张秀梅
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
- 供职机构：辽宁医学院附属第一医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 阿托伐他汀对ox-LDL诱导的人脐静脉内皮细胞缝隙连接的影响被引量：3
- 2013年
- 目的:研究阿托伐他汀对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)连接蛋白(Connexin)43、Connexin40表达的影响。方法:将体外培养的HUVECs分为对照组、ox-LDL组、阳性对照组和阿托伐他汀组,除对照组外,其余组分别先在培养液、加入50μmol/L庚醇的培养液、加入不同剂量(0.01、0.1、1.0、10μmol/L)阿托伐他汀的培养液中处理30min,再分别加入50mg/L的ox-LDL继续培养24h。采用硝酸还原酶法测定各组NO浓度,免疫细胞化学法测定Connexin43蛋白定位表达,蛋白印迹法检测Connexin43、Connexin40蛋白定量表达。结果:与对照组比较,其余各组NO浓度均明显减少、Connexin43和Connexin40蛋白定量表达均明显增加(P均<0.01),其中除阳性对照组和10μmol/L阿托伐他汀组外,剩余各组均有Connexin43蛋白定位表达。与ox-LDL组比较,阳性对照组NO浓度明显增加、Connexin43和Connexin40蛋白定量表达明显减少(P<0.05或P<0.01),阿托伐他汀组随剂量增加NO浓度逐渐增加、Connexin43和Connexin40蛋白定量表达逐渐减少(P<0.05或P<0.01)。与阳性对照组比较,10μmol/L阿托伐他汀组上述指标均无统计学差异(P>0.05)。结论:阿托伐他汀呈剂量依赖性抑制ox-LDL诱导的HUVECs中Connexin43、Connexin40蛋白的增加,保护内皮间缝隙连接,从而发挥他汀类药物调脂外的抗动脉粥样硬化作用。
- 张秀梅于晓玲申玉超骆振华
- 关键词：阿托伐他汀人脐静脉内皮细胞连接蛋白43连接蛋白40氧化型低密度脂蛋白
- 阿托伐他汀对氯化锂诱导人脐静脉内皮细胞Wnt信号通路相关因子表达的影响被引量：2
- 2013年
- 目的研究探讨阿托伐他汀对诱导人脐静脉内皮细胞Wnt信号通路相关因子表达的影响。方法人脐静脉内皮细胞、传代后取生长良好4～6代用于实验。实验分空白对照组、氯化锂组和阿托伐他汀组。细胞经孵育24h后,用硝酸还原酶法测定细胞培养上清液中的一氧化氮含量,用免疫组化法和蛋白质印迹法检测Wnt1、β-catenin及蓬乱蛋白-1(dvl-1)蛋白的表达。结果与对照组相比,其他两组细胞培养的上清液中一氧化氮含量显著减少,Wnt1、β-catenin及dvl-1蛋白的表达增多;与氯化锂组相比,阿托伐他汀组细胞培养的上清液中一氧化氮含量显著增多,Wnt1、β-catenin及dvl-1蛋白的表达明显减少。结论抑制Wnt/β-catenin信号通路可能是阿托伐他汀抗动脉粥样硬化的机制之一。
- 申玉超于晓玲张秀梅
- 关键词：动脉粥样硬化内皮细胞功能阿托伐他汀人脐静脉内皮细胞WNT信号通路氯化锂
- 靶向DENN-SV基因的shRNA真核表达载体的构建被引量：1
- 2013年
- 该研究根据DENN-SV序列及shRNA设计原则,设计四个靶点序列,退火后用DNA重组技术与pRNAi-U6.1/Neo空载体连接,转化到感受态E.coli中。扩增菌株,抽提质粒,进行酶切、DNA测序鉴定。将重组的真核表达载体转染人乳腺癌MCF-7细胞并使用RT-PCR及Western blot检测其抑制DENN-SV mRNA表达的效率,以MTT法绘制生长曲线。测序结果与设计序列相同,并已成功转染进入人乳腺癌MCF-7细胞,可见GFP(绿色荧光蛋白)表达,且都具有抑制作用(P<0.01),DS-1组的抑制效果最好;MTT法绘制生长曲线结果表明,实验组经该载体转染后细胞增殖程度显著减少(P<0.05)。该研究应用RNAi技术成功构建了小干扰RNA重组体,为进一步研究乳腺癌基因治疗奠定了基础。
- 骆振华李锦成张秀梅冯卓
- 关键词：短发夹RNARNA干扰
