张惠珍
- 作品数：69 被引量：303H指数：10
- 供职机构：上海市免疫学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目上海市高等学校科学技术发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 体外培养中黑色素瘤细胞表面HLAI类分子丢失的鉴定被引量：1
- 1999年
- 应用流式细胞术，从ＨＬＡＡ２阳性人黑色素瘤细胞系（６２４Ｍｅｌ）中选择培养，鉴定出一株丢失ＨＬＡ—Ａ２分子的黑色素瘤细胞（６２４—ｎＭｅｌ），它具有抵抗ＨＬＡＡ２限制的、黑色素瘤抗原肽特异性ＴＩＬ杀伤作用。经ｒＩＦＮγ诱导，能提高６２４－ＭｅｌＨＬＡ－Ａ２分子表达，而不能增强６２４ｎＭｅｌＨＬＡ－Ａ２分子表达和其对ＴＩＬ的敏感性。结果提示，ＴＩＬ对瘤细胞抗原的识别依赖于ＨＬＡⅠ类分子，而瘤细胞ＨＬＡⅠ类分子的缺失可能是肿瘤逃逸机体免疫监视的一个重要因素。
- 葛海良张笑人王树军张惠珍
- 关键词：黑色素瘤流式细胞术肿瘤浸润性
- 大鼠IL—10真核表达载体在软骨细胞中的瞬时表达
- 自身软骨细胞移植用于临床治疗类风湿性关节炎和骨性关节炎已取得良好疗效,组织工程化软骨细胞重塑器官的研究已取得一定进展,但由于自身软骨细胞来源有限,尝试利用同种异体软骨细胞移植,克服机体免疫排斥,是目前急需解决的临床应用的...
- 赵阳柳子星王颖张惠珍王树军葛海良
- 文献传递
- 卵巢癌细胞HLA Ⅰ类分子表达异常和TAP,LMP基因表达的关系被引量：6
- 1999年
- 目的:肿瘤细胞表达MHCⅠ类分子是激发肿瘤抗原特异性CTL进行肿瘤免疫治疗的关键,肿瘤细胞HLAⅠ类分子表达异常是肿瘤逃脱免疫监视的重要机制.我们探讨了卵巢癌细胞HLAⅠ类分子表达异常的分子基础.方法:本文以West-ern blot、免疫组化和流式细胞术检测卵巢癌细胞HLA Ⅰ类分子的表达,以RT-PCR检测TAP,IMP基因的表达,探讨肿瘤细胞HLA Ⅰ类分子表达异常的分子基础.结果:卵巢癌中HLA Ⅰ类分子表达异常相当普遍(5/8),并涉及抗原加工相关基因TAP,LMP基因表达异常.25℃培养肿瘤细胞可部分诱导Ⅰ类分子的表达;结论:卵巢癌HLA Ⅰ类分子表达异常与其Ⅰ类抗原加工途径异常有关.
- 张笑人葛海良张惠珍周光炎蔡晓敏
- 关键词：卵巢肿瘤TAPLMP
- 人卵巢癌SCID小鼠移植瘤模型、细胞系建立及其生物学特性研究被引量：5
- 2001年
- 目的 建立人卵巢癌SCID小鼠移植瘤模型和相应体外细胞系。方法 将病理证实的人卵巢浆液性乳头状腺癌手术切除标本移植于SCID小鼠皮下 ,成瘤后行鼠间传代 ,取移植瘤细胞体外分离培养、传代和建系 ,并应用细胞、分子生物学手段对移植瘤和建系细胞进行一系列生物学特性检测。结果 历时 14个月传至 5代 ,皮下移植瘤存活率为 90 % ,持续 6个月 ,体外建系 (OVA 319)细胞生长稳定。镜下观察组织形态学和超微结构符合原肿瘤组织基本特征 ;染色体分布在 12～ 46条之间 ,多为异倍体 ,显示人类肿瘤异常染色体 ;流式细胞术和RT PCR技术分析原代、体内移植瘤和OVA 319细胞结果一致 ,表现为瘤细胞生长活跃、细胞周期分布相仿 ,MAGE 2基因在mRNA水平异常表达。结论 人卵巢癌SCID小鼠移植瘤模型和OVA
- 葛海良冯荻马安伦张惠珍王颖袁明蔡晓敏
- 关键词：SCID小鼠人卵巢癌移植瘤模型细胞系人类肿瘤生物学特性研究
- 抗CEA单抗-天花粉蛋白偶联物的研制及活性鉴定
- 1993年
- 应用SPDP化学偶联法,将天花粉蛋白通过二硫键交联与抗CEA单抗制备成免疫毒素,经Sepbadex G-150凝胶过滤和Blue Sepharose-4B离子梯度交换层析纯化,电泳鉴定显示这一免疫毒素纯度高,偶联蛋白克分子比合理。应用间接免疫荧光染色技术和ELISA法测定结果证明,其与CEA人结肠癌细胞(LoVo)具有特异结合反应,仍保留大部份原抗体活性。具有较好的导向性。体外毒性试验结果表明,免疫毒素对靶细胞(LoVo)有选择性的杀伤作用,50％细胞毒剂量(I.C50)为10^(-9)范围,比单用天花粉蛋白和天花粉蛋白与正常小鼠IgG-偶联物对靶细胞杀伤能力分别增强约150倍和2000倍,而对实验对照细胞(Hela)杀伤无增强作用。
- 葛海良张惠珍周光炎周光炎
- 关键词：抗CEA单抗天花粉蛋白免疫毒素
- CML抗原肽与HLA—A2分子结合性和稳定性的实验研究
- MHC分子和被递呈的抗原肽之间的相互作用是诱导特异性细胞免疫的重要基础。有实验表明,低亲和力的抗原肽以诱导免疫耐受为主,而高亲和力的抗原肽以诱导免疫应答为主,所以抗原肽与MHC分子之间亲和力的大小往往决定诱导免疫应答的性...
- 王颖尤强张惠珍王树军陈琳琳葛海良
- 文献传递
- 猪软骨细胞同种异体移植的免疫排斥机制被引量：3
- 2005年
- 目的探讨猪软骨细胞同种异体移植的免疫排斥机制。方法分离制备猪软骨细胞和淋巴细胞 ,采用同种异体软骨细胞—淋巴细胞混合培养反应和IFN γ诱导比较分析 ,经3 H TdR法观察淋巴细胞刺激指数 ,FACS测定软骨细胞表面猪白细胞抗原(SLA)分子表达变化 ;不同时间收集混合反应中淋巴细胞 ,分别应用PCR和ELISA技术分析其表达的IFN γ、IL 4mRNA和蛋白含量。结果成功制备了猪的软骨细胞和淋巴细胞 ,软骨细胞表达SLAI类分子 ,而不表达SLAII类分子 ;同种异体软骨细胞对淋巴细胞有轻微刺激扩增作用 ,经IFN γ诱导具有明显增强作用。混合培养 ,18h后上清中可检测到IFN γ蛋白 ,而IL 4表达无变化。结论软骨细胞SLAI类分子刺激同种异体淋巴细胞产生IFN γ,进一步诱导软骨细胞SLAII类分子表达 。
- 张惠珍王树军柳子星李美星王颖张勇陈影葛海良
- 关键词：软骨细胞淋巴细胞IFN-Γ同种异体移植免疫排斥蛋白含量
- 猪FasL基因在猪软骨细胞上的表达和鉴定被引量：2
- 2005年
- 目的: 实现猪Fas配体(FasL)基因在猪软骨细胞中表达和鉴定。方法: 用RT- PCR扩增猪FasL基因片段, 构建重组pGCEN-FasL逆转录病毒载体, 并转染PA317细胞。经G418筛选获得高滴度的病毒液, 感染猪软骨细胞, 应用FACS和Westernblot检测软骨细胞上FasL的表达。结果: 经酶切分析、测序证明, 成功地构建pGCEN- FasL逆转录病毒载体。转染的软骨细胞表面FasL的表达率为 57%。Westernblot显示, 在Mr为 37 000处有 1条特异性蛋白带, 具有诱导Fas+细胞凋亡的作用。结论: 成功地构建重组猪FasL基因的逆转录病毒载体, 并在转染的软骨细胞上高表达具有生物学活性的FasL, 为建立同种异体软骨细胞移植的免疫耐受提供了实验依据。
- 王树军王颖张惠珍金姝沈天伟葛瑜葛海良
- 关键词：软骨细胞FASL基因逆转录病毒载体
- 肿瘤抗原基因OVA66对肿瘤细胞生物学特征的影响被引量：10
- 2006年
- 目的:探讨肿瘤抗原基因OVA66对肿瘤细胞生物学特征的影响。方法:采用脂质体法,以重组真核表达载体pcDNA3.1-OVA66转染肝癌细胞系SMMC-7721,经G418稳定筛选、克隆及扩增,采用RT-PCR、Westernblot和免疫细胞化学(ICC)染色法,检测目的基因及其蛋白的表达。用FACS检测细胞周期的变化;电镜技术观察细胞的超微结构;体外运动、侵袭实验检测细胞运动及侵袭能力;并应用基因芯片技术检测相关基因的差异表达。结果:RT-PCR检测显示,转染pcDNA3.1-OVA66的细胞中OVA66基因呈高表达。Westernblot显示,在OVA66蛋白处出现明显的条带。电镜和FACS检测表明,该基因可增强肿瘤细胞的增殖能力。体外运动、侵袭实验证实,该基因可促进肿瘤细胞的迁移、侵袭。基因芯片显示,该基因的高表达可促进Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)等基因的表达,影响肿瘤的侵袭和转移。结论:OVA66基因及其蛋白可促进肿瘤细胞的增殖、侵袭、转移等一系列生物学功能。
- 李美星王树军王颖张惠珍尤强周光炎葛海良
- 关键词：OVA66肿瘤相关基因基因芯片
- 牡蛎提取物抗肿瘤作用的实验研究被引量：61
- 1997年
- 以每天0.2ml(20mg)剂量的牡蛎提取物连续10d胃饲荷HAC鼠肝癌的Balb/c小鼠,发现宿主因荷瘤而下降的免疫指标明显回升,包括总T细胞数,T辅助细胞百分比,丝裂原诱发的淋巴细胞转化强度,和NK细胞的杀伤活性。瘤重亦较对照组明显减轻(P<0.01),宿主成活期延长。用相同剂量的牡蛎提取物胃饲长有人结肠癌的裸鼠共15d,发现肿瘤体积明显减少为对照的44.6％,(P<0.01)。结果提示牡蛎提取物可能通过增强宿主免疫功能,特别是其中天然杀伤细胞活性而抑制肿瘤生长。
- 王颖马安伦张惠珍薛宝华赵振军傅方浩周光炎
- 关键词：牡蛎提取物抗肿瘤作用
