张小艳
- 作品数：8 被引量：17H指数：2
- 供职机构：河北医科大学第二医院更多>>
- 发文基金：河北省卫生厅医学科学研究重点课题河北省自然科学基金更多>>
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- 洛铂诱导胆管癌RBE细胞凋亡及其对B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白、B细胞淋巴瘤/白血病-2、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3/半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-8和细胞色素C凋亡相关因子影响被引量：1
- 2014年
- 目的 观察洛铂对胆管癌RBE细胞抗肿瘤作用及B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白（bax）、B细胞淋巴瘤/白血病-2（bcl-2）、actived-半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3、Caspase-8和细胞色素C（Cyt-C）转录及表达的影响.方法 不同浓度洛铂干预胆管癌RBE细胞一定时间,噻唑蓝（MTT）比色法检测RBE细胞的生长抑制,流式细胞法检测细胞周期,膜联蛋白V（Annexin V）/碘化丙锭（PI）双染检测凋亡率,Western blot及实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）检测bax、bcl-2、actived-Caspase-3、Caspase-8、Cyt-C蛋白及mRNA表达的变化.结果 MTT结果显示随浓度升高及时间延长,药物对细胞增殖抑制作用增强（P＜0.05）,24 h的半数抑制剂量（IC50）值为11.82 mg/L.随药物浓度增加G0/G1期与G2/M期细胞增加,S期细胞比例减少（P＜0.05）.Annexin V-异硫氰酸荧光素（FITC）/PI检测显示洛铂能诱导RBE细胞凋亡,与对照组比较有更高的凋亡率（Pp＜0.05）.Western blot及Real-time PCR检测结果显示bax、actived-Caspase-3、Caspase-8和胞质内Cyt-C转录和表达升高,bcl-2转录水平降低.结论 洛铂对胆管癌RBE细胞的增殖具有明显的抑制作用,其可能通过增加bax、抑制bcl-2的转录和表达,释放Cyt-C激活Caspase-8、Caspase-3诱导RBE细胞凋亡.
- 王天阳刘三光王文斌张小艳刘建华
- 关键词：胆管癌洛铂凋亡细胞色素C
- 去甲斑蝥素诱导胆管癌细胞凋亡及对bax、bcl-2、半胱天冬酶3和细胞色素C凋亡相关因子影响被引量：2
- 2013年
- 目的研究去甲斑螫素对人胆管癌细胞株RBE细胞抗肿瘤作用及bax、bcl-2、活化半胱天冬酶3和细胞色素C转录及表达的影响,探讨其作用机制。方法体外培养胆管癌RBE细胞,在不同浓度去甲斑蝥素中干预一定的时间,5-二苯基四氮唑溴盐[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT]比色法检测去甲斑蝥素对胆管癌RBE细胞抑制作用,膜联蛋白/碘化丙啶(annexinV/PI)双染检测凋亡率,免疫印迹及实时定量聚合酶链反应检测bax、bcl-2、活化半胱天冬酶3、细胞色素C蛋白及mRNA表达的变化。结果胆管癌RBE细胞经不同浓度的去甲斑蝥素作用后增殖明显受到抑制。AnnexinV-FITC/PI检测显示去甲斑蝥素能诱导RBE细胞凋亡,与对照组相比有更高的凋亡率,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫印迹及实时定量聚合酶链反应检测显示bax、活化半胱天冬酶3和胞浆内细胞色素C转录和表达升高,bcl-2转录水平降低。结论去甲斑蝥素对胆管癌RBE细胞的增殖具有明显的抑制作用,其可能通过增加bax、抑制bcl-2的转录和表达,释放细胞色素C激活半胱天冬酶3诱导RBE细胞凋亡。
- 王天阳吕海涛李猛张小艳刘建华
- 关键词：胆管肿瘤斑蝥素细胞凋亡
- 白藜芦醇通过下调SIX1抑制人白血病HL-60细胞增殖和诱导细胞凋亡被引量：2
- 2022年
- 目的:探讨白藜芦醇(resveratrol,RSV)对人白血病HL-60细胞增殖的影响及其机制。方法:CCK-8法检测RSV对HL-60细胞增殖的影响。碘化丙啶(propidium iodide,PI)单染流式细胞术检测RSV对HL-60细胞周期分布的影响;Annexin V-FITC/PI双染法观察RSV对HL-60细胞凋亡的影响。Western blot检测HL-60细胞中的细胞周期素D1(CyclinD1)、凋亡相关蛋白p53和p21、SIX1、酪氨酸蛋白激酶Ⅱα(CK2α)蛋白的表达水平,以及过表达SIX1后给予RSV处理对HL-60细胞中CyclinD1、p53、p21表达水平的影响。结果:(1)CCK-8实验结果显示,不同浓度的RSV(12.5μmol/L、25.0μmol/L、50.0μmol/L、100.0μmol/L)处理不同时间(24 h、48 h、72 h),HL-60细胞的存活率随着RSV作用浓度的增加和作用时间的延长逐渐降低(P<0.01)。(2)流式细胞术检测结果显示,与对照组相比,RSV处理后HL-60细胞凋亡增加(P<0.05),亚G;期细胞增多(P<0.05),G;/M期细胞减少(P<0.05)。(3)Western blot结果表明,与对照组相比,RSV作用HL-60细胞后,细胞周期蛋白CyclinD1水平降低(P<0.05),凋亡相关的p53、p21蛋白水平升高(P<0.05)。(4)与对照组相比,RSV处理后的HL-60细胞中SIX1和CK2α蛋白的表达水平降低(P<0.01),且过表达SIX1后抵消了RSV对HL-60细胞中CyclinD1、p53、p21的作用。结论:RSV可能通过下调SIX1抑制HL-60细胞增殖、诱导其凋亡。
- 李丽媛张小艳聂子元
- 关键词：白藜芦醇白血病HL-60细胞细胞增殖细胞凋亡
- 抑制SIX1表达对急性髓系白血病耐药细胞HL-60/ADR的影响被引量：1
- 2023年
- 目的:建立抑制同源盒基因1(SIX1)表达的HL-60细胞及耐阿霉素的HL-60细胞(HL-60/ADR),研究抑制SIX1对HL-60及HL-60/ADR细胞耐药作用的影响。方法:用慢病毒感染HL-60及HL-60/ADR细胞,经嘌呤霉素筛选获得稳定抑制SIX1表达的细胞株。采用CCK-8法检测各组细胞的增殖能力,流式细胞凋亡试剂盒检测细胞凋亡情况,实时定量PCR检测耐药相关基因的表达水平。结果:成功构建了抑制SIX1表达的HL-60及HL-60/ADR稳定转染细胞株。与对照组相比较,抑制SIX1的表达使HL-60及HL-60/ADR细胞的增殖明显受抑制(P<0.05),细胞的凋亡率显著增加(P<0.05),并且抑制SIX1表达后细胞对阿霉素的敏感性升高。结论:抑制SIX1的表达可以提高细胞对阿霉素的敏感性,其逆转耐药性的作用可能与促进细胞凋亡基因的表达有关。
- 李丽媛聂子元张小艳罗建民杨琳王茜
- 关键词：急性髓系白血病耐药细胞耐药性
- 去甲斑蝥素对胆管癌RBE细胞α-Tubulin骨架蛋白及细胞周期的影响被引量：6
- 2013年
- 目的观察去甲斑蝥素对人胆管癌RBE细胞周期的影响及对微管蛋白(α-Tubulin)的作用。方法体外培养胆管癌RBE细胞,分别用不同剂量去甲斑蝥素处理,流式细胞学检测细胞周期的影响,免疫组化染色法观察α-Tubulin结构变化,Real-time PCR检测α-Tubulin mRNA转录水平变化。结果流式细胞学检测显示胆管癌RBE细胞随着药物浓度的增加,G2/M期阻滞作用增强,10、20、40μg/ml组与对照组相比具有统计学意义(P=0.000,P<0.01)。免疫组化染色法观察到去甲斑蝥素作用下,胆管癌RBE细胞α-Tubulin骨架结构被破坏,Real-time PCR证实去甲斑蝥素使胆管癌RBE细胞α-Tubulin转录水平减少,差异具有统计学差异(P=0.002,P=0.000,P<0.01)。结论去甲斑蝥素可以通过破坏胆管癌RBE细胞Tubulin骨架、抑制α-Tubulin mRNA的表达,阻止纺锤体的形成,将细胞周期阻滞在G2/M期,导致生长抑制,是其抗肿瘤机制之一。
- 王天阳王文斌边伟张小艳刘建华王凤安
- 关键词：细胞周期微管蛋白去甲斑蝥素
- 去甲斑蝥素对胆管癌RBE细胞组织化学及超微结构的影响
- 2015年
- 目的 观察去甲斑蝥素对人胆管癌RBE细胞组织化学及超微结构的影响,探讨去甲斑蝥素对胆管癌细胞作用机制.方法 体外培养胆管癌RBE细胞,采用不同5-40 mg/L去甲斑蝥素处理,吖啶橙/溴化乙锭（AO/EB）染色统计RBE细胞凋亡率,并观察形态学变化,扫描电镜观察去甲斑蝥素影响下胆管癌RBE细胞表面超微结构的变化,透射电镜观察细胞内超微结构的变化.结果 应用AO/EB荧光染色观察,随去甲斑蝥素剂量加大,胆管癌RBE细胞凋亡率升高,40 mg/L作用24 h后凋亡细胞占（83.1±15.6）％.光镜和扫描电镜下形态学呈现典型的凋亡变化,可见凋亡小体的形成.透射电镜可以观察到细胞核呈新月状改变.结论 去甲斑蝥素可以引起胆管癌RBE细胞显微和超微结构改变,这些改变可能与细胞凋亡和侵袭力改变等变化密切相关.
- 边伟王天阳李秋生张小艳辛清旺刘三光
- 关键词：胆管癌去甲斑蝥素形态学
- 干扰PKM2对急性白血病细胞增殖和凋亡的影响及分子机制被引量：2
- 2021年
- 目的:探讨糖酵解酶丙酮酸激酶M2型(PKM2)对人白血病细胞HL-60增殖和凋亡的影响及其分子机制。方法:以干扰PKM2的质粒转染HL-60细胞株(si-PKM2组),同时将转染空载体的HL-60细胞设为对照组(si-Ctl组)。采用RT-q PCR和Western blot技术分别检测si-Ctl组和si-PKM2组PKM2 m RNA和蛋白水平的变化;CCK-8检测两组细胞的增殖能力;采用流式细胞术检测两组细胞周期和凋亡的变化;Western blot和RT-q PCR技术检测两组细胞中PI3K/Akt/m TOR信号通路的变化及糖酵解相关基因的表达变化,并检测两组细胞中葡萄糖消耗和乳酸生成的变化情况。过表达PKM2的细胞给予PI3K抑制剂LY294002或给予半乳糖培养后检测细胞的增殖能力、周期和凋亡的变化以及葡萄糖消耗和乳酸生成的变化。结果:干扰PKM2表达后,si-PKM2组中PKM2的m RNA (t=45.21,P<0.001)和蛋白水平(t=13.56,P<0.01)显著降低,si-PKM2组的细胞增殖能力较对照组明显下降(F=253.59,P<0.05),敲低PKM2后细胞被显著阻滞于G_1期,且明显诱导了细胞的凋亡(t=56.38,P<0.05)。与对照组相比,si-PKM2组p-Akt和p-m TOR水平显著降低(t=50.23、13.51,P<0.01),葡萄糖消耗和乳酸生成显著下降(t=23.16、15.20,P<0.05)。补救实验结果显示,过表达PKM2给予PI3K抑制剂LY294002后减弱了其诱导的葡萄糖消耗和乳酸的产生(t=45.13、26.35,P<0.05),半乳糖培养过表达PKM2的HL-60细胞对细胞增殖能力(t=16.52,P>0.05)、周期及凋亡无显著影响(t=48.63,P>0.05)。结论:敲低PKM2可以抑制白血病HL-60细胞的增殖并诱导其凋亡,其分子机制可能与PKM2介导的PI3K/Akt/mTOR糖酵解轴抑制有关,提示PKM2可能作为白血病防治的一个分子靶点。
- 李丽媛聂子元张小艳罗建民杨琳王茜王兴哲
- 关键词：白血病细胞糖酵解细胞增殖
- BAG-1在大肠癌中的表达及其临床意义被引量：5
- 2012年
- 目的探讨Bag-1基因在大肠癌组织和正常大肠组织中的表达变化以及与淋巴结转移之间的关系和临床意义。方法联合采用Western blot和RT-PCR方法分别检测经手术切除的55例大肠癌组织标本中Bag-1的表达,另取25例正常大肠粘膜组织为对照组。结果 (1)55例大肠癌均检测到不同程度的Bag-1蛋白表达,相对强度为(5～109,64.09±31.59),Bag-1在有淋巴结转移的大肠癌组织中蛋白相对强度(30.34～109,81.05±19.64)高于无淋巴结转移的大肠癌组织中蛋白相对强度(5～70.13,26.19±16.32)(P<0.001),但两者均明显高于正常大肠黏膜Bag-1蛋白相对强度(0～10,4.28±2.82)(P<0.001)。(2)55例大肠癌组织中Bag-1mRNA表达量相对值为(0.33～1.21,0.74±0.26);在有淋巴结转移的大肠癌组织中表达量相对值(0.52～1.21,0.87±0.21)高于无淋巴结转移的大肠癌组织中表达量相对值(0.33～0.65,0.45±0.09)(P<0.001),但两者也均明显高于正常大肠黏膜组织(0～0.22,0.10±0.06)(P<0.001)。结论 Bag-1高表达对大肠癌的发生、发展起重要作用,Bag-1表达水平与大肠癌的淋巴结转移有关,可作为预测大肠癌转移潜能的生物学指标,检测Bag-1表达水平可能有助于患者预后的判断。
- 杨光华赵晶李磊王天阳张小艳吕春秀王凤安
- 关键词：BAG-1大肠癌RT-PCRWESTERNBLOT
