李江辉
- 作品数：4 被引量：14H指数：3
- 供职机构：温州医学院健康与环境生态研究所更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金浙江省医药卫生优秀青年科技人才专项科研基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 血脑屏障细胞模型的构建被引量：5
- 2008年
- 目的建立一种稳定的、接近在体内状态的ICR小鼠血脑屏障细胞模型。方法原代分离、纯化培养ICR小鼠脑微血管内皮细胞和星型胶质细胞,经显微镜观察细胞形态,Ⅷ因子和GFAP免疫组化鉴定细胞类型,将此两种细胞共培养构建血脑屏障细胞模型,经4h渗漏试验、HRP通透性试验评价血脑屏障细胞模型功能。结果Ⅷ因子和GFAP免疫组化分析显示原代培养的ICR小鼠脑微血管内皮细胞和星型胶质细胞纯度分别可达90%和95%,细胞共培养模型经4h渗漏试验初步判断血脑屏障细胞模型形成、HRP通透性试验表明血脑屏障细胞模型组同空白组比较具有明显的屏障作用。结论原代分离、纯化出ICR小鼠脑微血管内皮细胞和星型胶质细胞,利用细胞共培养技术构建了血脑屏障细胞模型,其形态、结构及功能均接近在体状态。
- 李江辉潘长旺胡昕谭峰
- 关键词：血脑屏障细胞模型ICR小鼠
- 抗广州管圆线虫Ⅴ期幼虫55ku抗原单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用被引量：1
- 2010年
- 目的制备抗广州管圆线虫Ⅴ期幼虫55 ku抗原单克隆抗体,初步应用于大鼠广州管圆线虫感染检测。方法利用Western blot鉴定能被感染广州管圆线虫Ⅴ期幼虫大鼠血清识别的特异性抗原,经电渗法获得抗原后免疫BALB/c小鼠;取脾细胞,采用常规细胞融合方法建立筛选分泌高滴度、高特异性单克隆抗体杂交瘤细胞株,用ELISA、Western blot对获得的杂交瘤细胞株进行鉴定,用生产的单克隆抗体以抗体夹心ELISA法检测感染广州管圆线虫Ⅴ期幼虫大鼠血清循环抗原水平。结果经Western blot鉴定,得到能被感染广州管圆线虫Ⅴ期幼虫大鼠血清识别的广州管圆线虫Ⅴ期幼虫55 ku抗原;获得2株分泌高滴度抗广州管圆线虫Ⅴ期幼虫55 ku抗原的单克隆抗体杂交瘤细胞株,命名为ACV1和ACV2,其分泌的抗体均为IgG2b亚型,均能识别广州管圆线虫Ⅴ期幼虫55 ku抗原,与日本血吸虫抗原等其他寄生虫抗原无交叉反应。用该单抗以ELISA方法检测感染广州管圆线虫Ⅴ期幼虫大鼠血清循环抗原,阳性率为73.3%(22/30)。结论制备的抗广州管圆线虫Ⅴ期幼虫55 ku抗原杂交瘤细胞株能分泌高滴度、高特异性的单克隆抗体,该单抗可应用于广州管圆线虫Ⅴ期幼虫循环抗原的检测。
- 李江辉马翠霞王寒潘长旺谭峰
- 关键词：单克隆抗体循环抗原
- 广州管圆线虫幼虫致小鼠脑组织细胞凋亡研究被引量：4
- 2008年
- 目的建立广州管圆线虫幼虫实验感染ICR小鼠动物模型,对其脑组织细胞凋亡情况进行检测。方法对小鼠动物模型脑组织切片,HE染色观察凋亡细胞的形态变化,再利用TUNEL法进行组织细胞凋亡水平检测及Western-blot方法检测不同感染时期小鼠脑组织中Caspase3表达水平变化,对广州管圆线虫幼虫致小鼠脑组织细胞凋亡进行综合评价。结果HE染色发现感染鼠脑组织细胞形态变化,经TUNEL法观察到感染鼠大脑、小脑、脑干部分均有不同程度的细胞凋亡,细胞凋亡率分别为20%、50%和70%,且用Western-blot方法分析Caspase3结果显示随着幼虫感染小鼠时间的延长,活性Caspase3表达量增加,即细胞凋亡程度增加。结论证实广州管圆线虫幼虫可诱导小鼠脑组织细胞凋亡,且随感染时间的延长组织凋亡水平亦增加。
- 李江辉谭峰胡昕马雪莲潘长旺
- 关键词：广州管圆线虫幼虫细胞凋亡
- 用激光共聚焦扫描技术研究昆虫触角叶的雌雄异构性被引量：4
- 2010年
- 【目的】本研究探讨用激光共聚焦扫描显微镜对昆虫触角叶内结构的扫描技术。【方法】选取鳞翅目斜纹夜蛾Spodoptera litura,蜚蠊目美洲大蠊Periplaneta americana和鞘翅目松墨天牛Monochamus alternatus,仔细解剖得到昆虫完整脑组织,经过Lucifer yellow染色、戊二醛固定、梯度酒精脱水和透明等一系列处理后,用激光共聚焦扫描显微镜对昆虫触角叶结构进行分层扫描。【结果】结果显示:经该方法处理后在激发光488nm下能清晰扫描出昆虫触角内典型结构神经纤维球,并且可清晰看到这3种昆虫雄性触角叶结构内的扩大型神经纤维球复合体(macroglom erular complex,MGC),而在相应雌性昆虫体内都没有此复合体。另外通过5μm分层扫描得到斜纹夜蛾、美洲大蠊和松墨天牛的触角叶平均厚度分别为130,235和115μm,神经纤维球数量分别为35,59和39个。【结论】激光共聚焦扫描技术是获得昆虫触角叶内部结构的一个可行方法。
- 李江辉陈齐裕陈茜王亚红杜永均
- 关键词：昆虫脑神经元触角叶激光共聚焦
