尹峰
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 供职机构：湖南农业大学生物科学技术学院更多>>
- 发文基金：湖南省自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
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- 油菜iMyAP基因在植物防御反应中的功能研究
- 黑芥子酶协助蛋白(Myrosinase-associated protein)作为十字花科植物中特有硫苷－黑芥子酶系统(Glucosinolate-Myrosinase system)中的重要的一员,与黑芥子酶以及黑芥子...
- 尹峰
- 文献传递
- iMyAP基因过表达载体转化甘蓝型油菜被引量：1
- 2010年
- 本研究以甘蓝型油菜湘油15号叶片cDNA为模版,克隆油菜黑芥子酶协助蛋白iMyAP基因全长CDS,目的片段序列和GenBank上报道的甘蓝型油菜序列iMyAP12-Y10156同源性达到100%。将得到的iMyAP基因片段与pMD19-T载体连接,命名为T-1152。用BamHⅠ和XbaⅠ双酶切T-1152和pHB载体,回收片段经T4DNA连接酶连接得到iMyAP基因过表达载体pHB-1152。通过农杆菌介导将pHB-1152转化至甘蓝型油菜湘油15号,PCR鉴定显示成功获得2株转基因植株。本实验为进一步研究iMyAP基因的功能奠定了良好的基础。
- 尹峰胡燕彭琦张伟阮颖刘春林
- 关键词：转基因植株
- AtTPS03基因RNA干扰载体的构建及拟南芥转化被引量：4
- 2009年
- 本研究以拟南芥DNA为模板,将罗勒烯合成酶AtTPS03基因的一个目的片段克隆到T-载体上。对克隆片段测序后,进行Blast比对,结果目的片段的序列与GenBank上报道的序列同源性达到100%。根据RNA干扰的基本原理,将目的片段正反向连到干扰载体pFGC5941查尔酮内含子的两侧,经限制性酶切和PCR扩增检测,证明已成功构建了干扰载体P-2AT03。利用农杆菌介导的浸花法转化拟南芥。收获的种子在含草丁膦的培养基上筛选抗性苗,通过对抗性苗的PCR检测,已成功获得了12株转基因苗。这些转基因苗为进一步研究罗勒烯和罗勒烯合成酶的功能奠定了良好基础。
- 杜培粉伍林涛姚远颋尹峰阮颖刘春林
- 关键词：RNA干扰拟南芥转化
- 甘蓝型油菜iMyAP9、iMyAP12基因过表达载体的构建及转化拟南芥被引量：1
- 2012年
- 诱导型黑芥子酶协助蛋白(iMyAP)往往与黑芥子酶和黑芥子酶结合蛋白一起以复合体的形式存在,对植物的防御系统有着重要的作用。为了研究黑芥子酶协助蛋白在植物响应非生物胁迫方面的功能,通过以pBI121为载体,分别构建了CaMV35S::iMyAP9和CaMV35S::iMyAP12,浸花法转化拟南芥,用卡那霉素对转化植株进行筛选,并对抗性苗进行PCR检测,初步得到67株转基因植株;提取转基因拟南芥中RNA进行RT-PCR表达分析。结果表明,iMyAP9基因和iMyAP12基因在随机挑选的转基因拟南芥中获得了有效的表达。拟南芥转基因植株的获得为进一步探讨iMyAP9基因、iMyAP12基因的生物学功能奠定了基础。
- 张伟尹峰何雯魏然刘春林阮颖
- 关键词：油菜转基因拟南芥
- 甘蓝型油菜含MATH结构域基因BnMT-1干扰载体的构建及遗传转化被引量：2
- 2010年
- 本研究以甘蓝型油菜湘油15种子不同发育时期抑制差减文库为研究对象,设计特异性引物扩增得到一个与油脂代谢相关,含MATH结构域的基因片段,长度为327bp,命名为BnMT-1。根据RNA干扰的基本原理,将目的片段正反向插入到表达载体pFGC5941.nap查尔酮内含子两侧,经限制性内切酶酶切和质粒PCR扩增检测,证明已成功构建了干扰载体PP-MT。采用根癌农杆菌法将PP-MT干扰载体转入甘蓝型油菜中,对转化植株基因组DNA的PCR检测表明,干扰载体已转入到甘蓝型油菜中,共获得了两株转基因植株。这为进一步研究BnMT-1基因在甘蓝型油菜中的功能打下了基础。
- 胡燕彭琦尹峰刘武阮颖刘春林
- 关键词：甘蓝型油菜RNA干扰载体
