李方和
- 作品数：114 被引量：183H指数：7
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 流行性出血热患者对野、家鼠型病毒多肽抗原的抗体应答被引量：1
- 1989年
- 应用兔抗流行性出血热(EHF)病毒血清及EHF病人血清对野、家鼠型EHF病毒多肽抗原进行免疫识别,发现两型病毒多肽抗原间稍有差异。不同流行地区EHF病人血清大多数可与两型病毒49.6ku(50kd)多肽反应,提示该多肽可能是EHF病毒引起机体抗体应答反应的主要抗原成分。并对EHF病人血清中针对两型病毒多肽抗原的抗体检出率与临床病程及病型的关系进行了观察。
- 杨东亮李方和沈汉馨喻植群宋佩辉郝连杰
- 关键词：出血热抗原抗体应答
- 慢性肝病患者血清和肝组织前S蛋白的表达及其相互关系
- 1989年
- 采用本室建立的标记抗生物素-生物素酶联免疫试验及间接酶免疫试验进行血清与肝组织前S蛋白检测。慢性乙肝病毒感染者肝组织前S_1和前S_2的检出率略高于血清标本;血清前S_1和前S_2的相对含量与同一患者肝内前S_1前S_2阳性细胞数有一定正相关关系,但与前S_1、前S_2表达方式及其肝脏病理变化无明显关系。
- 胡克勤李方和喻植群郝连杰
- 关键词：乙型肝炎病毒前S蛋白肝病
- 酶联免疫吸附试验临床检测信号临界区(灰区)患者血清HBsAg携带状况的研究
- 2009年
- 目的探讨乙肝HBsAg酶联免疫吸附试验（ELISA）检测信号灰区与血清免疫逃逸变异HBsAg之间的关系。方法采用市售ELISA对一组临床患者做常规检测,根据检测结果选留ELISA信号处灰区（即P/C 1.2~5.0之间）的实验标本。采用G6-ELISA（本室研制,有极强免疫逃逸变异HBsAg检测能力）与市售（基本不具备免疫逃逸变异HBsAg检测能力）对选留标本进行检测,以差减ELISA确认其免疫逃逸变异HBsAg阳性数量,并采用雅培-化学发光及PCR对检测结果的特异性进行复核。结果自10 231例受检者中筛选HBsAg ELISA信号灰区标本244例。以G6-ELISA与市售ELISA检测结果并做差减分析显示免疫逃逸变异HBsAg阳性率为11.07%（27/244）,亚临界,临界及超临界各组阳性率分别为9.30%（8/86）,10.34%（15/145）及30.77%（4/13）,后者组阳性率显著高于前两组（P〈0.01）。考核结果显示,经ELISA差减分析确认的免疫逃逸变异HBsAg阳性血清雅培-化学发光检测阳性率为94.44%（17/18）,HBV DNA阳性率为33.33%（6/18）,其中两份单项G6-ELISA检测最低阳性信号标本的HBsAg特异性亦为雅培-化学发光检测所证实。结论临床HBsAg检测样本中存在少量A（或P/C）值在ELISA信号灰区的异质化标本;免疫逃逸变异HBV感染是造成这一现象的主要原因之一。
- 张春燕龚劲松刘静华彭静黄永国张小燕李方和
- 关键词：乙型肝炎病毒基因变异乙型肝炎表面抗原酶联免疫吸附试验
- 抗HBV G145R HBsAg多克隆抗体的制备与鉴定
- 2008年
- 目的实验性rG145R变异抗HBs多克隆抗体。方法采用纯化全基因重组G145R变异HBsAg常规皮下免疫制备小鼠多克隆抗体,以间接ELISA、SDS-PAG及Western blot等多种实验对制备物进行鉴定,并初步应用于转染CHO细胞的化学染色。结果制备物在Western blot、ELISA中和试验与抗原替代ELISA中与重组G145R变异HBsAg及重组野生HBsAg等均有很好的特异性与反应性;对此两种抗原的ELISA效价前者显著高于后者(分别为51200与6400);将其用于2A8细胞(转染并分泌G145R HBsAg)爬片的PAP染色,亦取得较理想的实验结果。结论采用重组G145R变异HBsAg免疫成功制备出较高效价的抗体。鉴于该抗体同时与野生重组wHBsAg存在较强交叉反应,其与野生抗HBs的混合应用能增ELISA免疫逃逸变异的检测能力。
- 李佩珊龚劲松李时君张波陈妍项美娟李方和
- 关键词：乙型肝炎病毒基因变异合成肽多克隆抗体
- 实验动物终末处置的新方法——锐性弹切脊髓高位离断术被引量：1
- 2010年
- 急性生命剥夺（宰杀）是一项与动物福利相关且经常发生的重要事件。对实验动物处死的方法必须尽可能做到不给其带来过多痛苦;不干扰或基本不干扰动物临终前的生理状态;不损坏科学实验研究的靶器官（或组织）;不对实验者造成过大的心理冲击。常用方法有脊髓牵拉断裂法、
- 李佩珊张春燕李时君陈妍李方和
- 关键词：实验动物脊髓离断术动物福利生理状态
- 一株具有抗HBc及抗HBs双重反应性的抗HBV单克隆抗体细胞株的选育被引量：1
- 1994年
- 以富含Dane颗粒的HBV抗原作免疫原进行研究，选育出一株分泌具有抗HBc及抗HBs双重反应性McAb的杂交瘤细胞株。该细胞株经5次连续克隆化证实其克隆单一性，常规染色体检查证实为双倍体细胞（染色体89.5±3.6条），在ELISA中能与基因重组HBcAg、血源性富含Dane颗粒之HBV抗原、小圆颗粒HBV抗原及HBsAg阳性血清发生反应。对四者的反应效价大致相同，但对HBcAg的反应强度显著高于其它三者。此外还发现该McAb在改良双抗原夹心ELISA中能与桥连方式同时与HBcAg及HBsAg相结合。
- 李方和杨东亮喻植群王建春汪由坤郝连杰
- 关键词：乙型肝炎病毒单克隆抗体ELISA
- 聚合酶链反应检测HBV DNA的方法探讨
- 1992年
- 建立聚合酶链反应（PCR）检测HBV DNA的方法（PCR-EB），用^32P HBV DNA斑点杂交和免疫印迹试验证实其特异性，并与国外试剂进行了比较。结果表明PCR-EB法特异性强、稳定性好，敏感性与国外报道类似，适合于临床常规检测。
- 袁学文郭林生李方和郝连杰
- 关键词：聚合酶链反应HBVPCR血清标本
- 腹腔镜胆囊切除术与开腹胆囊切除术患者血清白细胞介素-6和C-反应蛋白水平被引量：20
- 1998年
- 为了比较腹腔镜胆囊切除术（ＬＣ）和开腹胆囊切除术（ＯＣ）对组织的损伤程度，选择拟行单纯胆囊切除术的患者４０例，分别行ＬＣ和ＯＣ各２０例，用酶联免疫法测定术前２４小时、术后１２、２４及４８小时血清白细胞介素－６（ＩＬ－６）；用散射比浊法测定术前２４小时、术后１２、２４及４８小时血清Ｃ－反应蛋白（ＣＲＰ）。结果显示：两组患者术前２４小时血清ＩＬ－６和ＣＲＰ水平相近（Ｐ＞０．０５）；术后１２、２４及４８小时ＯＣ组血清ＩＬ－６和ＣＲＰ水平分别高于ＬＣ组（Ｐ＜０．０５）；术后４８小时ＬＣ组血清ＩＬ－６和ＣＲＰ降至术前水平（Ｐ＞０．０５），但ＯＣ组仍高于术前水平（Ｐ＜０．０５）。ＯＣ组平均手术时间、切口长度及术后平均住院日均比ＬＣ组长（Ｐ＜０．０５）。结果表明：ＬＣ组织损伤程度比ＯＣ小，而后者平均手术时间和切口长度较长是血清ＩＬ－６和ＣＲＰ反应水平较高的主要原因。
- 刘宪生钱家勤钱家勤
- 关键词：胆囊切除术开腹白细胞介素6CRP
- 丙型肝炎病毒感染的分子和临床流行病学研究
- 1997年
- 1.在国内较早地建立了巢式多聚酶链式反应(nested—PCR)用于检测HCV RNA,并采用特异性探针和特异性引物两种方法对我国的HCV基因型别、构成特征及其流行病学意义进行了研究、发现我国HCV基因型构成特征是多种基因型共存,但以K1/1b和K2a/2a 型为主,混合型感染亦较多见。急性肝炎、慢活肝、重症肝炎、肝硬化、肝细胞肝癌和肾衰透析者HCV其因型以K1型为主,而慢迁肝者以K2型较多见。提示不同基因型别与疾病的发展和结局有一定关系。
- 郝连杰郭林生张永源杨东亮李方和李淋赵西平唐振亚汪由坤喻植群
- 关键词：基因型别急性肝炎流行病学意义特异性引物
- 戊肝与丙肝病毒在献血员人群中感染状况的对比研究被引量：4
- 1996年
- 采用市售试剂对武汉地区乡村献血员进行血清抗ＨＥＶ与抗ＨＣＶ检测，两者的阳性率分别为５．７４％及９．３５％。在２８８份有ＡＬＴ记录的单采浆献血员中，有近期ＡＬＴ升高史的献浆者抗ＨＥＶ及抗ＨＣＶ检出率分别为１４．０４％及１４．１８％，均显著高于无近期ＡＬＴ升高史的献浆者。对上述标本同时进行多项血清ＨＢＶ标志检测，抗ＨＥＶ阳性及抗ＨＣＶ阳性组献血员多项ＨＢＶ标志检测结果与相应阴性组比较均未见显著的差别。
- 李方和杨东亮赵西平喻植群汪由坤郝连杰
- 关键词：戊型肝炎病毒丙型肝炎病毒输血
