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cyclinD1和CDK4在低氧心肌中的表达及意义: 2005年; 目的研究低氧心肌细胞周期及缺氧过程中细胞周期蛋白D1(cyclinD1)和细胞周期蛋白依赖激酶4(CDK4)表达的变化,探讨缺氧心肌在凋亡前是否存在增殖能力和自身修复。方法采用SD大鼠乳鼠进行心肌细胞培养,建立心肌缺血模型,实验分正常对照、缺血6 h和缺血12 h三组;以四唑盐比色试验(MTT)检测心肌细胞活力,流式细胞术测定细胞周期,免疫组化检测cyclinD1和CDK4表达。结果与对照组比较,心肌细胞缺氧处理6 h后,细胞周期中S 期比例增高(P<0 01),12 h后,S期比例下降(P<0 05);cyclinD1胞浆表达和CDK4 胞核表达增加。结论在缺氧所致死亡、凋亡过程中心肌细胞经历了一定程度的增殖过程,cyclinD1 和CDK4 表达增加参与了细胞增殖,缺氧损伤可刺激心肌细胞增殖能力。; 徐顺霖黄峻朱进丁贵鹏刘宁波朱毅徐璐; 关键词：CYCLIND1 CDK4 低氧细胞周期蛋白依赖激酶心肌缺血模型心肌细胞活力

基础医学专业学生培养情况的调查分析被引量：3: 2017年; 南京医科大学基础医学专业自2014年开始招生。为了更早地发现在校生学习过程中可能出现的状况,准确分析学生在培养过程中所存在的问题,探讨切实有效的改进措施,文章收集和整理南京医科大学2014级五年制基础医学专业学生2014-2017这三个学年多个批次的调查问卷。其结果提示,学生对本专业的认同度仍有待提高,现行导师制得到学生的基本认可,但仍要进一步加强对导师的培训和管理,以期培养出合格的基础医学教育高水平人才。; 徐璐许宁任勇亚; 关键词：导师制教学方法

聚合物微气泡的优化及其体内外超声成像研究被引量：1: 2015年; 目的 :对以左旋聚乳酸(poly L-lactic acid,PLLA)及聚乙烯醇(polyvinyl alcohol,PVA)为膜材的微气泡,在稳定性和粒径两个方面进行了优化,使其在保持超声成像增强能力的同时,更适于体内应用。方法:首先对PVA进行了羧基化修饰,使制备的微气泡表面含有羧基,Zeta电位达到-38.87±2.19 m V,从而由于静电斥力提高了微气泡的稳定性。其次,通过调节制备过程中的PVA浓度、水相油相比、乳化速度3种因素,实现了对微气泡粒径的控制。结果:对优化后平均粒径为1.38μm、粒径分布均匀、性质稳定的微气泡进行了体内外超声成像实验,证实其在体外能够显著增强超声成像效果,在体内既可以通过瘤内注射迅速提高肿瘤部位超声显影质量,又可以通过静脉注射,经血液循环到达肿瘤部位,在一段时间的累积之后,增强超声成像效果。结论:本研究为微气泡的体内应用打下了良好基础。; 段磊杨芳何闻徐璐许宁刘宾顾宁; 关键词：微气泡超声成像

肿瘤抗原基因MAGE-A9的克隆及原核表达: 2007年; 目的扩增和克隆人黑色素瘤抗原MAGE-A9cDNA,构建原核表达载体,表达并纯化MAGE-A9蛋白。方法从人肝癌组织提取总RNA,用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)从中扩增出MAGE-A9 cDNA,插入载体pMD18-T中,测序正确后,构建重组表达载体pBAD/gⅢ-MAGE-A9,转化大肠杆菌TOP10株。以L-Arabi-nose进行诱导表达,并纯化。结果获得MAGE-A9cDNA,测序结果与GenBank一致。成功构建表达载体,表达可溶重组蛋白,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析其相对分子质量为35 000。结论成功地构建了pBAD/gⅢ-MAGE-A9原核表达质粒,获得了MAGE-A9蛋白,为该蛋白应用于肿瘤免疫治疗奠定了基础。; 徐璐朱进仇镇宁李玉华冯振卿; 关键词：黑色素瘤逆转录-聚合酶链反应基因克隆基因表达

双膦酸盐纳米乳在大鼠实验性自身免疫性神经炎中的应用被引量：1: 2019年; 目的:探讨双膦酸盐(bisphosphonate nanoemulsion,BP)纳米乳对实验性自身免疫性神经炎(experimental autoimmune neuritis,EAN)的治疗作用。方法:BP纳米乳体外处理巨噬细胞系RAW264.7,实时定量PCR(real-time PCR,RT-PCR)检测炎症因子白介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)及抑炎因子IL-10、巨噬细胞M2型标记物CD206的表达。构建EAN大鼠模型,给予BP纳米乳处理,测大鼠体重,分析机械疼痛阈值及临床评分,劳克坚牢蓝(luxol fast blue,LFB)染色检测坐骨神经髓鞘病变,免疫组化观察其炎性细胞浸润及病理改变;RT-PCR检测EAN大鼠坐骨神经IL-1β、IL-17、i NOS及基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)等炎症因子表达。结果:BP与BP纳米乳体外处理巨噬细胞,均可降低IL-1β、iNOS,同时提高IL-10和CD206的表达,促进M1型巨噬细胞向M2型转化。BP纳米乳干预的EAN大鼠体重下降减轻、临床评分降低,机械性疼痛程度缓解,病程明显缩短。同时坐骨神经炎性细胞浸润及髓鞘病变显著减轻,IL-1β、IL-17、i NOS、MMP-9表达降低。结论:BP纳米乳可能通过减轻大鼠坐骨神经炎性细胞浸润及抑制促炎因子表达,来缓解EAN的临床病理变化,提示BP纳米乳可作为神经炎性病变的潜在治疗药物。; 张蒙张本铮吴向辉张志远徐璐; 关键词：实验性自身免疫性神经炎双膦酸盐纳米乳巨噬细胞炎症相关因子

肝细胞癌MAGE-A9基因的克隆、表达及特性鉴定: 本课题在参照国内外相关研究的基础上，设计并完成了以下研究内容，从HCC组织中抽提总RNA，设计引物扩增MAGE-A9基因，经亚克隆、测序鉴定其序列，与GenBank数据库比对，构建MAGE-A9基因的原核分泌表达系统，分...; 徐璐; 关键词：肝细胞癌基因克隆基因表达单克隆抗体免疫组化 RT-PCR; 文献传递

TSLP protein is increased in epithelial ovarian carcinomas with poor prognosis Introduction: 徐璐许宁黄剑飞朱进

可溶性虫卵抗原对小鼠骨髓源性树突状细胞表型及Th17细胞分化的影响: 2012年; 目的 :探讨日本血吸虫可溶性虫卵抗原(soluble egg antigen,SEA)致敏小鼠骨髓源性树突状细胞(dendritic cells,DCs)后对其细胞表型及Th17细胞分化的影响。方法 :收集BALB/c小鼠骨髓细胞,应用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)、白介素(interleukin,IL)-4定向诱导小鼠骨髓细胞向DCs分化;流式细胞仪检测SEA刺激培养后DCs表面分子的表达情况;流式细胞术检测DCs分泌IL-6、IL-23的水平,ELISA法检测DCs分泌转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)的水平;SEA刺激DCs与CD4+T细胞共培养后检测培养上清中IL-6、TGF-β、IL-23和IL-17细胞因子水平。结果:诱导培养出可供实验用的高纯度DCs;SEA刺激DCs能表达较高水平的CD80、CD86、CD40、组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)-Ⅱ类分子;SEA刺激DCs产生IL-6和TGF-β明显增多;SEA刺激的共培养细胞上清中IL-17水平增高。结论:SEA能够促进DCs成熟,并诱导CD4+T细胞向Th17细胞分化。; 薛冰徐璐周亮仇镇宁唐奇李玉华王祝鸣朱进冯振卿管晓虹; 关键词：日本血吸虫可溶性虫卵抗原树突状细胞 TH17细胞

日本血吸虫单克隆抗抗独特型抗体NP48单特异性双链抗体的构建表达与初步鉴定被引量：3: 2005年; 目的构建和表达日本血吸虫单克隆抗抗独特型抗体NP48单特异性双链抗体,并初步鉴定表达产物活性。方法应用SOE法扩增双链抗体基因VH-linker-VL(Diabody,简称D)。将D重组入原核表达载体pBAD/gⅢ。表达质粒转化E.coliTOP10,左旋阿拉伯糖诱导表达。对D的表达产物进行分离纯化,采用Dot-ELISA法检测纯化蛋白与NP30、可溶性虫卵抗原(SEA)、可溶性成虫抗原(SWAP)的结合活性。结果测序证实双链抗体基因D构建成功;构建了D的原核表达系统,诱导表达产物主要以包涵体形式存在,分子量约为27kD;经纯化、变性复性后用Dot-ELISA法鉴定结果表明,D表达的纯化蛋白可与NP30特异性结合。结论所构建、表达的NP48单特异性双链抗体具有亲本单抗的部分特性。; 朱毅朱进冯振卿徐璐李芸茜仇镇宁管晓虹; 关键词：日本血吸虫蛋白表达

MAGE-A9基因原核表达系统的构建及其在肝细胞癌中的表达: 2007年; 目的扩增和克隆人黑色素瘤抗原MAGE-A9(melanom a antigen A9)cDNA,构建原核表达载体,制备抗MAGE-A9单抗,观察其在肝细胞癌中的定位。方法从人肝癌组织提取总RNA,用RT-PCR从中扩增出MAGE-A9cDNA,插入载体pMD18-T中,测序正确后,构建重组表达载体pBAD/gI-II-MAGE-A9,转化大肠杆菌TOP10株进行表达。重组蛋白经L-Arabinose诱导表达纯化后,制备抗MAGE-A9单抗,免疫组化检测MAGE-A9在肝细胞癌中的表达和定位。结果获得AGE-A9cDNA,测序结果与GenBank一致。成功构建表达载体,表达可溶重组蛋白,SDS-PAGE分析其相对分子质量为35Kd。获得抗MAGE-A9单抗,MAGE-A9在肝细胞癌中的阳性表达率为21%(8/39),主要表达于胞浆,未见肿瘤异质性,统计学分析MAGE-A9的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小和分化程度没有相关性。结论有相当部分肝癌患者的肿瘤表达MAGE-A9抗原,且其表达与患者年龄、性别、肿瘤大小和分化程度没有相关性,MAGE-A9可能成为肝癌特异性免疫治疗的靶点。; 徐璐朱进仇镇宁李玉华冯振卿; 关键词：黑色素瘤抗原 RT-PCR 基因克隆基因表达

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徐璐

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