徐攀
- 作品数：8 被引量：3H指数：1
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- 早期胃腺癌原代细胞单链DNA适配子及制备方法
- 本发明公开一种早期胃腺癌原代细胞单链DNA适配子及制备方法。本发明的早期胃腺癌原代细胞单链DNA适配子的基因序列分别为：SEQIDNo.1、SEQIDNo.2、SEQIDNo.3、SEQIDNo.4和SEQIDNo.5。...
- 韩跃武徐攀邵明洋杜振亚张雪燕姚海燕马驰
- 文献传递
- 早期胃癌中原代细胞ssDNA适配子检测的临床意义被引量：1
- 2014年
- 目的探讨早期胃癌中原代细胞ssDNA适配子检测的临床意义。方法对5个标志物应用适配子-生物素-链霉亲和素磁珠分离系统进行分离、纯化及鉴定,筛选出特异性、灵敏度高的肿瘤标志物,并对其建立相应的检测方法,采用美国临床实验室标准化组织的相关标准对其检测方法进行临床评价,并参考《临床检验方法学评价》对其诊断性能进行分析。结果早期胃癌中原代细胞ssDNA适配子的检测敏感性为49.13%,特异性为91.44%,阳性似然比为5.74,阴性似然比为0.56 g,干扰实验51.8%,验前比65.7%,验后比197.2%。与金标准相比,在敏感性、特异性、准确度和精确度方面均无明显差异(P>0.05)。结论早期胃癌中原代细胞ssDNA适配子的检测,具有较高的灵敏度和较强的特异性,为早期胃癌的发现提供依据,可考虑作为早期胃癌的辅助诊断标准之一。
- 徐攀马驰张雪燕杨晓娟蒋丹聂登梅刘昕韩跃武
- 关键词：胃腺癌原代细胞适配子
- 抗菌肽2IQ3及其突变体的原核表达与纯化
- 2015年
- 目的将抗菌肽2IQ3及其突变体基因进行原核表达,经纯化获得目的蛋白。方法根据2IQ3氨基酸序列及大肠杆菌偏爱密码原则设计并合成2IQ3基因编码的核苷酸片段,采用重叠延伸聚合酶链反应法扩增抗菌肽2IQ3及突变体基因,克隆至载体p ET-28a(+)中,构建重组表达质粒,转化至大肠杆菌BL21中,经异丙基硫代半乳糖苷诱导表达,分析重组蛋白的表达形式,纯化重组蛋白。结果构建的抗菌肽2IQ3及其突变体基因所表达的重组蛋白,经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定,有特异性目的条带出现,纯化的重组蛋白纯度达97%左右,浓度为0.502 mg/m L。结论成功构建了抗菌肽2IQ3及其突变体基因的原核表达体系,并在大肠杆菌中进行表达、纯化,为进一步研究其生物学活性奠定了基础。
- 马驰王玉平谢俊秋张雪燕徐攀杜振亚倪天治马如超韩跃武
- 关键词：抗菌肽突变体大肠杆菌纯化
- 早期胃腺癌原代细胞单链DNA适配子及制备方法
- 本发明公开一种早期胃腺癌原代细胞单链DNA适配子及制备方法。本发明的早期胃腺癌原代细胞单链DNA适配子的基因序列分别为：SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.3、SEQ ID No.4和SE...
- 韩跃武徐攀邵明洋杜振亚张雪燕姚海燕马驰
- 文献传递
- 绵羊骨髓细胞抗菌肽基因的改造及其在原核生物中的表达
- 2014年
- 目的通过对绵羊骨髓细胞抗菌肽(sheep myeloid antibacterial peptides with 29 amino acids,SMAP-29)的活性片段SMAP-29(1-18)基因的改造,使其以C-端融合蛋白的形式在大肠埃希菌(E.coli)BL21(DE3)中表达。方法根据大肠埃希菌偏爱密码子表,将SMAP-29的活性片段SMAP-29(1-18)基因序列进行改造,应用ProtParam分析SMAP-29的理化特性,Anthorprot软件预测其螺旋轮结构,设计新的基因片段,插入质粒pET-30a中,构建重组表达质粒pET-30aSMAP-29[1-18,K2,4,L13],转化感受态E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物过2次Ni2+NTA His Bind resin柱进行纯化。结果 SMAP-29基因序列经改造后,稳定性、等电点及半衰期均明显提高。重组质粒经PCR、双酶切及测序鉴定,证明构建正确。表达的重组蛋白相对分子质量约61 257,以包涵体形式存在,表达量占菌体总蛋白的41%,纯度为81%。结论已成功对SMAP-29基因进行改造,实现了其在E.coli BL21(DE3)中的高表达,获得了纯度较高的目的蛋白,为进一步规模化生产SMAP-29奠定了理论及实践基础。
- 刘科鹏柴晓虹韩跃武姚海燕张雪燕徐攀
- 关键词：基因改造原核细胞
- 慢性粒细胞白血病ssDNA适配子检测方法的评价
- 2013年
- 目的评价慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)ssDNA适配子检测方法的临床诊断应用价值。方法基于前期构建的方法,用ssDNA适配子与K562细胞及临床CML标本结合进行检测,在优化的检测条件下,以美国临床实验室标准化组织(Clinical and Laboratory Standard Institude,CLSL)的相关标准为依据,对该方法进行方法学评价,并对方法进行临床诊断性能的评价。结果建立的方法回归方程为:y=1 476.4+495.31 x,r2=0.976 6,拟合度较高;该方法敏感性较高,特异性较强,检测高、中、低浓度的K562细胞的批内变异系数均小于5%,日间变异系数均大于5%;该方法测得的不同浓度CML标本的总平均回收率为78.7%;测得的溶血、黄疸及血脂标本的平均干扰率均>10.0%;ROC曲线下面积为0.867,ssDNA适配子检测CML组、非慢粒类型白血病组、健康对照组标本的敏感度为75%,特异度为77%,阳性似然比为3.26,阴性似然比为0.32,漏诊率为25%,可靠度为0.306,可用度为0.52。结论 CML ssDNA适配子检测方法本身灵敏度高,检测阈值低,特异性强;在临床诊断性能研究中,该方法特异性高,但敏感性较低,具有一定的临床诊断价值。但该方法抗干扰能力弱,重复性较差,且可靠度<0.5,其临床应用还有一定的局限性。
- 习静徐攀郭鹏韩跃武陈雪丽张萍王瑞玲袁琳陈丹马驰
- 关键词：慢性粒细胞白血病
- 先兆子痫患者血浆ADMA与同型半胱氨酸水平相关性研究
- 2014年
- 目的探讨先兆子痫患者血浆不对称性二甲基精氨酸(asymmetric dimethylarginine,ADMA)水平与同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)水平的相关性,以及ADMA、Hcy水平与先兆子痫的关系。方法用酶联免疫吸附法检测91例先兆子痫患者血浆ADMA及血浆Hcy水平。以80例血压正常的健康孕妇为对照。结果先兆子痫组血浆ADMA水平(0.625±0.186μmol/L)显著高于对照组(0.524±0.106μmol/L)(P<0.05);先兆子痫组血浆Hcy水平(12.447±6.134μmol/L)显著高于对照组(8.207±2.797μmol/L)(P<0.05)。先兆子痫组血浆ADMA水平与Hcy水平呈正相关(r=0.623,P<0.05)。结论先兆子痫患者的血浆中不对称性二甲基精氨酸和同型半胱氨酸是升高的,这说明ADMA和Hcy的升高与先兆子痫的发生、发展有关,ADMA、Hcy可能是先兆子痫的危险因子。降低患者升高了的同型半胱氨酸和ADMA可能有助于治疗先兆子痫。
- 刘科鹏张笠柴晓虹高武韩跃武徐攀
- 关键词：二甲基精氨酸同型半胱氨酸先兆子痫
- 人早期胃腺癌新膜标志物的表征及临床前实验室检测研究
- 目的:胃癌是消化道最常见恶性肿瘤之一,根据国际癌症研究机构首次在2012年公布的全球癌症统计,死亡率第三,发病率呈现10倍增长。因此对胃癌特别是胃腺癌的诊治研究显得极其重要;资料显示,大多数胃腺癌患者确诊时已处进展期,5...
- 徐攀
- 关键词：胃腺癌
- 文献传递
