李欣燕
- 作品数：17 被引量：33H指数：3
- 供职机构：上海交通大学药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划上海市“科技创新行动计划”更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 5-杂氮-2'-脱氧胞苷调控HOXA10对子宫内膜异位症患者在位内膜容受性的影响被引量：8
- 2013年
- 目的:研究甲基化转移酶抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2'deoxycytidine,AZA)对子宫内膜异位症患者在位子宫内膜容受性的影响。方法:体外原代培养内异症子宫内膜上皮细胞,AZA作用24h后,亚硫酸氢盐测序法(BisulfiteSequencing)检测HOXA10的甲基化水平的变化;实时定量PCR和Western Blot方法检测HOXA的转录和蛋白水平的变化。结果:AZA作用24h后,子宫内膜上皮细胞HOXA10的甲基化水平下降;同时HOXA10的表达增加。结论:AZA可通过抑制内异症子宫内膜上皮细胞中HOXA10的高甲基化,上调HOXA10的表达,从而促进子宫内膜容受性的建立。
- 王丽吴煜陆湘王旻孙健高晓红孙莺李欣燕
- 关键词：HOXA10
- 抑制DAAO基因表达的siRNA及其医药用途
- 本发明涉及一种生物技术领域内的抑制D型氨基酸氧化酶基因表达的siRNA及其医药用途；所述siRNA选自SEQIDNO:1～SEQIDNO:10所示的序列；本发明还涉及所述siRNA在制备抑制DAAO基因表达药物中的用途。...
- 王永祥李欣燕陈晓玲
- 文献传递
- 脊髓D-型氨基酸氧化酶通过过氧化氢介导吗啡镇痛耐受
- 目的 研究脊髓星形胶质细胞D-型氨基酸氧化酶(DAAO)/H2O2介导吗啡镇痛耐受的神经生物学作用.方法在全身或脊髓鞘内连续7d注射吗啡建立吗啡耐受动物模型的同时长期给予或单次给予DAAO抑制剂或沉默脊髓DAAO基因si...
- 龚念李欣燕王永祥
- 关键词：吗啡
- 靶向诱导IGF2启动子hP4甲基化对肾癌细胞印迹状态的影响
- 2019年
- 目的研究人肾癌ACHN细胞中胰岛素样生长因子2(IGF2)基因的印迹状态及甲基化诱导药物TCF1001对IGF2启动子hP4区域甲基化状态的影响,并进一步探讨靶向诱导IGF2启动子hP4甲基化对ACHN细胞IGF2印迹状态的影响.方法采用聚合酶链反应-限制性内切酶切片段长度多态性分析(PCR-RFLP)方法鉴定ACHN细胞IGF2基因组杂合状态,并对其印迹状态进行分析,判断IGF2基因是否处于基因印迹丢失(LOI)状态.实验组用甲基化诱导药物TCF1001,对照组用CT010,空白组用PBS处理ACHN细胞,提取基因组DNA后,采用亚硫酸氢盐测序法研究其对ACHN细胞IGF2启动子hP4区域甲基化水平的影响,同时采用PCR-RFLP法研究其对IGF2基因印迹状态的影响.结果人肾癌ACHN细胞IGF2基因处于LOI.TCF1001可有效地靶向诱导IGF2启动子hP4区域发生部分甲基化.IGF2启动子hP4甲基化可逆转IGF2基因的LOI.结论TCF1001可靶向诱导ACHN细胞IGF2基因启动子hP4甲基化,hP4甲基化可逆转人肾癌细胞IGF2基因的LOI,为肾癌的基因治疗提供理论依据.
- 钱苏波李欣燕虞永江邬喻沈海波徐丁齐隽
- 关键词：基因组印迹甲基化
- 热缺血时间对小鼠肾脏缺血再灌注损伤后肾功能的影响被引量：2
- 2021年
- 目的探讨热缺d血t时间对小鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)后肾功能的影响及与肾脏损伤分子1(KIM-1)的关系。方法选取雄性C57BL/6小鼠36只,异氟烷吸入麻醉下阻断双侧肾蒂血管,建立双侧肾脏IRI模型。根据肾缺血时间将小鼠分为四组,即假手术组(Sham组)、阻断28min组(28Min组),30min组(30Min组)和32min组(32Min组)。术后动态监测各组fu清肌酐(Ser)和血尿素氮(BUN)的变化。术后48 h取肾脏组织行Western blot和免疫荧光染色法检测近端肾小管细胞(P'TCs)中KIM-1的表达。术后6周取肾脏组织行苦味酸-天狼星红染色法检测小鼠肾纤维化程度。结果除Sham组外,其余各组小鼠均出现术后Ser及BUN升高,Ser和BUN的达峰时间为24 h,随后缓慢下降,至术后2周达稳定水平。IRI急性期评估提示,除Sham组外,其余各组小鼠术后48 h PTCs表达KIM-1明显上调,且KIM-1的表达量与肾损伤程度及热缺血时间成正比。慢性期评估表明,Sham组和28Min组术后6周无明显肾纤维化,而30Min组和32Min组出现明显肾脏纤维化,且纤维化程度随热缺血时间的延长而加重。术后6周观察期内,Sham组.28Min组和30Min组均无小鼠死亡,而32Min组有50%小鼠死亡。结论小鼠肾脏IRI的损伤程度随热缺血时间的延长而加重。IRI导致的轻微肾损伤是可逆的,急性期后肾功能可逐渐恢复正常。而严重的肾损伤会明显增加小鼠病死率,且会长期影响肾功能。KIM-I可用于监测IRI引起的肾损伤,并评价肾脏损伤的严重程度。
- 陈牧沈海波李欣燕李权钱苏波
- 关键词：再灌注损伤小鼠热缺血
- 大鼠星状细胞激活相关蛋白基因的克隆及其重组腺相关病毒载体的构建被引量：2
- 2005年
- 克隆大鼠星状细胞激活相关蛋白(Stellate Cell Activation-associated Protein,STAP)基因,构建其重组腺相关病毒载体(rAAV-STAP),为进一步研究STAP基因功能提供有效工具。用RT-PCR法从大鼠肝组织中扩增出大鼠STAP基因,将STAP cDNA插入腺相关病毒(AAV)表达质粒pAM/CAG中,构建重组质粒pAM/CAG-STAP。以磷酸钙共转染法将pAM/CAG-STAP及辅助质粒pAd/H22转染293细胞,经293细胞包装后得到复制缺陷型重组腺相关病毒rAAV-STAP。ELISA法测定病毒滴度,Western blot法检测重组病毒感染293细胞后STAP的表达情况。实验结果表明,RT-PCR法从大鼠肝组织中扩增出573bp cDNA,测序证实为大鼠STAP基因。Western blot法证实rAAV-STAP感染293细胞后可在细胞内表达STAP。
- 李欣燕许瑞安王广基马宏谢海棠赵小辰陈淼
- 关键词：腺相关病毒
- 腺相关病毒介导的pdx-1基因表达促进糖尿病大鼠肝脏细胞向胰岛素产生细胞转化的研究(英文)被引量：1
- 2007年
- 目的:胰十二指肠同源盒基因-1(pancreatic duodenal homeobox-1,pdx-1)是胰岛发育和分化过程中重要的转录因子。本实验旨在研究腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)介导的pdx-1基因的表达是否可以诱导糖尿病大鼠肝脏细胞分化成产生胰岛素的细胞,以进一步为糖尿病的细胞替代疗法提供信息。方法:门静脉途径注射AAV-pdx-1或AAV对照载体到大鼠体内。6周后,用RT-PCR和免疫细胞化学法检测肝脏中胰岛素的基因表达及测定大鼠血糖、体重的变化。结果:AAV-pdx-1治疗组明显提高了糖尿病大鼠肝脏中胰岛素的基因表达和胰岛素阳性细胞数,改善了糖尿病大鼠的高血糖状态及增加了体重。结论:AAV-pdx-1可诱导糖尿病大鼠肝脏细胞分化成产生胰岛素的细胞,缓解了糖尿病状态。其分化的机制及分化的肝脏细胞亚群需进一步实验研究,以提高分化效率。
- 李华李欣燕许瑞安
- 关键词：腺相关病毒胰岛素糖尿病高血糖
- 转染外源性白细胞介素6基因增强乳腺癌细胞株MCF-7表达肿瘤相关抗原
- 2004年
- 目的 :探索白细胞介素 6 (interleukin 6 ,IL 6 )增强乳腺癌细胞表达乳腺癌抗原 (CA15 3)和癌胚抗原 (CEA)的作用。方法 :将含IL 6蛋白编码顺序1176bpcDNA插入Pci neo哺乳动物表达载体。将重组载体转染MCF 7乳腺癌细胞 ,采用ELASA方法测定细胞培养上清液内IL 6浓度 ,用MEIA(microp articalenzymeimmunoassay)方法测定上清液中肿瘤相关抗原CA15 3、CEA和CA12 5。结果 :含有外源IL 6基因的MCF 7细胞分泌IL 6浓度 (338.5±2 2 .6pg·10 -6细胞 )明显高于父本没有含外源基因的MCF 7细胞 (2 5 .4± 4 .6pg·10 -6细胞 )和仅含空载体Pci neo的MCF 7细胞 (19.6± 3.0pg·10 -6细胞 ) (P<0 .0 1)。细胞培养d 3后 ,带外源IL 6基因的MCF 7细胞培养上清液中CA15 3和CA12 5水平 (分别为 14 .9± 2 .3和 38.8± 5 .1μg·10 -6细胞 )明显高于父本 (分别为 6 .6± 1.5和 10 .0± 1.6 μg·10 -6细胞 )和空载体Pci neo的MCF 7细胞 (分别为 3.4±0 .7和 14 .6± 2 .2 μg·10 -6细胞 ,P <0 .0 5 )。而转染IL 6基因没有明显改变CEA表达 (P >0 .0 5 )。结论 :IL 6具有诱导肿瘤相关抗原的表达和增强肿瘤细胞的免疫原性的作用 ,提示IL 6可能增强机体对肿瘤的免疫反应性。
- 陈方正江贤鹏陈淼Jonathan FHRobert LE姜希凌李欣燕
- 关键词：白细胞介素6乳腺癌细胞
- HPLC-UV法测定皮肤给药后大鼠血浆5-(4-苯氧丁氧基)补骨脂素浓度被引量：1
- 2010年
- 目的:建立大鼠血浆中5-(4-苯氧丁氧基)补骨脂素[5-(4-phenoxybutoxy)psoralen,PAP-1]高效液相色谱-紫外(HPLC-UV)测定方法,并用于大鼠皮肤给药后血浆PAP-1浓度的测定。方法:以异欧前胡素为内标,血浆样品经乙酸乙酯提取;应用Ultimate Column AQ-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-水(75:25),流速0.8 mL/min,检测波长311 nm;采用PAP-1与内标峰面积比值进行定量。大鼠皮肤给药PAP-1,检测不同时间血药浓度。结果:本方法最低检测限为5.3μg/L(S/N>10),线性范围为5.3～2120μg/L,血浆中PAP-1的日内和日间精密度为2.3%～6.0%,准确度为102%～105%,回收率为83.1%～86.5%。大鼠15 mg/kg皮肤给药后,PAP-1在4 h达峰。雄性和雌性大鼠的AUC分别为256和1209μg.L-1.h,Cmax分别为74和225μg/L。结论:本方法专属性强、简便高效,可用于测定药物代谢动力学实验中PAP-1的浓度。本文首次报道大鼠PAP-1皮肤给药的药物动力学过程,药代参数存在明显的性别差异。
- 郝彬李欣燕周向军王永祥
- 关键词：高效液相色谱-紫外法皮肤给药
- 生长分化因子15对福尔马林诱导双相疼痛的镇痛作用及机制的初步探究被引量：1
- 2022年
- 目的:探讨生长分化因子15(growth differentiation factor 15,GDF-15)对福尔马林诱导的双相疼痛的镇痛作用及其可能机制。方法:首先采用中枢给药鞘内注射GDF-15(50 ng)进行了福尔马林诱导双相疼痛实验,并设置不同剂量组系统性腹腔注射GDF-15(10、30、100μg/kg)进行福尔马林诱导双相疼痛实验,记录比较福尔马林诱导双相疼痛阈值;采用蛋白免疫印迹和组织免疫荧光实验检验GDF-15的特异性受体胶质细胞源性神经营养因子家族α样受体(glial cell-line derived neurotrophic factor receptor alpha-like,GFRAL)的表达情况;并采用实时荧光PCR法检测中枢给予GDF-15(50 ng)对福尔马林小鼠脊髓白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、强啡肽原(prodynorphin,PDYN)以及前脑啡肽(proenkephalin,PENK)的mRNA表达的影响。结果:中枢给予GDF-15对福尔马林Ⅱ相炎性疼痛有显著镇痛作用,而对Ⅰ相急性疼痛未见显著作用(P<0.05);系统性给予GDF-15对福尔马林Ⅱ相炎性疼痛有显著镇痛作用(P<0.05),且呈剂量依赖性;GDF-15的特异性受体GFRAL在大脑、小脑和脊髓中表达,在脊髓背角中仅在神经元细胞表达;中枢给予GDF-15可以降低福尔马林小鼠脊髓中促炎因子IL-6(P<0.05)和TNF-α(P<0.05)的表达。结论:GDF-15对福尔马林诱导的Ⅱ相炎性疼痛存在镇痛作用,且可能是通过降低促炎因子IL-6和TNF-α的表达发挥作用。
- 朱写译黄金路李欣燕
- 关键词：GDF-15急性疼痛炎性疼痛
