- 人端粒酶逆转录酶干扰增强肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体诱导肝癌细胞凋亡的机制
- 2007年
- 目的探讨人端粒酶逆转录酶（hTERT）干扰增加肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（TRAIL）诱导肝癌HepG2和SMMC7721细胞凋亡的分子机制。方法采用膜联蛋白V／碘化丙锭染色的流式细胞术方法检测细胞凋亡；采用Western blot方法检测凋亡相关蛋白Procaspase-8、-9、-3及Bax、Bcl-2和hTERT表达；采用端粒重复扩增法和端粒数量和长度测定法检测端粒酶活性和端粒长度。结果hTERT干扰显著增加TRAIL诱导的肝癌细胞凋亡。100ng／ml TRAIL作用24h后，HepG2细胞凋亡率由5．53％增加至10．35％；SMMC 7721细胞凋亡率由14．73％增加至77．24％。hTERT干扰明显增加Procaspase-8、-9和Bcl-2表达，显著降低Bax表达，明显促进TRAIL作用后Procaspase-8、-9、-3活化，并且hTERT干扰后端粒酶活性显著降低，端粒长度明显缩短，然而对照细胞与未转染细胞相比各指标均无明显变化。结论hTERT干扰明显增加TRAIL诱导的肝癌细胞凋亡，其机制可能与Procaspase-8、-9表达增加，端粒酶活性降低和端粒长度缩短有关，而与Bcl-2和Bax表达无关。
- 张汝钢房殿春宁晓燕王国安
- 关键词：细胞凋亡RNA干扰逆转录酶
- hPOT1 RNA干扰可抑制其在胃癌细胞的表达
- 目的观察人端粒保护蛋白hPOT1（human protection of telomeres 1）RNA干扰对胃癌细胞hPOT1表达的影响。方法构建表达hPOT1的RNA干扰真核表达载体,利用脂质体方法转入人胃癌细胞BG...
- 宁晓燕房殿春杨仕明汪荣泉彭贵勇陈文生
- 文献传递
- 人端粒酶逆转录酶干扰提高TRAIL诱导胃癌细胞凋亡的机制研究
- 目的探讨人端粒酶逆转录酶(hTERT)干扰提高肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)诱导胃癌 SGc 7901细胞凋亡的分子机制。方法采用膜联蛋白 V/碘化丙锭(Annexin V/PI)染色和吖啶橙 /溴化乙锭(...
- 张汝钢房殿春郭丽萍宁晓燕杨仕明汪荣泉彭贵勇陈文生
- 文献传递
- 人端粒保护蛋白反义核酸抑制SGC7901胃癌细胞增殖被引量：1
- 2006年
- 目的研究人端粒保护蛋白(human protection 0f telomeres,hPOTl)对胃癌细胞生长增殖的作用。方法利用本课题组先前所构建的hPOTl正、反义核酸真核表达载体,转染SGC7901胃癌细胞,G418筛选阳性克隆,用Western印迹法、MTT法、流式细胞仪、透射电镜等技术观察基因转染后SGC7901细胞hPOTl蛋白的表达、细胞生长曲线、细胞周期、细胞凋亡及细胞形态学的变化。结果转染了hPOTl反义核酸真核表达载体(pcDNA-as—hPOTl)的SGC7901胃癌细胞hPOTl表达降低,生长减慢,阻滞于G2/M期,细胞凋亡增加。结论hPOTl反义核酸真核表达载体能显著抑制hPOTl蛋白的表达,hPOTl蛋白可能参与胃癌细胞的周期调控,并与细胞的生长增殖有关。
- 帖君房殿春宁晓燕郭丽萍
- 关键词：人端粒保护蛋白反义核酸胃癌细胞细胞增殖
- 人端粒酶逆转录酶干扰提高TRAIL诱导胃癌细胞凋亡的机制研究
- 目的探讨人端粒酶逆转录酶（hTERT）干扰提高肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（TRAIL）诱导胃癌SGc 7901细胞凋亡的分子机制。方法采用膜联蛋白V/碘化丙锭（Annexin V/PI）染色和吖啶橙/溴化乙锭（AO/...
- 张汝钢房殿春郭丽萍宁晓燕
- 文献传递
- hPOT1 RNA干扰对人胃癌BGC823细胞端粒长度和hTERT表达的影响
- 目的通过RNA干扰技术,抑制人胃癌细胞BGC823中人端粒保护蛋白（human protection of telomeres 1,hPOT1）的表达,观察细胞端粒长度和人端粒酶催化亚单位（human telomeras...
- 宁晓燕房殿春贴君程永波张汝钢杨仕明汪荣泉彭贵勇陈文生
- 文献传递
- hPOT1 RNA干扰对人胃癌BGC823细胞突变型p53表达的影响被引量：1
- 2008年
- 目的通过RNA干扰技术抑制人胃癌细胞BGC823中人端粒保护蛋白(human protection of telomeres 1,hPOT1)的表达,观察hPOT1 RNA干扰对胃癌BGC823细胞突变型p53基因转录水平的影响。方法从hPOT1编码区外显子8的区域选取一段19个碱基的序列gtactagaagcctatctca为RNA干扰靶向序列,构建hPOT1的RNA干扰真核表达载体,转入体外培养的低分化人胃癌细胞BGC823,提取细胞总RNA,半定量RT-PCR检测hPOT1和突变型p53基因mRNA表达水平的改变,验证hPOT1 RNA干扰载体的基因沉默效率,了解抑制hPOT1表达后突变型p53基因mRNA水平的改变。结果经DNA测序鉴定,hPOT1 RNA干扰载体包含干扰序列的插入片段,插入位置正确。经半定量RT-PCR鉴定,RNA干扰组细胞的hPOT1 mRNA表达水平明显下调,基因沉默效率在70%左右;突变型p53表达下调。结论通过RNA干扰技术抑制人胃癌细胞BGC823中hPOT1表达后,突变型p53表达下调,提示hPOT1与突变型p53之间有一定的相关性。
- 宁晓燕房殿春郭丽萍李宜成帖君杨仕明汪荣泉彭贵勇陈文生
- 关键词：人端粒保护蛋白人胃癌细胞RNA干扰突变型P53
- 载体介导的siRNA对SGC-7901胃癌细胞中hPOT1表达的抑制作用
- 2005年
- 目的构建人端粒保护蛋白(hPOT1)基因的短链干扰核糖核酸(siRNA)表达载体,观察其在胃癌细胞中抑制hPOT1基因表达的作用,为进一步研究hPOT1在胃癌细胞生长增殖中的作用打下基础。方法设计并化学合成64nt编码hPOT1siRNA基因片段的寡核苷酸,退火成双链后将其连接到pSUPER质粒的H1RNA启动子下游,构建psiRNAhPOT1重组质粒。经酶切、测序鉴定后,用脂质体介导的基因转染方法,转入SGC7901胃癌细胞,用半定量RTPCR检测hPOT1表达水平的变化。结果测序结果表明重组质粒psiRNAhPOT164个碱基成功插入到预定位置,并且序列完全一致。hPOT1siRNA表达载体psiRNAhPOT1转入胃癌细胞后,可明显抑制SGC7901细胞hPOT1的表达。结论构建的hPOT1基因的siRNA表达载体psiRNAhPOT1重组质粒能显著抑制hPOT1基因在SGC7901胃癌细胞中的表达。
- 帖君房殿春宁晓燕
- 关键词：人端粒保护蛋白RNA干扰胃癌细胞
- hPOT1 RNA干扰对人胃癌BGC823细胞突变型p53表达的影响
- 目的观察人端粒保护蛋白（human protection of telomeres 1,hPOT1）RNA干扰对胃癌BGC823细胞突变型p53基因转录水平的影响。方法采用半定量RT-PCR方法检测突变型p53基因mRN...
- 宁晓燕房殿春郭丽萍李宜成帖君杨仕明汪荣泉彭贵勇陈文生
- 文献传递
- 人端粒保护蛋白在胃癌中的异常表达及其临床意义被引量：5
- 2006年
- 目的探讨人端粒保护蛋白(humanprotectionoftelomeres,hPOT1)在胃癌中的异常表达及其临床意义。方法用SP免疫组化方法检测hPOT1在57例胃癌标本中的表达,同时以10例正常胃黏膜标本做对照。结果57例胃癌标本的表达全阳性,阳性率100%,显著高于正常胃黏膜hPOTl的表达(40%)。浸润至或超过浆膜层的胃癌hPOT1表达强度显著高于未达浆膜层者,Ⅲ/Ⅳ期胃癌明显高于Ⅰ/Ⅱ期胃癌,低分化胃癌高于高分化胃癌(P<0.05)。结论hPOT1在胃癌组织中表达异常增高,提示hPOT1与胃癌的发生、发展有密切的关系,检测hPOT1的表达可能会有助于胃癌的早期诊断和预后。
- 帖君房殿春宁晓燕罗元辉
- 关键词：人端粒保护蛋白蛋白表达免疫组织化学胃癌
