元件对基因表达进行调控比仅使用强启动子调控更为有效、为提高目标产品合成能力提供了一种新的基因表达调控方案。
- 赵婧刘怡李清艳朱欣娜张学礼
- 关键词：调控元件基因表达调控Β-胡萝卜素大肠杆菌
- 生产β‑胡萝卜素的重组微生物及构建方法与应用
- 本发明公开了MEP途径限速步骤发现、解除及其在萜烯类化合物生产中的应用。本发明提供了一种构建重组菌的方法，为提高产β‑胡萝卜素大肠杆菌中(E)‑4‑羟基‑3‑甲基‑2‑丁烯基‑焦磷酸合成酶基因ispG和(E)‑4‑羟基‑...
- 张学礼李清艳唐金磊毕昌昊
- 代谢工程改造大肠杆菌生产辅酶Q_(10)被引量：1
- 2015年
- 辅酶Q10(CoQ10)是一种脂溶性抗氧化剂,具有提高人体免疫力、延缓衰老和增强人体活力等功能,广泛应用于制药行业和化妆品行业。微生物发酵法能可持续性生产辅酶Q10,具有越来越多的商业价值。本研究首先将来自类球红细菌的十聚异戊二烯焦磷酸合成酶基因(dps)整合到大肠杆菌ATCC 8739染色体上,敲除内源的八聚异戊二烯焦磷酸合成酶基因(ispB),使内源的辅酶Q8合成途径被辅酶Q10合成途径取代,得到稳定生产辅酶Q10的菌株GD-14,其辅酶Q10产量达0.68 mg/L,单位细胞含量达0.54 mg/g DCW。随后用多个固定强度调控元件在染色体上对MEP途径的关键基因dxs和idi基因以及ubiCA基因进行组合调控,将辅酶Q10单位细胞含量提高2.46倍(从0.54到1.87 mg/g)。进一步引入运动发酵单胞菌Zymomonas mobilis的Glf转运蛋白代替自身的磷酸烯醇式丙酮酸:碳水化合物磷酸转移酶系统(PTS),使辅酶Q10产量进一步提高16%。最后,对高产菌株GD-51进行分批补料发酵,辅酶Q10产量达433 mg/L,单位细胞含量达11.7 mg/g DCW。这是目前为止文献报道的大肠杆菌产辅酶Q10最高菌株。
- 戴冠苹苗良田孙涛李清艳肖冬光张学礼
- 关键词：辅酶Q10同源重组基因表达调控大肠杆菌
