彭夕洋
- 作品数：15 被引量：4H指数：1
- 供职机构：湖南师范大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学文化科学更多>>
- gcm蛋白的表达、纯化及多克隆抗体的制备
- 2013年
- gcm(glial cells missing)是调控神经元细胞和神经胶质细胞相互转化的一个基因开关.在gcm功能缺损的突变体中,预期的神经胶质细胞发育成神经元细胞;而在gcm过表达的突变体中,预期的神经元细胞转化为神经胶质细胞.此外,gcm还调控血浆细胞发育.为了进一步研究gcm在发育中的功能,需要获得gcm蛋白并制备其抗体.根据已报道的gcm基因序列,以果蝇cDNA文库为模板进行PCR扩增得到gcm部分编码区序列,然后将其连接到pET-28a载体以获得原核表达载体.重组载体经酶切测序鉴定确认后,转化大肠杆菌(E.coli)BL21,并用IPTG诱导融合蛋白表达.采用Ni-IDA凝胶柱亲和纯化蛋白,将纯化的His-gcm融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,并用Western Blot检测抗体效价.获得的gcm原核表达重组融合蛋白及高效价的特异性兔抗gcm多克隆抗体,为gcm功能的进一步研究奠定了基础.
- 赵阳彭佩莹王静周英张义唐超任恋彭夕洋陈思行李永青吴秀山
- 关键词：GCM融合蛋白多克隆抗体
- 果蝇唾液腺特异基因CG8419多克隆抗体的制备及检测
- 2011年
- 果蝇CG8419基因与脊椎动物中TRIM45基因为同源基因.以果蝇cDNA为模板通过PCR扩增出亲水性和特异性好的果蝇CG8419基因片段,将其克隆入表达载体PET-28a,构建出重组表达质粒PET-28a-CG8419.将重组质粒转化大肠杆菌Rosetta,经IPTG诱导出带His标签的重组融合蛋白.通过尿素洗涤包涵体并切胶回收纯化融合蛋白,然后再免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体.Western blot实验分别验证抗体的效价和特异性.果蝇胚胎抗体染色显示该基因在果蝇唾液腺中表达.
- 周煌唐雄卓闵璐陈婷芳彭夕洋王琨吴秀山王跃群
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- 中外合作办学视域下的足球教学理念对比研究
- 研究目的:中外合作办学是拓宽人才培养途径、改进人才培养模式的重要方式。从20世纪80年代发展至今,中外合作办学在引进境外优质教育资源、优化人才培养模式以及提升学科水平等方面起到了积极作用。近年来,校园足球的发展成为教育界...
- 周作琼彭夕洋席俊刘花云郑澜汤长发
- 关键词：中外合作办学足球教学理念
- 斑马鱼CFL基因的克隆、多克隆抗体的制备及分析
- 2013年
- 在心脏发育过程中,相关基因的正常表达是有功能心脏形成的关键.斑马鱼CFL基因是从斑马鱼胚胎的cDNA文库中克隆出来的一个心脏发育候选基因.生物信息学分析表明:CFL基因编码278个氨基酸,含有一个CXXC结构域.为进一步研究该基因的功能,采用生物信息学结合RT-PCR的方法获得了该基因.将所得片段插入原核表达载体pET-28a载体中,经测序鉴定正确后转化入Rosetta菌株中,用IPTG诱导表达出pET-28a-CFL融合蛋白,表达的融合蛋白占菌体总蛋白的71%,融合蛋白相对分子质量约为30 kD.经包涵体纯化后,免疫新西兰大白兔制备了多克隆抗体.经验证,具有较好的特异性和较高的效价,可以用作western-blot免疫印迹等实验分析.
- 王盼盼彭夕洋易珍江志刚邓云吴秀山万永奇
- 关键词：融合蛋白多克隆抗体
- 一种视力康复用眼外肌训练装置
- 本发明涉及视力恢复装置领域，具体为一种视力康复用眼外肌训练装置，包括底座、支承柱、遮板、摆动臂、往复摆动驱动组件、细杆、紧固组件、摆动球。本发明所达到的有益效果是：患者站立或坐立在遮板正前方，通过往复摆动驱动组件驱动摆动...
- 郭吟郑澜汤长发彭夕洋
- 文献传递
- 斑马鱼瓣膜高表达基因kbtbd1在心脏瓣膜结构发育中的功能研究
- 已有研究表明,心脏瓣膜的形成受各种调控因子及其信号通路的控制,其调控异常导致瓣膜发育缺损。我们前期从大规模基因表达分析中,筛选出人类KBTBD1 基因是调控人类心脏发育和心脏疾病发生的一个重要候选基因;斑马鱼Kbtdb1...
- 陈发彭夕洋陈圆圆吴燕廖艳伟曹灵慧罗孝宇吴秀山邓云
- 关键词：瓣膜心脏发育
- 一种用于眼部保健的按压装置
- 本发明公开了一种用于眼部保健的按压装置，包括用于眼眶按摩的眼眶按摩机构和用于侧边按摩的侧面按摩机构以及用于为所述眼眶按摩机构提供摇摆力的循环摇摆机构，所述眼眶按摩机构连接在所述循环摇摆机构内侧，所述眼眶按摩机构动力端连接...
- 郭吟郑澜汤长发彭夕洋
- 文献传递
- 一种鱼类恒温游泳训练装置
- 本实用新型公开了鱼类恒温游泳训练装置，包括大水槽、温度检测控制装置以及用于维持大水槽内水温的温度维持装置，温度检测控制装置与温度维持装置连接，以便在大水槽内水温低于训练温度时，温度检测控制装置控制温度维持装置使大水槽内水...
- 彭夕洋周作琼陈章林汤长发郑澜谭军
- 文献传递
- 小鼠LRRC10腺病毒载体构建及其在心肌细胞中的表达
- 2014年
- 目的:构建含有小鼠Lrrc10(Leucine-rich Repeat Containing protein10)基因的重组腺病毒表达载体。方法:设计小鼠Lrrc10特异性引物,以小鼠cDNA为模板,通过PCR扩增出mLrrc10的编码区,并引入HA标签蛋白和SalΙ酶切位点。该片段经凝胶电泳纯化后插入pMD-18T载体。测序后,用SalΙ和Hind III酶切,将目的片段亚克隆至pAd-track-cmv穿梭载体中。用PmeΙ线性化后,用100 ng转化细菌BJ5183,在细菌内同源重组后得到pAd-Lrrc10质粒。pAd-Lrrc10经PacⅠ线性化后用LipofectamineTM 2000转染293A细胞,包装得到含Lrrc10基因的病毒重组子。将病毒重组子在293A细胞中扩增后,反复冻融得到滴度较高的含Lrrc10的病毒液。将收集的病毒液感染心肌细胞,绿色荧光观察GFP、免疫印迹检测Lrrc10-HA蛋白的表达。结果:用病毒液感染原代心肌细胞,24小时后在荧光显微镜下可观察被感染的细胞发出绿色荧光,提取心肌细胞总蛋白,Western可检测到Lrrc10-HA融合蛋白的表达。结论:小鼠Lrrc10腺病毒载体构建成功,并可将编码Lrrc10-HA的目的片段导入心肌细胞中表达。
- 周作琼彭夕洋肖丽娜李佑锋彭浩吴秀山范雄伟李永青
- 关键词：腺病毒载体心肌细胞
- 斑马鱼CXXC5基因通过TNF-α凋亡信号通路调控心脏发育
- 心脏的发育过程伴随着一系列精确的细胞增殖、分化及凋亡过程,其相关基因的调控异常将导致胚胎心脏发育成畸形心脏.CXXC 锌指蛋白5(CXXC5)是CXXC 家族成员,具有物种进化保守的DNA 结合锌指结构域.前人的研究表明...
- 彭夕洋王盼盼王西君易珍邓云吴秀山
- 关键词：斑马鱼SMADSTNF-Α
