李慧忠
- 作品数：4 被引量：0H指数：0
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- 发文基金：江苏省高校自然科学研究项目江苏省高校科研成果产业化推进项目国家级大学生创新创业训练计划更多>>
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- 嵌合抗原受体G250-CD8-28BBZ的构建及表达
- 2013年
- 目的 构建嵌合抗原受体G250-CD8-28BBZ的慢病毒表达质粒,并研究该嵌合抗原受体在T细胞中的表达.方法 利用常规分子克隆技术将编码Igκ信号肽、抗G250单链抗体及信号结构CD8-28BBZ的编码序列拼接起来,并将得到的融合基因片段插入慢病毒表达载体pLVX-IRES-ZsGreen中,采用酶切及测序鉴定.慢病毒感染T细胞后,通过荧光显微镜、Western blot、流式细胞术检测G250-CD8-28BBZ在T细胞中的表达.结果 双酶切及测序结果显示重组质粒pLVX-G250-CD8-28BBZ构建正确;慢病毒感染后的T细胞能发出绿色荧光;T细胞表达的G250-CD8-28BBZ分子大小正确;慢病毒感染2周后,G250-CD8-28BBZ在T细胞中的阳性表达率为45.2%.结论 成功构建了嵌合抗原受体G250-CD8-28BBZ的慢病毒表达质粒,该嵌合抗原受体能够在T细胞内高效稳定表达.
- 张青李彩红杨洁李慧忠裴冬生郑骏年
- 关键词：肿瘤免疫治疗G250慢病毒
- 荷载管家基因shRNA的双调控溶瘤腺病毒抑制肾癌细胞增殖的研究
- 2012年
- 目的研究荷载管家基因GAPDH shRNA的溶瘤腺病毒（TD-GAPDH）对人。肾癌细胞OSRC增殖抑制的作用。方法病毒TD—GAPDH、TD55、ZD55-EGFP感染OSRC细胞、人肾小管上皮细胞HK-2。Western blot法检测E1A表达；逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）、Western blot法分别检测GAPDH的mRNA、蛋白的表达；原位末端标记法（TUNEL）检测细胞凋亡；MTT法检测细胞增殖；结晶紫染色法检测细胞毒作用。结果TD—GAPDH、TD55、ZD55-EGFP感染的OSRC细胞均表达E1A，HK-2细胞均不表达；抑制OSRC细胞GAPDH表达作用依次为TD—GAPDH〉TD55〉ZD55-EGFP。TD—GAPDH、TD55、ZD55-EGFP感染OSRC细胞的凋亡率（％）依次为（48．0±3．17）、（32．3±6．68）、（23．6±5．43），各组之间差异均有统计学意义（P〈0．05）；用10MOITD—GAPDH、TD55、ZD55-EGFP感染OSRC细胞，4天后存活率（％）依次为：（26．1±2．98）、（47．2±3．10）、（61．2±2．52）、PBS（100），各组间比较差异均有统计学意义（P〈0．05）；病毒对OSRC细胞的毒性作用依次为TD—GAPDH〉TD55〉ZD55-EGFP。结论TD—GAPDH能在肾癌OSRC细胞复制，具有显著的抑制肾癌OSRC细胞GAPDH基因表达、诱导凋亡、杀伤肾癌细胞作用。为溶瘤腺病毒进一步荷载癌基因的shRNA奠定基础。
- 李连涛张宝福李慧忠郑骏年
- 关键词：肾癌溶瘤腺病毒短发夹RNA
- 树突状细胞疫苗抗肿瘤免疫研究进展
- 2015年
- 树突状细胞（ DC）是人体内功能最强大的抗原提呈细胞。目前，已有很多在临床中应用DC疫苗成功治疗肿瘤模型的报道。 DC疫苗在预防及治疗肿瘤两方面展现出保护性免疫和治疗性免疫能力。本文就DC的生物学特征、DC疫苗的研究现状及发展趋势作一综述。
- 严专刘林李慧忠许铁
- 关键词：树突状细胞抗肿瘤免疫疫苗
- 抗βhCG多表位融合蛋白疫苗治疗实验小鼠黑色素瘤的机制研究
- 2015年
- 以融合蛋白HSP65-X10-βh CGCTP37作为免疫原,免疫荷瘤小鼠和未荷瘤小鼠,观察其对小鼠黑色素瘤B16-F10的体内治疗作用,以及其对肿瘤在体内的血管增生及肺转移的影响,并对其体内抗肿瘤的作用机理进行初步探讨。结果显示,HSP65-X10-βh CGCTP37的治疗对于小鼠黑色素瘤的攻击起到了有效的保护作用,与PBS对照组比较,实验组小鼠的平均瘤重显著降低(P<0.05);有效抑制了肿瘤细胞的血管增生和肺转移;免疫后小鼠的血清中产生了特异性的高滴度抗体。说明HSP65-X10-βh CGCTP37蛋白疫苗能够激发小鼠的有效免疫应答、抑制黑色素瘤的血管增生和转移,从而抑制肿瘤的生长。
- 杨洁柳祖辉程乾李曼曼袁玉婷苗梓韬李慧忠金亮曹荣月
- 关键词：热休克蛋白65蛋白疫苗黑色素瘤血管增生
