目的:筛选人重组S100A8蛋白特异性的适配体。方法:采用配体指数级富集系统进化(systematic evolu-tion of ligand by exponential enrichment,SELEX)技术,以人重组S100A8蛋白为靶蛋白,以微孔板为筛选介质,从体外合成的随机单链DNA文库中筛选其适配体。利用生物素-链霉亲和素-辣根过氧化物酶系统检测每轮单链DNA文库与靶蛋白的亲和力直至亲和力的上升趋于饱和,将最后一轮筛选产物克隆测序,并进行生物信息学分析。结果:经过11轮筛选,单链DNA文库与人重组S100A8蛋白的亲和力趋向稳定,将第11轮筛选产物克隆测序,对获得的30个适配体进行分析。一级结构分析显示30个适配体并无共同的保守序列,但有3对适配体序列完全一致。二级结构预测分析表明,茎环和口袋结构为主要的结构形式,提示其可能是适配体与人重组S100A8蛋白特异性结合的基础。根据茎环和口袋的相对比例可将30个适配体分为4组,其中第1组中35号适配体与人重组S100A8蛋白亲和力最高。结论:获得了与人重组S100A8蛋白特异性结合的适配体群,为后续适配体的应用研究以及S100A8蛋白功能的研究奠定了基础。
目的：研究侵袭性牙周炎（AgP）患者及其亲属白细胞介素-1（interleukin-1，IL-1）基因多态性与AgP易感性的关系。方法：收集66个核心家系共180名成员，进行全口牙周检查、摄全口根尖片并拍摄口内彩色照片，AgP先证者的诊断参照1999年牙周病分类法，其亲属的诊断参照1999年牙周病分类法和现状与回顾性相结合的评分标准作出评估诊断。提取研究对象外周静脉血基因组DNA，应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性的方法，分析IL-1A＋4845，IL-1B-511位点的单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms，SNP）及IL-1RN第二内含子中的可变数目重复序列（variable number tandem repeats，VNTR）的多态性，采用多因素Logistic回归模型进行各组之间基因型／等位基因分布差异的比较，同时还采用以家系为基础的关联检验的方法（family-based association test）进行关联分析。结果：未发现，IL-1基因各位点等位基因／基因型在AgP先证者与其亲属之间、以及亲属各组之间的分布差异有统计学意义（P〉0．05）。以家系为基础的关联检验表明，IL-1B-511和，IL-1A＋4845等位基因1在加性、显性及隐性3种遗传模型检验中，P值均大于0．05，即未发现见IL-1基因各位点的多态性与AgP存在具有统计学意义的关联。但是，当把所有AgP患者按照全口牙槽骨吸收特点进行亚型分型并经Logistic回归模型调整了年龄、性别和吸烟状况后发现，在IL-1B-511位点，以局限型破坏为主的AgP患者A1A1基因型的频率比非AgP患者显著升高（43．8％vs22．8％，OR=7．32，95％C／=1．84～29．11，P=0．005），等位基因A1的分布差异也有统计学意义（71．9％vs41．2％，OR=3．64，95％C／=1．55～8．58，P=0．002）；而广泛型AgP患者与非AgP患者两组之间差异无统计学意义（基因型A1A1：P=0．88，等位基因A1：P=0．64）。结论：IL-1B-511位点的S
