李所
- 作品数：11 被引量：6H指数：2
- 供职机构：吉林农业大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 钙离子水平对猪卵母细胞体外成熟与早期胚胎发育的影响
- 2023年
- 维持细胞内钙离子(Ca^(2+))稳态对维护卵母细胞成熟及植入前胚胎正常发育至关重要。本实验旨在研究Ca^(2+)水平变化对猪卵母细胞体外成熟发育的影响。收集的猪卵丘卵母细胞复合体(COCs),随机分为3组,即对照组、100 nmol/L毒胡萝卜素(TG)组和100 nmol/L TG+300 nmol/L光溜海绵素C(XeC)组,体外培养,分别统计卵丘扩散情况、体外成熟率、胞内Ca^(2+)水平,随后进行孤雌激活(PA)统计各组卵裂率、囊胚率及细胞总数。结果表明:添加XeC可显著改善由TG引起的猪卵丘细胞扩散不完全,卵母细胞体外成熟率、卵裂率和囊胚率降低,以及细胞数减少等现象,并显著降低由TG诱导的胞内Ca^(2+)水平。综上,胞内Ca^(2+)水平对猪卵母细胞体外成熟和早期胚胎发育具有重要的调控作用。
- 张畅余思聪吴昊高乐鹏孙小晴李所
- 关键词：猪卵母细胞体外成熟胚胎发育
- VE对犬卵母细胞体外成熟的影响被引量：2
- 2012年
- 在基础培养液中分别添加浓度为0,50,100,200μmol/L的VE,研究不同浓度VE对成熟情况的影响。结果表明,体外培养48h后VE浓度为50μmol/L组GV期的比率显著高于100和200μmol/L组(P<0.05);100μmol/L组GVBD期的比率显著低于其它组(P<0.05);达到MI-MII期的比率各组之间差异不显著(P>0.05),但100μmol/L组MI-MII期的比率相对较高。体外培养72h后,VE浓度为200μmol/L组的GV期的比率显著高于对照组和100μmol/L组(P<0.05),与50μmol/L组之间差异不显著(P>0.05);达到GVBD和MI-MII期的比率各组之间均差异不显著(P>0.05)。因此,VE对犬卵母细胞的核成熟没有明显促进作用。
- 刘希康锦丹李所金花子尹熙俊
- 关键词：卵母细胞体外成熟
- Demecolcine处理对猪卵母细胞内MPF的影响
- 本实验研究意在检测DEME处理的猪卵母细胞，为理解化学辅助去核方法对MPF含量的影响做出初步的研究。
- 李所王伟康锦丹鲁月尹熙俊
- 关键词：胚胎移植猪卵母细胞体外培养
- DNA甲基化抑制因子5-AzaDc对犬卵母细胞体外培养核成熟的影响被引量：1
- 2017年
- 本实验旨在研究DNA甲基化酶抑制剂5-氮-2-脱氧胞苷(5-Aza Dc)对犬卵母细胞体外成熟的影响。研究比较添加不同浓度5-Aza Dc(1、2μmol/L)处理不同时间(1、2、48、72 h)观察的犬卵母细胞成熟情况,并通过DNA甲基化的免疫荧光染色,观察5-Aza Dc对DNA甲基化在犬卵母细胞中的分布情况及趋势变化。结果表明:添加2μmol/L的5-Aza Dc处理48 h,所有卵母细胞均脱离GV期,并且与对照组相比显著提高进入GVBD-MⅡ期的比率(28.3%vs.87.1%);免疫荧光染色结果显示,成熟卵母细胞的DNA甲基化染色位点主要集中在细胞核内,并未在细胞质中出现,DNA甲基化程度显著降低,并使染色质凝集。综上所述,添加2μmol/L的5-Aza Dc处理48 h可以通过抑制DNA甲基化水平提高犬卵母细胞体外成熟率,短时间的抑制DNA甲基化水平对犬卵母细胞的减数分裂恢复有积极促进作用。
- 李所李啸晨康锦丹朱海瑛郭庆郑鑫尹熙俊
- 关键词：体外成熟5-氮-2-脱氧胞苷
- 丁酸梭菌在不同肠道内微生物环境下对雏鸡空肠发育、肠屏障功能和生长性能的影响
- 2023年
- 本研究旨在探究丁酸梭菌在不同肠道微生物环境下对宿主的影响效果。通过粪菌移植将雏鸡肠道内微生物环境改造为成年鸡肠道内微生物环境,每只雏鸡饲喂0.5 m L菌液。在饲料中添加丁酸梭菌测试其对雏鸡的影响,丁酸梭菌浓度为109CFU/kg。将144只1日龄雏鸡平均分为四组:对照组(CON组)、粪菌移植组(FMT组)、丁酸梭菌组(CB组)和联合处理组(CT组)。CON组饲喂生理盐水和正常雏鸡饲料,FMT组饲喂菌液和正常饲料,CB组饲喂生理盐水和加了丁酸梭菌的饲料,CT组饲喂菌液和添加丁酸梭菌的饲料。结果表明:CB组14日龄雏鸡体重显著高于CON组8.45%(P <0.05),7日龄雏鸡肠道重量极显著低于CON组22.45%(P <0.01),7日龄空肠绒毛高度比隐窝深度(绒腺比)显著高于CON组20.20%(P <0.05),7日龄和14日龄雏鸡空肠claudin-1基因相对表达量显著高于CON组32.10%和50.49%(P <0.05),7日龄雏鸡空肠MUC2基因相对表达量极显著低于CON组56.44%(P <0.01);CT组14日龄雏鸡体重显著高于FMT组7.25%(P <0.05),21日龄雏鸡肠道重量显著高于FMT组10.06%(P <0.05),7日龄雏鸡空肠MUC2基因相对表达量极显著低于FMT组60.82%(P <0.01)。总的来说,添加丁酸梭菌会对生命早期的雏鸡肠道发育造成一定的不良影响,却会促进肠道绒毛的发育,并促进雏鸡肠道连接蛋白claudin-1基因高表达,抑制黏蛋白基因的表达并促进14日龄左右的雏鸡体重增长速率。在成年鸡肠道菌群环境下,丁酸梭菌对生命早期的雏鸡肠道发育没有负面影响,对雏鸡肠道绒毛的发育也没有明显的促进作用,只是促进了雏鸡体重增加,并在雏鸡7日龄左右抑制了肠道黏蛋白的基因表达。
- 崔一博宋阳王禹盟陶冶李所兰海楠吴旻郑鑫
- 关键词：丁酸梭菌雏鸡
- 甘氨酸对猪卵母细胞体外成熟质量及卵丘细胞的影响被引量：2
- 2020年
- 本实验旨在研究甘氨酸对卵丘细胞及卵母细胞体外成熟质量的影响,优化猪卵母细胞体外成熟(IVM)培养体系。在猪卵母细胞体外成熟培养液中添加6 mmol/L甘氨酸,体外培养至44 h后,通过倒置显微镜测量卵丘细胞扩散直径,结合流式细胞术与qPCR检测卵丘细胞凋亡情况;进一步检测成熟卵母细胞中谷胱甘肽(GSH)、细胞成熟促进因子(MPF)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)水平及细胞成熟相关基因表达。结果表明:甘氨酸能显著提高卵丘细胞扩散直径,减少卵丘细胞的总凋亡率,并能显著提高卵丘细胞中Bcl-2的mRNA表达;甘氨酸能显著增加成熟卵母细胞中的GSH、MPF和MAPK水平以及成熟相关基因BMP15、GDF9、CyclinB1、CDK1、C-MOS的mRNA表达。综上可知,甘氨酸可提高猪卵母细胞体外成熟质量,降低卵丘细胞凋亡率。
- 王禹盟齐佳佳余思聪郑鑫李子跃梁爽李所
- 关键词：甘氨酸猪卵母细胞卵丘细胞
- 不同温度对犬卵母细胞体外卵丘扩散及核成熟的影响被引量：2
- 2014年
- 目前犬体外胚胎生产及克隆等技术由于受到卵母细胞体外成熟率低的影响而受到限制,实验旨在探索不同温度对犬卵母细胞体外卵丘扩散及核成熟的影响。从不同时期犬卵巢收集卵丘卵母细胞复合体(COCs),随机分成4组,置于TCM-199(Earle’s salts)+25 mmol/L HEPES+10%(v/v)FBS+10 ng/mL EGF+1 mg/mL L-半胱氨酸+1%青–链霉素成熟培养液中,分别在37.0、38.5、40.0℃条件下培养48 h,测定不同温度培养前后卵丘扩散及核成熟情况。结果表明:不同温度下,培养前后卵丘均显著性扩散(211.40μmvs359.64、377.25、373.23μm),但各处理组间无显著差异,不同温度下对犬卵母细胞核体外成熟率(10.73%、10.025%、14.35%)没有显著差异。说明培养温度只要在犬正常体温变动范围内,则温度对其卵母细胞卵丘扩散及体外培养成熟率均无显著影响。
- 李所康锦丹金君学洪禹朱海瑛金龙郭庆尹熙俊
- 关键词：卵母细胞温度体外成熟
- 体细胞核移植技术生产转单体红色荧光蛋白五指山小型猪
- 本实验首次构建pCX-mRFP1-pgk—neoR基因，生产表达红色荧光蛋白的小型猪，为以后基因敲除的研究提供理想动物模型。
- 鲁月康锦丹梁爽高青山李所朱海瑛王伟尹熙俊
- 关键词：五指山小型猪体细胞核移植红色荧光蛋白基因敲除动物模型
- 体细胞核移植技术生产克隆猪及转基因猪程序的研究
- 体细胞核移植技术已广泛应用于动物农业和医学领域，体细胞克隆包括许多环节，影响克隆效率的包括很多重要因素，如受体卵母细胞的去核，以及重构胚的表观遗传修饰，另外转基因与非转基因细胞作为供体细胞也受到很大的争议。本实验尝试从对...
- 李所
- 关键词：母猪卵母细胞体细胞核移植成熟促进因子
- 文献传递
- 生产转基因五指山小型猪重构胚条件优化
- 2013年
- 利用体细胞核移植技术是得到具有优良特征及抗病性五指山小型猪快速有效方法,因此将外源基因安全高效导入到供核细胞至关重要。利用不同转染试剂、转染方法对转染效率进行研究,确定G418筛选浓度。同时利用体细胞核移植技术生产转单体红色荧光蛋白重构胚。结果表明,使用U-023细胞核电转程序能有效介导质粒pCX-mRFP1转染猪耳成纤维细胞,转染率可达到83.33%。确定G418最佳筛选浓度为200μg.mL-1。利用转基因细胞作为核供体生产重构胚卵裂率是83.08%(221/266),囊胚率是11.65%(31/266)。研究结果为生产表达单体红色荧光蛋白五指山小型猪提供参考,从而为人类疾病发病机理研究以及生产人类疾病模型动物奠定了基础。
- 鲁月康锦丹李所王伟朱海瑛金君学洪禹尹熙俊
- 关键词：五指山小型猪转基因体细胞核移植
