张卉
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
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- 一种基于VPA诱导的人骨髓间充质干细胞体外分化肝细胞的方法
- 本发明公开了一种新的基于VPA诱导的人骨髓间充质干细胞体外分化肝细胞的方法，是以人的骨髓为原料，分离其间充质干细胞，在组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸VPA处理后，依次加入成纤维细胞生长因子4、肝细胞生长因子、抑瘤素和地塞米...
- 董学君邵健忠项黎新张卉杨超
- 文献传递
- 改良人骨髓间充质干细胞分离方法提高细胞定向分化能力被引量：6
- 2010年
- 目的改良人骨髓间充质干细胞(hBM-MSCs)分离方法,提高细胞定向分化能力。方法用密度梯度离心法从少量人骨髓中分离得到单个核细胞,贴壁培养3天后换液,实验组换液后72h内每隔12h更换新鲜培养液,传代时胰蛋白酶37℃作用2min后终止消化;对照组未经频繁换液,胰蛋白酶消化3min。镜下观察分离细胞的形态变化。用成骨、脂肪和软骨细胞诱导液诱导两组第3代(P3)细胞分化,碱性磷酸酶钙钴染色法、茜素红染色法和VonKossa银染色法检测成骨细胞分化;油红O染色法检测脂肪细胞分化;阿尔新蓝染色法检测软骨细胞分化。结果首次换液72h后,实验组与对照组相比,贴壁细胞数量较少但形态均一性高。不同染色结果显示:诱导分化成骨细胞14天时,实验组95%以上细胞分化,对照组为60%～70%;诱导分化脂肪细胞21天时,实验组50%～60%细胞分化,对照组为40%;诱导分化软骨细胞21天时,实验组90%以上细胞分化,对照组为60%～70%。结论首次换液72h内频繁更换新鲜培养液和传代时缩短胰蛋白酶消化时间的方法能够提高hBM-MSCs的定向分化能力。
- 张卉董学君邵健忠项黎新
- 关键词：人骨髓间充质干细胞成骨细胞脂肪细胞软骨细胞
- 损伤肝组织条件培养液诱导成体干细胞分化肝细胞关键因子鉴定及因子组合诱导体系建立
- 董学君邵健忠张国荣项黎新陈烨潘若浪王勋英钟永根张卉
- 一、简要技术说明及主要技术性能指标：1、简要技术说明：本研究制备小鼠肝损伤模型，获得肝脏损伤条件培养液，诱导mBM-MSCs向肝细胞分化。检测AFP、CK19、CK18、ALB和TAT等基因的表达，验证已分化为肝细胞。应...
- 关键词：
- 关键词：条件培养液干细胞分化肝细胞基因表达
- 骨髓干细胞跨越分化肝细胞的重要诱导因子鉴定
- 董学君邵健忠张国荣项黎新潘若浪张卉钟永根
- 一、简要技术说明及主要技术性能指标：1、简要技术说明：本研究采用全骨髓贴壁培养法分离到小鼠mBM-MSCs，并通过流式细胞术鉴定这些细胞表面分子标记加以确证。制备小鼠肝损伤模型，获得肝脏损伤条件培养液，用以诱导mBM-M...
- 关键词：
- 关键词：肝细胞
- HGF和FGF4在诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞分化中的作用被引量：2
- 2009年
- 目的评估肝细胞生长因子(HGF)和成纤维细胞生长因子4(FGF4)在诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞分化中的作用。方法CCl4经腹腔注射复制小鼠肝损伤模型,48h后处死小鼠取肝组织,分离肝脏组织制备肝损伤条件培养液进行培养。以正常小鼠肝组织制备的培养液作为对照组。ELISA法测定培养0、1.5、3、6、12、24、48h后肝组织培养液中的HGF和FGF4含量。用肝损伤条件培养液培养骨髓间充质干细胞,分别加入HGF抗体和(或)FGF4抗体,以封闭培养液中的HGF和(或)FGF4因子,未添加细胞因子抗体的培养液作为对照组;ELISA法检测肝细胞特异性白蛋白(ALB)水平,免疫荧光法检测细胞内ALB、甲胎蛋白(AFP)、细胞角蛋白19(CK19)的表达,评价骨髓间充质干细胞向肝细胞的分化状况。结果与对照组比较,肝损伤小鼠肝细胞培养液中HGF和FGF4表达量均升高(P<0.05);在培养3h时HGF、FGF4上升达峰值,随后下降;FGF4在培养12h达低谷后再次升高。抑制HGF和(或)FGF4第14天后,ELISA和荧光标记染色法检测均显示ALB表达下降,与对照组比较差异显著(P<0.05);荧光标记染色显示封闭后AFP及CK-19表达均有下降(P<0.05)。结论HGF、FGF4是诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的重要因子,且可能有其他因子参与诱导肝细胞的定向分化。
- 孙荷董学君张卉张国荣邵健忠项黎新
- 关键词：骨髓肝细胞肝细胞生长因子细胞分化
