崔让庄
- 作品数：103 被引量：229H指数：7
- 供职机构：天津市胸科医院更多>>
- 发文基金：天津市卫生局科技基金天津市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Ad-VEGF_(121)和Ad-VEGF_(165)重组腺病毒的构建和制备被引量：2
- 2008年
- 目的:以pAdEasy-1缺陷性腺病毒系统为载体构建用于实验动物模型基因治疗的Ad-VEGF121和Ad-VEGF165重组腺病毒。方法:采用RT-PCR方法从人心肌组织中扩增获得VEGF121、VEGF165cDNA片段,分别插入pUCm-T载体构成pUC-VEGFs;限制性内切酶SalⅠ、KpnⅠ切下目的基因片段,插入pAdTrack-CMV载体相应的多克隆位点构成pAdTrack-CMV-VEGFs。电转法将被PmeⅠ切成线性的pAdTrack-CMV-VEGFs转入E coli BJ5183,与其中的pAdEasy-1同源重组成pAdEasy-VEGFs。阳离子脂质体法将被PacⅠ线性化的重组子转染293T细胞进行腺病毒包装。转染后7～11d可在荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋白(GFP)呈彗星状,收集细胞反复冻融获得含重组腺病毒的上清液。感染293T细胞3～4次,待细胞出现细胞病变效应(CPE)时收获腺病毒(Ad-VEGFs),并用CsCl密度梯度超速离心进行纯化。结果:重组腺病毒在电镜下呈多面体,形态完整;Ad-VEGF121和Ad-VEGF165病毒滴度分别达到1.155×1012和1.281 5×1012 V.P/mL。结论:利用pAdEasy-1缺陷性腺病毒系统构建携带目的基因的重组腺病毒方法较简便,易掌握。获得的重组腺病毒纯度高、滴度高,适用于实验动物模型和体外培养细胞的基因治疗。
- 毛用敏李汇赵莉莉宋衍秋崔让庄
- 关键词：血管内皮生长因子类腺病毒科质粒
- 携带人金属蛋白酶组织抑制剂1重组腺病毒的构建及在人脐静脉内皮细胞中的表达被引量：2
- 2013年
- 目的构建携带人金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP1)的重组腺病毒AdV-hTIMP1,感染体外培养的人脐静脉内皮细胞CRL-1730,观察其mRNA表达情况。方法应用AdEasy复制缺陷型腺病毒载体系统在大肠埃希菌BJ5183中通过同源重组构建Ad-hTIMP1和对照Ad-Track。阳离子脂质体法将重组腺病毒转染到人胚胎肾细胞(HEK293T)中进行包装和扩增。纯化后PCR鉴定hTIMP1目的基因,OD260法测定滴度,透射电镜观察腺病毒形态。将人脐静脉内皮细胞CRL-1730分为3组,空白对照组、Track对照组和TIMP1实验组,感染48h后收集细胞,半定量PCR(RT-PCR)法检测内皮细胞中TIMP1mRNA的表达情况。结果重组腺病毒Ad-hTIMP1的滴度为1.9×1012v.p/mL。其感染人脐静脉内皮细胞CRL-1730后,实验组TIMP1mR-NA的表达明显升高(P<0.05)。结论成功构建了携带hTIMP1基因的重组腺病毒Ad-hTIMP1,成功感染了体外培养的人脐静脉内皮细胞CRL-1730,使细胞中hTIMP1过表达,为心血管疾病的基因治疗提供平台。
- 李汇毛用敏赵莉莉崔让庄王佩显
- 关键词：金属蛋白酶组织抑制剂1基因治疗
- 重组腺病毒Ad-hBNP的构建及其在CHF大鼠中的分布与表达
- 2012年
- 目的构建重组腺病毒Ad-hBNP,观察其在CHF大鼠体内的分布与表达,为腺病毒介导BNP治疗慢性心力衰竭奠定实验基础。方法 RT-PCR法从人心肌组织获得hBNP片段,应用AdEasy腺病毒载体系统,构建Ad-hBNP;CHF成模大鼠24只,随机分为4组,18只单次腹腔注射Ad-hBNP后,均分为1、4和7 d组;余不予Ad-hBNP,为0点组。实验动物于相应时间处死,ELISA检测血清hBNP水平,免疫组化检测各脏器hBNP表达,RT-PCR检测各组织hBNP mRNA表达。结果成功构建用于实验性基因治疗的Ad-hBNP,纯化后滴度达到4.4×1012VP/mL。透射电镜观察Ad-hBNP呈多面体结构,颗粒直径在90 nm左右。单次腹腔注射Ad-hBNP,CHF大鼠心脏、肝脏、肺脏、肾脏、脾脏及小肠均检测到hBNP表达,外源hBNP在CHF大鼠体内的表达至少可持续7天。结论腺病毒介导的外源hBNP基因可在CHF大鼠多脏器中得到有效表达,其生物学效应时间显著长于BNP的生物半衰期。
- 宋衍秋赵莉莉毛用敏赵鸿铭徐美林崔让庄
- 关键词：B型利钠肽腺病毒基因治疗
- 介绍一种新的简便易行的杂交方法
- 1999年
- 程津新毛用敏崔让庄陈倩朱天慧
- 关键词：分子生物学核酸类杂交方法基因诊断
- Gs蛋白α-亚基基因T393C多态性与原发性高血压病的关系被引量：1
- 2007年
- 目的:分析Gs蛋白α-亚基(guanine nucleotide-binding protein,α-stimulating activity polypeptide 1,GNAS1)基因T393C多态性与中国天津地区原发性高血压病的关系。方法:按年龄配对的原发性高血压患者(高血压组)和非原发性高血压患者(对照组)各151例入选本研究。PCR-限制性片段长度多态性法分析GNAS1基因T393C多态性的频率分布。结果:研究样本的基因型频率和等位基因频率符合哈迪-温伯格平衡(Hardy-Weinberg equilibrium)。T393C多态性等位基因频率和基因型频率在高血压组和对照组间差异无统计学意义(χ2分别为2.576和2.664,P>0.05)。结论:GNAS1基因T393C多态性与中国天津地区原发性高血压病无关。
- 尚跃丰毛用敏崔让庄王佩显
- 关键词：高血压基因型等位基因LOGISTIC模型
- 血清瘦素水平与冠心病危险因素关系的研究被引量：1
- 2009年
- 瘦素（Leptin）是肥胖基因编码的一种蛋白质产物，主要由白色脂肪组织分泌，其主要功能是调节机体脂肪的沉积，影响机体代谢。研究发现冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病）患者血清瘦素水平异常，提示瘦素可能参与冠心病病理生理过程。冠心病又是多因素疾病，其危险因素包括高龄、血脂异常、高血压、糖尿病和肥胖等。本研究旨在探讨冠心病患者血清瘦素水平与冠心病及其危险因素的相关性。
- 宋衍秋赵莉莉毛用敏王佩显崔让庄
- 关键词：冠状动脉疾病瘦素血清病例对照研究
- 肺癌患者血清细胞生长因子及受体联合检测的临床研究
- 周静敏马淑萍秦建文史东升卢金玲杨桂铭邵宝生林红英赵勇崔让庄张金铭
- 该课题检测对照组血清VEGF正常值，同时收集肺癌组病例临床资料及血清标本，共有103例资料完整的肺癌病人入选，分批进行血清标本的实验工作，在原有课题内容的基础上增加了EGFR、PDGF两相内容，以期更好的分析多个生长因子...
- 关键词：
- 关键词：血管内皮生长因子表皮生长因子受体血小板衍生生长因子肺癌
- 单核细胞趋化蛋白-1基因多态性与冠状动脉介入治疗后再狭窄的相关性研究被引量：2
- 2008年
- 目的探讨单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）启动子区-2518A／G基因多态性与冠状动脉（冠脉）粥样硬化病变进程及经皮冠脉腔内成形术（PCI）后再狭窄的相关性。方法对276例接受PCI并进行冠脉造影随访的患者，采用PCR—RFLP方法进行MCP-1—2518A／G多态性检测；按冠脉造影结果分为再狭窄组（113例）和无再狭窄组（163例），判定冠脉血管病变及再狭窄与MCP-1—2518A／G多态性的相关性。结果MCP-1—2518A／G基因型频率为：AA纯合子21．0％，GG纯合子34．1％，AG杂合子44．9％，3种基因型血管病变支数和血管平均狭窄程度，差异均无统计学意义（P〉0．05）。再狭窄组中AA、AG和GG基因型频率分别为23．9％、40．7％和35．4％，无再狭窄组分别为19．0％、47．9％和33．1％，差异无统计学意义（P=0．446）。再狭窄组中-2518A和G等位基因频率分别为44．2％和55．8％，无再狭窄组分别为42．9％和57．1％，差异无统计学意义（P=0．761）。结论冠脉粥样硬化进程及PCI术后再狭窄可能与MCP-1—2518A／G基因多态性无相关性。
- 高静崔让庄刘寅陈倩魏民新赵福梅李玉茜郑君毅刘婷
- 关键词：冠状动脉疾病单核细胞趋化蛋白-1再狭窄
- 冠心病病人血浆纤溶成分与血脂水平评价被引量：2
- 1999年
- 探讨冠心病（ＣＨＤ）患者血浆组织型纤溶酶原激活剂（ｔ－ＰＡ）、纤溶酶原激活剂抑制剂（ＰＡＩ）、交联纤维蛋白二聚体（Ｄ－ｄｉｍｅｒ）及脂蛋白（ａ）［ Ｌｐ（ａ）］等血浆水平变化、临床应用价值以及其相互间的关系。方法： ｔ－ＰＡ、ＰＡＩ、ＬＰ［ａ］、Ｄ－ｄｉｍｅｒ采用ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法检测，胆固醇、甘油三酯采用酶法测定。结果：４７例ＣＨＤ ，患者血浆ｔ－ＰＡ－ＰＡＩ及Ｄ－ｄｉｍｅｒ测值为（９．７±５．７）、（８０．５±３０．０）、（２０９±１２５）ｎｇ ／ｍｌ，其中ｔ－ＰＡ，和Ｄ－ｄｉｍｅｒ值明显高于健康对照组（Ｐ＜０．００１），ＰＡＩ含量两组水平差别不明显（Ｐ＞０．０５）．血浆ＬＰ（ａ）、ＴＧ及ＨＤＬ浓度两组间差别有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。用准确性评价各项指标临床应用价值，以Ｄ－ｄｉｍｅｒ为最佳，Ｌｐ（ａ）次之。血浆ｔ－ＰＡ与Ｌｐ（ａ）及ＴＧ含量呈正相关。ＰＡＩ与血浆ＴＧ呈正相关，和ＨＤＬ呈负相关。结论：ｔ－ＰＡ、Ｄ－ｄｉｍｅｒ、ＬＰ（ａ）与粥样斑块及血栓形成有密切关系。
- 程津新崔让庄毛用敏陈倩赵燕行
- 关键词：冠心病血浆纤溶酶原激活剂血脂
- 载脂蛋白A-I基因启动子区域G→A置换对血浆HDL水平的影响被引量：1
- 1999年
- 采用ＰＣＲ扩增法和限制性片段长度多态性分析法，对１１５例正常人和１１８例冠心病患者的载脂蛋白Ａ－Ｉ基因启动子区域－７８ｂｐ位点腺嘌呤与鸟嘌呤置换进行检测，并观察此位点基因变异对血浆ＨＤＬ－ｃｈ和ａｐｏＡ－Ｉ含量的影响。结果显示，血浆 ＨＤＬ－ｃｈ和 ａｐｏＡ－Ｉ含量在三种基因型中无显著性差异（Ｐ＞０．０５），基因型在正常 ＨＤＬ－ｃｈ和低ＨＤＬ－ｃｈ水平中的分布差异亦无显著性（Ｐ＞０．０５）。结论：ａｐｏＡ－Ｉ基因启动子部位－７８ｂｐ位点基因变异不影响血浆ＨＤＬ含量，Ａ等位基因与升高的ＨＤＬ水平无相关性。
- 毛用敏崔让庄程津新陈倩赵燕行朱天慧
- 关键词：载脂蛋白A-I等位基因RFLPHDL
