张巧霞
- 作品数：7 被引量：3H指数：1
- 供职机构：北京大学深圳医院更多>>
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- 小鼠雄激素受体真核表达载体的构建与鉴定被引量：1
- 2012年
- 目的:克隆小鼠雄激素受体(androgen receptor,AR)基因的cDNA,构建AR真核表达载体,并在睾丸支持细胞TM4中进行表达和鉴定。方法:应用RT-PCR法从小鼠睾丸中扩增AR,将测序正确的PCR产物克隆至pcDNA3.1(-)真核表达载体中,再将载体以脂质体方式转染至TM4细胞系中,通过G418筛选稳定转染AR的TM4细胞株,以RT-PCR法和Western blotting法检测转染前后AR在TM4细胞系中的表达情况。结果:RT-PCR法和Western blotting法检测的结果显示,转染pcDNA3.1(-)/AR质粒的细胞中AR基因的表达水平显著高于转染pcDNA3.1(-)质粒的对照组。结论:成功构建了小鼠AR真核表达载体pcDNA3.1(-)/AR和稳定转染的TM4细胞系,为进一步研究AR在睾丸支持细胞中的作用及其分子机制建立了细胞模型。
- 张晓燕卢苇张巧霞张振明朱伟杰桂耀庭
- 关键词：稳定转染
- 雄激素及其受体在精子发生过程中的作用及其分子机制
- 的临床与实验研究资料表明，雄激素及其受体(Androgen receptor，AR)在精子发生过程中具有非常重要的作用。为了筛选睾丸支持细胞AR直接调控的靶基因，本实验室采用数字化表达谱测序技术(Digital gene...
- 桂耀庭牟丽莎张巧霞王亚东张强蔡志明
- 关键词：精子发生睾丸支持细胞雄激素受体
- 雄激素受体对Ube2b基因表达的调节作用及其分子机制
- 背景:睾丸支持细胞中的雄激素受体(Androgen Receptor,AR)在精子发生过程中具有非常重要的作用,其分子机理尚未明了.本课题组前期实验发现了泛素结合酶2b(Ubiquitin-conjugating enz...
- 牟丽莎张巧霞王亚东张强蔡志明桂耀庭
- 5α-还原酶Ⅱ在附睾细胞系PC1和DC2中的表达特征被引量：1
- 2011年
- 目的:阐明5α-还原酶II(SRD5AII)在附睾上皮细胞系PC1和DC2中的表达特征。方法:应用实时荧光定量PCR法和免疫荧光法,检测附睾上皮细胞系PC1和DC2中SRD5AIImRNA的表达水平和蛋白定位。结果:附睾上皮细胞系PC1和DC2内均有SRD5AIImRNA表达,且在DC2中表达较PC1中高。SRD5AII蛋白主要定位于胞质内。结论:附睾上皮细胞系PC1和DC2内有SRD5AIImRNA和蛋白表达,提示其可能参与附睾中精子成熟的调节。
- 卢苇张晓燕张巧霞张振明郭广武桂耀庭朱伟杰
- 关键词：附睾细胞系
- 基因敲除技术在睾丸功能研究中的应用被引量：1
- 2010年
- 基因敲除（gene knock．out）是基因打靶的一种方法，是根据DNA同源重组的原理而设计的一项技术。通过DNA分子的同源重组，特异性地在基因组的某个位点引入预定的突变，进而获得基因型发生了改变的基因打靶小鼠，以研究目的基因的体内功能或相关疾病的致病机制。睾丸的主要功能是产生精子和分泌睾酮，在睾丸发育过程中，任何基因的突变或者是酶、蛋白质的缺失都会对睾丸的正常功能造成一定的影响，导致雄激素浓度、精子数目、精子形态、精子活动力等指标异常，进而影响男性的生育能力。近年来，在国内外的研究中，
- 王朝亮唐爱发张巧霞蔡志明
- 关键词：基因敲除技术睾丸功能基因打靶精子数目DNA分子精子活动力
- 雄激素受体对Hsf1基因表达的调节作用及其分子机制
- 背景:睾丸支持细胞的雄激素受体(Androgen Receptor,AR)在精子发生过程中具有非常重要的作用,其分子机理尚未明了.本课题组前期实验发现了热休克转录因子1(Heat shock transcription ...
- 王亚东牟丽莎张巧霞张强蔡志明桂耀庭叶炯贤
- 小鼠雄激素受体真核表达载体的构建及稳定转染TM4细胞系的建立与鉴定
- 2012年
- 目的构建小鼠雄激素受体（androgenreceptor，AR）基因真核表达载体，转染TM4细胞，建立稳定转染AR的TM4细胞系。方法应用RT．PCR方法从小鼠睾丸中扩增AR，将测序正确的PCR产物克隆至pcDNA3．1（-）真核表达载体中，将载体以脂质体方式转染至TM4细胞，通过G418筛选稳定转染AR的TM4细胞株，以RT．PCR和Westem-blot检测AR在转染前后TM4细胞中的表达情况。结果成功构建了pcDNA3．1（-）Ag表达质粒，建立了稳定转染的TM4细胞系。RT-PCR和Western-blot检测结果表明，AR基因在该细胞系中成功表达。结论AR真核表达载体成功构建和稳定转染TM4细胞系的建立为进一步体外研究AR的功能奠定了基础。
- 张晓燕张巧霞桂耀庭刘彦慧
- 关键词：转染精子发生
