李海龙
- 作品数：5 被引量：52H指数：4
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 红景天苷对百草枯所致PC12细胞凋亡的抑制作用及相关机制被引量：16
- 2007年
- 目的探讨红景天苷(salidroside)的神经保护作用及其可能的作用机制。方法采用百草枯(PQ)诱导的具有多巴胺神经元特性的PC12细胞凋亡作为帕金森病的体外模型。实验分对照组、PQ诱导组和红景天苷3个浓度(终浓度10,20和30μmol.L-1)预处理组。用MTT法测定细胞存活率,流式细胞术和Hoechst33258染色法测定细胞凋亡,比色法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3活性,免疫组化法检测细胞色素c(Cytc)的释放和Bcl-2蛋白的表达。结果PQ(800μmol.L-1)作用于PC12细胞24h后,与正常对照组比较,细胞存活率降低,细胞染色质固缩,细胞核呈致密浓染,细胞凋亡百分率升高;红景天苷3个浓度预处理后,细胞存活率增加,细胞核凝聚明显减少,细胞凋亡率降低,且具有量-效关系。另外,PQ可使PC12细胞caspase-3活性增强,Cytc的释放增加,Bcl-2的表达代偿性升高;红景天苷预处理后,PC12细胞增高的caspase-3活性和Cytc的释放明显降低,Bcl-2的表达进一步升高。结论红景天苷对PQ诱导的细胞凋亡具有浓度依赖性的抑制作用,其作用机制可能是促进Bcl-2的表达,抑制Cytc的释放和caspase-3的激活,提示红景天苷可能具有神经保护作用。
- 陈宏陈建宗厚荣荣杨爱莉康小刚张影李源莉李海龙
- 关键词：红景天苷百草枯细胞凋亡PC12细胞
- 银杏叶提取物对百草枯致PC12细胞损伤的保护作用及机制被引量：9
- 2006年
- 目的探讨百草枯(PQ)对PC12细胞的损伤作用,观测银杏叶提取物(EGB761)对该损伤的保护作用并探讨其作用机制.方法MTT比色试验检测细胞活性;乳酸脱氢酶(LDH)测定细胞损伤程度;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡;caspase-3免疫细胞化学染色观察细胞凋亡.结果40mg/L EGB761对300μmol/LPQ作用于PC12细胞24h,具有一定的保护作用;EGB761可明显抑制PQ诱导的PC12细胞LDH的释放(0.25±0.01)(与PQ组比较,P<0.05);EGB761可降低PC12细胞的凋亡百分率,PQ组凋亡百分率为66.7%,使用EGB761保护后凋亡百分率降为17.1%;并可减少PQ诱导的PC12细胞caspase-3过度表达.结论EGB761可减轻PQ诱导的PC12细胞损伤和凋亡,该作用可能与抑制caspase-3蛋白酶的激活有关.
- 康小刚陈建宗王百忍徐震李海龙奚淑芳
- 关键词：银杏叶提取物PC12细胞百草枯神经保护
- 绿茶多酚主要成分对百草枯诱导PC12细胞损伤的保护作用被引量：8
- 2007年
- 探讨绿茶多酚的主要成分表没食子儿茶素没食子酸酯[(-)-epigallocatechin-3-gallate,EGCG]对百草枯(paraquat,PQ)诱导的PC12细胞损伤的影响及可能机制。建立PQ损伤的PC12细胞体外模型,经不同浓度EGCG预处理后,分别用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞活性,Hochest33258染色观察凋亡时细胞核形态的变化,流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡比例,免疫细胞化学染色观察细胞色素c蛋白表达水平。1、5、10μmol/LEGCG对PQ诱导的PC12细胞损伤具有一定的保护作用。与PQ组(54.6±3.5%)相比,1、5、10μmol/LEGCG预处理组细胞活力分别上升为66.5±2.7%、74.4±2.6%、83.7±3.2%。Ho-chest33258染色发现PQ组较多胞核出现固缩凝集(43.5±8.4%),而EGCG预处理组则较少(分别为30.7±7.9%、17.9±6.8%、11.2±4.4%)。FCM检测也提示EGCG预处理可降低细胞的凋亡百分率,正常组、PQ组、EGCG预处理组(1、5、10μmol/L)分别为4%、39.9%、32.6%、20.1%和10.4%。另外,免疫细胞化学染色发现EGCG预处理可下调PQ诱导的细胞色素c在胞浆中的过表达。以上结果提示EGCG可减轻PQ诱导的PC12细胞损伤,其机制可能与下调细胞色素c在胞浆内的过表达有关。
- 厚荣荣陈建宗陈宏康小刚李源丽张颖李海龙
- 关键词：EGCGPC12细胞百草枯
- 人参皂苷Rg1对百草枯所致PC12细胞凋亡保护作用及机制被引量：3
- 2007年
- 目的:探讨人参皂苷Rgl(ginsenoside Rgl)对百草枯(paraquat,PQ)所致PC12细胞凋亡的保护作用及可能机制。方法:实验分正常对照组、PD(PQ,800μmol·L^(-1))模型组和人参皂苷Rgl低、中、高浓度(5,10,20μmol·L^(-1))组,分别用四唑盐比色试验法(MTT)、流式细胞术测定法和Hoechst 33258染色进行细胞活力、凋亡情况检测,罗丹明123(Rh123)染色检测细胞线粒体膜电位(MMP),用比色法检测Caspase-3酶活性,免疫组化检测细胞色素C(cytC)和Bcl-2的免疫活性。结果:PD模型组PC12细胞活力较空白组显著下降[(46．4±3．6)％vs．(97．0±1．6)％,P＜0．01],凋亡率则显著增加(48．9％vs．12．8％,P＜0．01)。人参皂苷Rgl低、中、高浓度组的细胞活力较PD组显著增加[(53．6±3．4)％,(73．2±3．1)％,(82．2±2．6)％vs．(46．4±3．6)％,P＜0．05],凋亡率则显著下降(39．8％,20．1％,12．3％vs．48．9％,P＜0．05),MMP下降受到抑制(P＜0．05),同时Caspase-3活力和cytC的释放均较PD模型组明显降低(P＜0．05),Bcl-2的活性则明显升高(P＜0．05)。结论:人参皂苷Rgl对PQ诱导的细胞凋亡具有一定的保护作用,其作用机制可能是维持线粒体正常功能,促进Bcl-2的表达,抑制cytC的释放,使Caspase-3激活减弱,从而减少细胞凋亡的发生。
- 陈宏陈建宗厚荣荣康小刚李海龙李源莉张颖
- 关键词：人参皂苷RG1百草枯凋亡PC12细胞神经保护
- 天麻素对百草枯和代森锰诱导的小鼠脑黑质多巴胺能神经元损伤的保护作用被引量：18
- 2010年
- 目的:观察天麻素(GAS)对百草枯(PQ)和代森锰(MB)致小鼠黑质多巴胺(DA)能神经元损伤的神经保护作用及其机制。方法:用PQ和MB建立C57BL小鼠PD模型,设立空白组、模型组、GAS低剂量组、GAS中剂量组、GAS高剂量组5组,每组15只,在应用PQ及MB后给予GAS干预,观察小鼠行为学改变,进行TH免疫组织化学染色,并测定黑质区MDA、GSH-Px、GSH、SOD的含量。结果:小鼠注射PQ和MB后出现震颤、竖尾、竖毛、运动迟缓、步态不稳、肢体僵硬等症状。同时黑质致密部(SNc)的TH阳性细胞明显减少;GAS低、中、高剂量组症状较模型组轻,TH阳性细胞数均较模型组明显增加(P<0.05)。GAS低、中、高剂量组MDA含量(分别为6.5 nmol/mg±2.7 nmol/mg、6.2 nmol/mg±2.3 nmol/mg、5.3 nmol/mg±1.6 nmol/mg)与模型组MDA含量为9.7 nmol/mg±3.1 nmol/mg相比明显降低(P<0.05),GAS低、中、高剂量组GSH-Px、GSH、SOD的含量(GSH-Px的含量分别为3.1nU/g±0.3 nU/g、3.5 nU/g±0.5 nU/g、3.9 nU/g±0.4 nU/g;GSH的含量分别为6.1 mg/g±2.1 mg/g、6.5 mg/g±1.9 mg/g、6.8 mg/g±1.7 mg/g;SOD的含量分别为160.3 nU/mg±7.3 nU/mg、164.5 nU/mg±10.2 nU/mg、182.1 nU/mg±9.7 nU/mg)与模型组GSH-Px、GSH、SOD的含量(2.5 nU/g±0.4 nU/g、4.4mg/g±1.5 mg/g、138.5 nU/mg±6.4 nU/mg)相比明显增高(P<0.05)。结论:GAS对PQ和MB诱导的DA能神经元损伤具有一定的保护作用,其机制可能与清除过氧化脂质及自由基,提高机体抗氧化能力有关。
- 李海龙粟艳厚荣荣陈宏陈建宗
- 关键词：天麻素百草枯代森锰神经保护
