朱小云
- 作品数：5 被引量：9H指数：1
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- PsL5F诱导人未分化甲状腺癌FRO细胞凋亡与细胞内ROS水平对JNK信号通路的影响
- 2009年
- 目的研究半边旗5F(Pteris semipnnata L5F,PsL5F)对人未分化甲状腺癌FRO细胞的凋亡诱导及其与细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平升高和丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinases,MAPKs)激活的关系。方法MTT法测定PsL5F对FRO细胞的生长抑制作用;流式细胞术与Annexin V-FITC/PI标记法联用检测PsL5F对FRO细胞的凋亡诱导;用ROS特异反应试剂CM-H2DCFDA标记在流式细胞仪上分析PsL5F对FRO细胞内ROS水平的影响;Western blot法分析PsL5F处理对FRO细胞ERK、JNK和p38MAPK磷酸化水平的影响。结果PsL5F对FRO细胞具有显著的生长抑制作用,且呈剂量-时间依赖性;在PsL5F 100 mg/L浓度下,磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,PS)外翻细胞的比例呈时间依赖性逐渐增加;用PsL5F处理FRO细胞,在1 h时细胞内ROS水平就表现出明显的升高,GSH可抑制PsL5F诱导的细胞内ROS水平升高和细胞凋亡到对照水平;PsL5F处理可使FRO细胞ERK、JNK和p38MAPK磷酸化而被激活,JNK抑制剂Dicumarol可减轻PsL5F诱导的细胞凋亡,ERK和p38MAPK的抑制剂PD098059和SB203580加剧PsL5F诱导的细胞凋亡。结论PsL5F对FRO细胞的生长抑制作用是通过诱导细胞凋亡进行的;细胞内ROS水平升高起到了非常重要的作用;PsL5F处理可导致FRO细胞MAPKs信号通路激活,其中JNK信号通路是促凋亡信号,而ERK和p38MAPK作为生存信号被激活来对抗PsL5F诱导的细胞凋亡。
- 刘智敏李梨朱小云宋方洲
- 关键词：未分化甲状腺癌细胞凋亡活性氧丝裂原蛋白激酶
- 在高于米氏常数的底物浓度下用积分法测定尿酸酶活性被引量：8
- 2004年
- 目的 :以尿酸酶为模型 ,考察在底物浓度高于酶米氏常数 (Km)时用积分法测定酶活性 (Vm)的可靠性 .方法 :用 2 93nm光吸收记录尿酸酶反应曲线 .用以反应时间为自变量的积分速度方程 ,以尿酸酶Km 为常数而本底为非线性参数拟合尿酸酶反应曲线 ,搜寻对应最好拟合的Vm.结果 :此积分法测定Vm 主要受剩余底物浓度影响 ,本底基本没有干扰 .剩余底物低于 2 .5 μmol/L时用 1 0～ 70 μmol/L起始底物所得Vm 无差异 .用 2 5和 70 μmol/L起始底物浓度时初速度和Vm 都与酶量呈正比 .在此两种底物浓度下积分法的下限相同 ,且与初速度法下限无明显差异 .但用积分法测定酶活性的上限明显高于初速度法 ,而且起始底物浓度越低则差异越显著 .结论 :在积分法中使用以反应时间为自变量的积分速度方程拟合酶反应曲线 ,在高于Km
- 廖飞朱小云王咏梅曾昭淳左渝萍
- 关键词：积分法尿酸酶底物浓度酶活性测定
- PsL5F诱导人未分化甲状腺癌FRO细胞凋亡的机制研究被引量：1
- 2009年
- 目的研究半边旗5F(PsL5F)对人未分化甲状腺癌FRO细胞的凋亡诱导及其分子机制。方法用PsL5F处理FRO细胞,MTT法测定其对FRO细胞的生长抑制作用;Annexin V-FITC/PI标记法与流式细胞术联用检测PsL5F对FRO细胞的凋亡诱导;用CM-H2DCFDA和Di OD6(3)标记在流式细胞仪上分析PsL5F对FRO细胞内活性氧(ROS)水平和线粒体膜电位(MMP)的影响;Western blot方法分析Bax、Cyto C、凋亡诱导因子(AIF)及截断PARP的水平变化;Caspase-3活性用Caspase-3比色分析试剂盒测定。结果PsL5F对FRO细胞具有显著的生长抑制作用,且呈现剂量和时间依赖性;PsL5F可诱导FRO细胞凋亡,表现出在100 mg/L浓度下,磷脂酰丝氨酸(PS)外翻细胞的比例呈时间依赖性逐渐增加;用100 mg/L PsL5F处理FRO细胞,在1 h时细胞内ROS水平即明显升高,ROS抑制剂还原型谷胱甘肽(GSH)可抑制PsL5F诱导的细胞内ROS水平升高和细胞凋亡;100mg/L PsL5F处理可使FRO细胞MMP逐渐降低,GSH可抑制PsL5F诱导的MMP降低;同时,线粒体膜蛋白组分中Bax和细胞液蛋白组分中Cyto C、AIF逐渐增加;PsL5F处理使FRO细胞Caspase-3活性逐渐升高及其作用底物PARP断裂。结论PsL5F对人未分化甲状腺癌FRO细胞的生长抑制作用是通过诱导细胞凋亡进行的。其中,细胞内ROS水平升高起到了非常重要的第二信使作用,线粒体是其作用的重要靶点。细胞凋亡是通过Bax转位到线粒体膜、引起MMP降低、Cyto C和AIF释放到细胞液、激活Caspases级联反应而进行的。
- 刘智敏李梨朱小云宋方洲
- 关键词：未分化甲状腺癌细胞凋亡活性氧线粒体膜电位
- 5-羟色胺转运体敲除小鼠在高架十字迷宫中下丘脑CRF mRNA表达的变化
- 2014年
- 目的研究5-羟色胺转运体(serotonin transporter,SERT)敲除小鼠在高架十字迷宫(elevated plus maze,EPM)中下丘脑促肾上腺皮质激素释放因子(corticotrophin-releasing factor,CRF)mRNA表达的变化。方法将小鼠按基因型(SERT+/+、SERT+/-、SERT-/-)分为对照组和EPM组,每组10只,EPM组利用高架十字迷宫作为应激原刺激小鼠。测定各组小鼠下丘脑以及室旁核部位CRF mRNA的表达。结果在基础条件下(对照组),SERT敲除小鼠下丘脑及室旁核的CRF mRNA表达降低(P<0.05);EPM刺激下(EPM组),SERT+/-和SERT-/-小鼠在下丘脑及室旁核的CRF mRNA表达显著高于SERT+/+(P<0.01);构建的CRF mRNA探针反义链在下丘脑PVN部位检测到高密度的CRF mRNA,而正义链却不能探测到CRF mRNA;EPM组hnRNA SERT-/-小鼠表达较对照组明显增高(P<0.01)。结论应激能明显促进下丘脑CRF mRNA的表达。SERT敲除小鼠的异常应激与CRF mRNA的表达升高有关。
- 文玲邓永兵朱小云蒋雪
- 关键词：5-羟色胺转运体高架十字迷宫下丘脑室旁核
- 5F诱导未分化甲状腺癌细胞凋亡的信号传导
- 甲状腺癌是人类最主要的内分泌肿瘤,其发病率逐年上升。除髓样甲状腺癌产生于滤泡旁 C 细胞外,90%以上的甲状腺癌都来源于滤泡上皮细胞。根据细胞分子生物学和临床特征,可分为乳头状甲状腺癌、滤泡状甲状腺癌和未分化甲状腺癌,其...
- 刘智敏宋方洲李梨朱小云
- 关键词：未分化甲状腺癌细胞凋亡信号传导
- 文献传递
