李恭驰
- 作品数：46 被引量：138H指数：8
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金国家自然科学基金湖北省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 基质金属蛋白酶-9／血管他丁／血管内皮生长因子信号轴在糖尿病足病中的研究被引量：10
- 2018年
- 目的探讨基质金属蛋白酶（MMP）-9／血管他丁／血管内皮生长因子（VEGF）信号轴在糖尿病足（DF）病中的作用。方法分别采用免疫荧光染色、实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）及Western blot法检测正常人及DF患者足创面处组织中MMP-9、VEGF的mRNA和蛋白表达水平。以人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）为研究对象，分为正常对照组、高糖模型组（含25mmol／L的葡萄糖）、高糖＋抗MMP-9（5μg/ml）组以及高糖＋抗血管他丁（5μg／ml）组，分别在12、24、48h取细胞培养上清液和细胞，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）、RT-qPCR及Western blot分别检测VEGF的分泌及表达水平。结果临床样本检测结果显示，与正常人比较，MMP-9在DF患者足创面处组织中高表达（mRNA水平：P=0．000；蛋白水平：P=0．000）；而VEGF在DF患者足创面处组织中呈现显著的低表达（mRNA水平：P=0．003；蛋白水平：P=0．000）。细胞实验结果显示，在12、24、48h分别与正常组比较，高糖组细胞中VEGF分泌及mRNA和蛋白水平表达均显著降低（分泌水平：P=0．032、0．006、0．004；mRNA水平：P=0．003、0．000、0．000；蛋白水平：P=0．000、0．000、0．000）；与高糖组比较，两个处理组细胞VEGF分泌及mRNA和蛋白水平表达均显著升高（抗MMP-9组分泌水平P=0．041、0．003、0．000；mRNA水平：P=0．039、0．006、0．005；蛋白水平：P=0．089、0．042、0．037；抗血管他丁组分泌水平P=0．005、0．001、0．000；mRNA水平：P=0．004、0．001、0．000；蛋白水平：P=0．031、0．001、0．000），且呈一定的时间依赖性。结论DF患者足创面处组织中MMP-9及VEGF表达呈负相关；拈抗MMP-9及血管他丁的表达能显著促进高糖诱导下HUVECs的VEGF分泌及表达水平。
- 邹利军李恭驰胡映月王知冯自波杨鸿杜烨陈江海邹新华李炳辉
- 关键词：基质金属蛋白酶-9血管内皮生长因子糖尿病足
- 糖尿病创面基质金属蛋白酶9对血管内皮生长因子表达的影响被引量：8
- 2017年
- 目的探究糖尿病创面基质金属蛋白酶9(MMP-9)对血管内皮生长因子(VEGF)的影响。方法选取2014年7月至2015年7月华中科技大学同济医学院附属梨园医院住院患者为研究对象,其中糖尿病足患者19例,骨科非糖尿病患者7例,将所招募的26例患者分为4组:糖尿病足患者创面伴随大量细菌>1×10~6个/g组织为A组7例,糖尿病足患者创面伴随少量细菌<1×10~6个/g组织为B组12例,糖尿病无创面组织(距糖尿病足溃疡创缘大于2 cm处皮肤)为C组6例,以及骨科非糖尿病患者组织为D组7例。MMP-9和VEGF的表达采用荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹分析法检测。组间差异用单因素方差分析并经过Scheffe检验,组间两两比较采用q检验。结果 A、B、C、D组RT-qPCR检测的MMP-9相对表达量分别为1.14±0.12、0.60±0.08、0.39±0.09、0.13±0.06,比较差异有统计学意义(F=43.92,P<0.05);RT-qPCR检测的VEGF相对表达量分别为1.01±0.22、3.55±0.97、5.72±0.55、6.92±1.55,比较差异有统计学意义(F=40.74,P<0.05);蛋白质免疫印迹分析法检测结果与RT-PCR结果一致。结论不同糖尿病创面组织中MMP-9的表达增高而VGEF的表达降低。
- 任国强李炳辉李恭驰张静祝友鹏邹新华
- 关键词：糖尿病糖尿病足基质金属蛋白酶9血管内皮生长因子类
- 采用滤纸片法检测细菌对诊断糖尿病足创面感染的意义被引量：9
- 2017年
- 目的评价采用滤纸片法检测细菌对诊断糖尿病足创面感染的意义。方法选取2014年7月-2015年7月在华中科技大学同济医学院附属梨园医院住院治疗且符合人选标准的糖尿病足溃疡患者18例，按德州大学糖尿病溃疡分级系统对糖尿病足溃疡创面进行分级，比较不同分级创面对应患者一般情况。分别取创面渗出液、创面组织，采用滤纸片法和组织活检法进行创面细菌检测。以组织活检法检测结果为对照，滤纸片法为待评价方法，检验2种方法检测结果的关联性、差异性、一致性。计算滤纸片法检测细菌的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确度。根据18例患者滤纸片法检测细菌的特异度和敏感度，绘制受试者工作特征（ROC）曲线，评价滤纸片法的检测效果。对数据行单因素方差分析、Fisher确切概率法检验。针对经组织活检法检出细菌的患者，对组织活检法与滤纸片法检出细菌数进行Pearson相关分析。结果（1）德州大学糖尿病溃疡分级1、2、3级创面对应患者间年龄、糖尿病病程、创面病程、创面面积、踝肱指数、糖化Hb、空腹血糖、血小板计数、红细胞沉降率、C反应蛋白、AST、血肌酐、尿素氮差异均无统计学意义（F值为0．029-2．916，P值均大于0．05），白细胞计数、ALT差异有统计学意义（F值分别为4．688、6．833，P〈0．05或P〈0．01）。（2）组织活检法检测结果显示患者中有6例未检测出细菌；12例检测出细菌，其中10例细菌数大于1×10^5个／g，2例细菌数未达到1×10^5个／g。滤纸片法检测结果显示患者中有8例未检测出细菌；10例检测出细菌，其中7例细菌数大于1×10^5个／g，3例细菌数未达到1×10^5个／g。滤纸片法与组织活检法检测细菌同时阳性患者有7例，同时阴性患者有8例，滤纸片法阴性而组织活检法阳性患者有3例，组织活检法阴�
- 邹新华祝友鹏任国强李恭驰张静邹利军冯自波李炳辉
- 关键词：糖尿病足创面细菌检测
- 一种用于糖尿病创面愈合的复合制剂
- 本发明提供一种用于糖尿病创面愈合的复合制剂，包括SDF‑1和海藻糖溶液，所述复合制剂用于上调巨噬细胞中PI3K/Akt通路并促进VEGF和MMP‑9的表达，从而促进糖尿病创面的愈合。本发明通过建立一个全新的糖尿病小鼠全层...
- 邓海波陈冉李恭驰
- 猪脱细胞真皮基质通过激活Wnt/β-连环蛋白信号通路对大鼠角质形成细胞细胞周期蛋白D1的表达的影响
- 2021年
- 目的探讨猪脱细胞真皮基质(pADM)对大鼠角质形成细胞细胞周期蛋白(Cyclin)D1的影响及其机制。方法体外培养原代大鼠角质形成细胞,免疫组织化学鉴定原代角质形成细胞;实验分组:对照组、pADM组、Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路激动剂SKL2001组、pADM+Wnt/β-catenin信号通路抑制剂FH535组;采用荧光定量聚合酶链反应(qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分析大鼠角质形成细胞中Wnt/β-catenin信号通路相关分子以及细胞周期蛋白Cyclin D1的表达。两组间比较采用非配对t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果pADM组Wnt/β-catenin信号通路相关分子Wnt3a,β-catenin,LEF-1和细胞周期蛋白Cyclin D1表达水平高于对照组(Wnt3a,qPCR:2.489±0.414比1.210±0.242,t=4.068,P<0.05;Western blot:0.571±0.043比0.217±0.071,t=7.401,P<0.05;β-catenin,qPCR:2.594±0.244比0.818±0.188,t=9.877,P<0.05;Western blot:0.794±0.031比0.420±0.026,t=16.12,P<0.05;LEF-1,qPCR:2.816±0.190比0.896±0.090,t=9.702,P<0.05;Western blot:0.700±0.124比0.276±0.090,t=4.781,P<0.05;Cyclin D1,qPCR:2.708±0.305比0.922±0.095,t=15.720,P<0.05;Western blot:0.554±0.097比0.166±0.067,t=5.723,P<0.05);pADM+FH535组Wnt3a,β-catenin,LEF-1和Cyclin D1表达水平低于pADM组(Wnt3a,qPCR:0.350±0.049比0.964±0.159,F=49.890,P<0.05;Western blot:0.192±0.106比0.485±0.028,F=47.780,P<0.05;β-catenin,qPCR:0.431±0.149比0.919±0.074,F=39.430,P<0.05;Western blot:0.174±0.013比0.386±0.048,F=49.950,P<0.05;LEF-1,qPCR:0.502±0.067比0.954±0.112,F=79.130,P<0.05;Western blot:0.091±0.037比0.377±0.055,F=121.000,P<0.05;Cyclin D1,qPCR:0.264±0.049比0.962±0.037,F=105.500,P<0.05;Western blot:0.111±0.053比0.297±0.023,F=137.300,P<0.05)。结论pADM有类似于Wnt/β-catenin信号通路激动剂的作用,其可通过激活Wnt/β-catenin信号通路提高大鼠角质形成细胞中Cyclin D1的表达,FH535可阻断pADM对Cyclin D1的激活作用。
- 陈冉李恭驰李炳辉邓海波张晨晨邝莉雯杜烨周云华郑洁
- 关键词：猪脱细胞真皮基质WNT信号通路角质形成细胞细胞周期
- 血管内皮细胞生长因子促进角质形成细胞中CD34的表达
- 2021年
- 目的观察血管内皮细胞生长因子(VEGF)是否促进角质形成细胞(KCs)中血管内皮细胞因子CD34的表达。方法 2020年10月至2021年7月,15只C57BL/6小鼠背部制作全皮层缺损创面,给予及时护理,分别取正常组织及第1、3、5、7天创面组织进行蛋白免疫印迹法(Western blot)检测VEGF表达。细胞实验分为KCs组和KCs+VEGF组,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测CD34信使RNA(mRNA)水平,Western blot检测CD34、Delta样配体4(DLL4)、肝配蛋白B2 (Ephrin B2)蛋白水平的表达;加入VEGF组和VEGF+VEGF抑制剂L-685458组采用Western blot检测CD34蛋白表达。应用图像处理软件Image J和统计软件GraphPad Prism6分析,两组间比较采用t检验,多组间采用单因素方差分析。结果随着时间的推移,创面组织中VEGF蛋白表达水平呈动态升高(N=0.344±0.037,d1=0.158±0.019,d3=0.298±0.006,d5=0.509±0.066,d7=1.056±0.172,F=172.8,P<0.01)。加入VEGF后,角质形成细胞CD34 mRNA表达增加(KCs=1.33±0.36,KCs+VEGF=5.04±0.51,t=10.25,P<0.01),CD34、DLL4、Ephrin B2蛋白表达水平升高(KCs=0.268±0.026,KCs+VEGF=0.693±0.005,tCD34=27.78,PCD34<0.01;KCs=0.172±0.063,KCs+VEGF=0.609±0.171,tDLL4=4.785,PDLL4<0.05;KCs=0.293±0.031,KCs+VEGF=0.835±0.049,tEphrin B2=16.26,PEphrin B2<0.05),而加入VEGF抑制剂L-685458后,角质形成细胞中CD34表达低于VEGF组(VEGF=0.777±0.053,VEGF+L-685458=0.263±0.053,t=11.83,P<0.01)。结论 VEGF促进角质形成细胞中血管内皮细胞相关因子CD34、DLL4、Ephrin B2的表达。
- 邹利军李炳辉王知陈智敏王晓蓉李恭驰周云华杨鸿
- 关键词：血管内皮生长因子角质形成细胞CD34
- 2型糖尿病患者下肢动脉硬化的影响因素分析
- 2024年
- 目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者合并下肢动脉硬化(LEA)的独立影响因素。方法回顾性分析2021年1月至2022年12月华中科技大学同济医学院附属梨园医院创面修复中心收治的420例T2DM患者资料,其中275例患者合并LEA,145例患者无LEA。收集性别、年龄、基础疾病(包括冠心病、脑梗死、高血压、高脂血症)、D-二聚体、白细胞数(WBC)、红细胞数(RBC)、血红蛋白(HGB)、空腹血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)、补体C1q、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、B型脑钠肽(BNP)等指标,分析与T2DM患者合并LEA密切相关的影响因素。数据分析采用t检验、Mann-Whitney U检验、χ2检验,以及logistic回归分析。结果收集420例T2DM患者,275例合并LEA,发生率为65.5%,其余145例患者无LEA。是否合并LEA的患者比较发现,冠心病、脑梗死、D-二聚体、HGB、HbA1c、HDL-C、LDL-C、BNP可能与LEA发生有关(P<0.05),其余变量两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。单因素logistic回归分析结果显示,冠心病、D-二聚体、HbA1c、LDL-C、BNP可能是LEA的影响因素(P<0.05)。进一步建立多元logistic回归模型发现,有冠心病、D-二聚体高、HbA1c高和BNP高是T2DM患者发生LEA的独立影响因素(P<0.05)。结论合并冠心病、D-二聚体高、HbA1c高或BNP高是T2DM患者合并LEA的独立影响因素。
- 王卉薛宝睿李恭驰刘慧真雷霞李炳辉
- 关键词：糖尿病下肢动脉硬化影响因素LOGISTIC回归分析
- 甲壳素蜂蜡膏促进糖尿病足创面愈合的疗效观察
- 目的：探讨甲壳素蜂蜡膏治疗Ⅰ-Ⅱ级糖尿病足的疗效.方法：选取我院Ⅰ-Ⅱ级糖尿病足患者220例,治疗组115例,Ⅰ级50例,Ⅱ级65例,对照组105例,Ⅰ级50例,Ⅱ级55例,在综合治疗基础上,两组创面予局部清创后,分别给...
- 邹新华李炳辉李恭驰闫景昊
- 关键词：糖尿病足创面愈合
- 2020年糖尿病足基础及临床研究进展被引量：6
- 2021年
- 糖尿病足是长期高血糖导致的外周神经病变、血管病变与多致病因素相互作用而引发的复杂难治性疾病。患者病程长,创面经久难愈,极容易并发感染,严重时危及患者生命[1]。糖尿病相关的足部溃疡在全球具有高发病率及病死率,每年影响全球约2600万人,造成极大的医疗负担[2-4]。调查显示,中国18岁以上成年人中有11.2%患有糖尿病,总数估计为1.298亿,其中糖尿病足的发病率约为4.1%[5-6]。考虑到糖尿病足对患者预后和医疗支出的重大影响,提高对糖尿病足部溃疡的理解至关重要。本文着重阐述2020年在糖尿病足基础及临床研究方面的新进展,旨在为广大医学同仁提供借鉴帮助。
- 李炳辉李恭驰张晨晨邝莉雯邓海波
- 关键词：糖尿病足创面
- 不同浓度猪脱细胞真皮基质诱导小鼠毛囊角质细胞迁移的实验研究被引量：1
- 2021年
- 目的:探讨不同浓度猪脱细胞真皮基质(pADM)对小鼠毛囊角质细胞迁移的诱导作用。方法:在Transwell实验和细胞划痕实验中,分别将0、2、10、20、40mgpADM配制成5个浓度梯度,分别作用于小鼠毛囊角质细胞。Transwell实验分组pADM浓度为0、4、20、40、80μg/μl;细胞划痕实验中pADM浓度分别为0、1、5、10、20μg/μl。每组重复3次。观察不同浓度pADM诱导毛囊角质细胞迁移的作用。结果:在Transwell实验中,0、4、20、40和80μg/μl组毛囊角质细胞计数分别为(51.67±2.96)、(129.78±2.91)、(187.11±0.84)、(159.89±2.69)和(161.44±3.4)个,差异具有统计学意义(P<0.05)。划痕实验中,0、1、5、10、20μg/μl组划痕愈合面积百分比分别为(1.8±0.3)%、(11.8±0.2)%、(32.4±0.6)%、(22.1±0.2)%和(21.8±0.2)%,差异具有统计学意义(P<0.05)。划痕愈合百分比随pADM浓度增加而逐渐增大,在5μg/μl组达到高峰,随后逐渐下降,其变化趋势与Transwell实验表现一致。结论:pADM具有诱导毛囊角质细胞迁移的作用,其作用大小与pADM浓度有关。
- 邓海波李炳辉李恭驰陈冉张晨晨邝莉雯郑洁
- 关键词：猪脱细胞真皮基质创面修复
