朱燕勤
- 作品数:3 被引量:9H指数:1
- 供职机构:清华大学化学工程系更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:理学生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 诺卡氏菌酰胺酶基因的分子克隆及在大肠杆菌中表达的初步研究被引量:1
- 2006年
- 酰胺酶是一种重要的工业酶。利用生物信息学手段,在和已知酰胺酶基因序列分析比对的基础上,首次从Ncordiasp.YS-2002中成功地克隆得到酰胺酶基因ami,并对其基因序列及氨基酸序列的性质进行了分析。结果表明,所得酰胺酶基因ami片段大小共为1446bp,由启动子区、阅读框和回文结构终止区三部分构成。序列分析和进化树分析表明,Ncordiasp.YS-2002酰胺酶是一种比较特殊的酰胺酶,不含大多数酰胺酶共同具有的保守区序列。进一步将酰胺酶基因连接到pET-28a(+)上,转入大肠杆菌BL21(DE3)中筛选获得重组菌株PEAB。酶活测定结果表明重组菌具有酰胺酶酶活,但较低,其原因可能是因为大量表达的产物主要以包涵体的形式存在。
- 许幂于慧敏谭天伟朱燕勤沈忠耀
- 关键词:诺卡氏菌分子克隆
- 重组大肠杆菌BL21(DE3)/pET-NH<'M>和野生诺卡氏菌腈水合酶的催化稳定性研究
- 比较并讨论了重组大肠杆菌BL21(DE3)/pET-NHM 和野生诺卡氏菌腈水合酶的产物耐受性和热稳定性,提出了这两种菌株在研究腈水合酶过程中的应用。通过实验测定一定条件下腈水合酶的失活曲线,考察了腈水合酶在无水合反应条...
- 朱燕勤田卓玲于慧敏沈忠耀
- 关键词:重组大肠杆菌诺卡氏菌腈水合酶
- 文献传递
- 气相色谱法快速定量检测丙烯腈的生物催化产物被引量:8
- 2007年
- 利用微生物催化丙烯腈生产丙烯酰胺在工业上已经得到了广泛的应用。生产中反应液同时含有底物丙烯腈、产物丙烯酰胺以及副产物丙烯酸。为了控制产品质量,需快速定量检测反应液中各组分。采用毛细管柱PEG-20M(30 m×0.25 mm i.d.,2μm),以20 g/L的乙酰胺作为内标物对反应液进行气相色谱分析,优化分析条件为:进样口为SPL,温度260℃;FID检测器,温度260℃;柱温190℃;载气为氮气,流速25 cm/min;分流进样,进样量0.4μL,分流比为50∶1。在4 min内,3个组分得到完全分离,该方法具有良好的重现性和线性关系,回收率分别为98.5%、102.1%、105.0%,相对标准偏差分别为9.1%、5.3%、1.7%。该方法分析速度快,适合实验室与工厂生产中大量快速定量检测样品。
- 王铁钢罗晖朱燕勤于慧敏杨慧芬沈忠耀
- 关键词:气相色谱法快速定量检测丙烯腈丙烯酸丙烯酰胺