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张鑫瑜
作品数:
1
被引量:3
H指数:1
供职机构:
上海交通大学医学院
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发文基金:
上海市自然科学基金
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
刘志学
同济大学生命科学与技术学院
李宁丽
上海交通大学医学院
刘特
同济大学生命科学与技术学院
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作者
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张鑫瑜
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刘特
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李宁丽
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刘志学
传媒
1篇
中国临床医学
年份
1篇
2011
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手足口病病原微生物EV71病毒株的分离与鉴定
被引量:3
2011年
目的:探讨手足口病病原体EV71病毒的分离方法。方法:取手足口病患儿的粪便,经磷酸盐缓冲液(PBS)稀释后用0.22μm滤膜过滤,将悬液接种于Vero细胞。通过EV71病毒致细胞病变效应(CPE)分析、电镜分析、EV71病毒特异性核酸及蛋白的聚合酶链反应(PCR)及Western Blotting分析来鉴定病毒分离和致病效果。检测病毒悬液对于宿主细胞Vero增殖抑制的效果。结果:标本悬液接种Vero细胞48h后出现CPE。收集感染细胞的培养基上清液,连续感染2次,均出现同样的CPE。电镜检测发现在感染组Vero细胞的细胞质和细胞核周围均有大量聚集的病毒颗粒。EV71特异性核酸RT-PCR检测证实,感染组Vero细胞中可以扩增出EV71病毒特异性的核酸条带。Western Blotting检测发现,在感染组细胞中有高表达EV71特异性抗原蛋白,而未感染组细胞不表达该病毒抗原。MTT检测结果显示,EV71病毒显著抑制宿主细胞Vero的体外增殖和生长,并且呈时间依赖性。结论:成功分离出人手足口病致微生物EV71病毒株(该EV71病毒株编号为EV71-Tj-100623)。
张鑫瑜
刘特
刘志学
李宁丽
关键词:
手足口病
EV71病毒
病毒分离鉴定
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