孙秀萍 作品数:10 被引量:17 H指数:3 供职机构: 吉林大学畜牧兽医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 吉林省科技发展计划基金 吉林省世行贷款农产品质量安全项目 更多>> 相关领域: 农业科学 自动化与计算机技术 医药卫生 更多>>
一种水泡性口炎病毒抗体胶体金检测试纸条及其制备方法 本发明提供一种水泡性口炎病毒抗体胶体金检测试纸条,它包含硝酸纤维素膜及其两端的金标垫和吸收垫,金标垫上端为样品垫,金标垫包被有VSV-G基因胶体金偶联标记物,检测线包被有纯化的VSV抗原,质控线包被有兔抗VSV抗体,质控... 王丽 陈克研 高丰 宋德光 贺文琦 陆慧君 张巍 孙晨 孙秀萍 苏高莉文献传递 水泡性口炎病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立 被引量:3 2012年 为建立方便快捷的水泡性口炎病毒(VSV)检测方法,本研究以抗VSV单克隆抗体(MAb)为捕获抗体,兔抗VSV多克隆抗体为检测抗体,建立VSV双抗体夹心ELISA检测方法。结果显示,该方法的最佳工作条件为:抗VSV MAb 1A2的包被浓度为3.09μg/mL,兔抗VSV多克隆抗体和酶标抗体的工作浓度分别为5.16μg/mL和1∶5 000,以OD450nm≥0.231作为阳性判定标准。该ELISA方法对猪水泡病病毒、猪水疱疹病毒及羊传染性脓疱病毒等均无交叉反应;敏感度可达3.125μg/mL(101TCID50);其重复性变异系数小于10%。采用建立的ELISA方法与RT-PCR方法同时检测187份临床样品,符合率达到97.9%,具有良好的相关性。本实验建立的VSV双抗体夹心ELISA检测方法具有特异性好、敏感性高、成本低及方便快捷等优点,可以用于VSV的快速检测。 孙秀萍 宋晗星 苏高莉 周平 何叶 王丽 潘伟 丁宁 包英夫 孙晨 宋德光关键词:水泡性口炎病毒 双抗体夹心ELISA 单克隆抗体 图书馆馆藏特色数据库开发 随着现代信息技术在图书馆的应用,图书馆事业面临着新的挑战和发展机遇。图书馆希望充分发挥其独具的、富有地方特色的馆藏资源优势,将文献数字化进程和拥有版权的电子资源结合起来,建设具有权威性、可用性的专题特色数据库,并利用计算... 孙秀萍关键词:数字图书馆 特色数据库 元数据 网络资源 文献传递 滴鼻途径感染猪血凝性脑脊髓炎病毒小鼠的免疫动态变化 被引量:3 2012年 应用石蜡切片、ELISA等方法,通过对小鼠脾脏病理组织学观察以及脾脏指数、IL-2、IFN-γ和TNF-α等重要细胞因子的检测,研究猪血凝性脑脊髓炎病毒(Hemagglutinating encephalomyelitis virus,HEV)感染不同周龄(4、6周龄)BALB/c小鼠后的免疫动态变化特点。结果显示,无论是4周龄还是6周龄小鼠,在被HEV感染后的1~3d,脾小体生发中心增大并在红髓有多量浆细胞出现,第4天脾小体开始缩小,其周边和中央动脉周围有多量淋巴细胞聚集,到第5天脾小体生发中心消失并在其周边和中央动脉周围淋巴细胞增多。另外,脾脏指数和血清中的TNF-α、IFN-γ、IL-4浓度均呈现先升高后降低的趋势,IL-2含量变化不明显,而IL-10含量较少几乎检测不到。结果表明,HEV感染初期,小鼠对侵入的病毒做出一定的免疫应答,但是随着病毒复制,病毒量的增大,小鼠的免疫反应受到抑制。同时不同周龄小鼠的被检指标降低或升高程度及持续时间不同,表明HEV的免疫、发病与小鼠感染年龄之间存在一定相关性。 何叶 周平 苏高莉 孙秀萍 刘立卓 潘伟 兰云刚 高丰 贺文琦 靳朝关键词:HEV 小鼠 水泡性口炎病毒G蛋白受体的筛选及初步鉴定 水泡性口炎(Vesicular stomatitis,VS)是由水泡性口炎病毒(Vesicu1arstomatitis virus,VSV)引起的一类高度接触性的人畜共患传染病,其临床症状与口蹄疫、猪水泡病及猪水疱疹病等... 孙秀萍关键词:水泡性口炎病毒 酵母双杂交系统 CDNA文库 文献传递 基于二维图像的计算机三维建模方法研究 三维重建在计算机视觉中占有很重要的地位,是目前比较热门的一个研究方向,广泛应用在如文物恢复、医学图像处理、仪器制造等许多领域。而传统三维建模方法有许多局限性和复杂性,本文提出了一种通过双目摄像机摄取在同一场景下的两幅图像... 孙秀萍关键词:结构光 特征提取 文献传递 一起麻鸡鸡痘病毒与巴氏杆菌混合感染病例的诊断 2012年 为了对2011年10月长春市某鸡场的150多只60日龄麻鸡发生急性死亡,病死鸡在临床上出现食欲不振、精神委靡,鸡冠以及背部皮肤有结节状痘疹以及排黄绿色稀粪等临床症状的疾病进行确诊,通过细菌学检查、病毒分离鉴定、动物回归试验以及病理组织学观察等方法从病原学和病理学角度进行了系统的分析。病死鸡肝触片可见有典型的两极浓染的短杆菌;应用鸡痘病毒4b核心蛋白基因特异性引物的扩增结果为阳性;将痘疹病料处理上清液经尿囊绒毛膜途径接种9日龄SPF鸡胚,接种后第7天可见尿囊膜上形成有灰白色突起的痘斑;皮肤痘疹研磨处理上清液经电镜负染观察可见典型的痘病毒粒子。病理组织学观察结果表明,局部肝细胞发生变性、坏死,并伴有多量的异嗜性粒细胞浸润。根据上述实验室检测结果并结合临床症状进行综合分析,确诊该起病例为鸡痘病毒与巴氏杆菌混合感染所致。 周平 何叶 孙秀萍 苏高莉 丁宁 王丽 包英夫 潘伟 解胜男 赵魁 高丰关键词:麻鸡 鸡痘病毒 巴氏杆菌 病原学 病理学 水泡性口炎病毒单克隆抗体的制备与鉴定 被引量:1 2012年 将水泡性口炎病毒(VSV)经差速离心和蔗糖密度梯度离心法进行纯化后,以纯化的VSV作为免疫原免疫8~10周龄雌性BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经间接ELISA方法筛选能稳定分泌抗VSV单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并对制备出的抗VSV单抗的特异性、抗体亚类等生物学特性进行鉴定。结果显示,试验成功筛选出2株能稳定分泌抗VSV单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1A2、4C3。ELISA鉴定结果表明,2株单抗均能特异性地与VSV结合,而与口蹄疫病毒(FMDV)、猪水泡病病毒(SVDV)均不发生交叉反应;诱生小鼠腹水产生的抗体效价可达1∶25 600~1∶51 200。杂交瘤细胞染色体核型鉴定结果显示,杂交瘤细胞染色体数为95~105,均高于2个亲本细胞的染色体数目,说明这2株细胞是两者的杂交产物。抗体亚类鉴定结果显示,所获得2株单抗1A2、4C3均为IgG1。Western blot分析结果表明,1A2可识别VSV G蛋白。2株抗VSV单克隆抗体的成功制备将为VSV快速检测方法的建立以及检测试剂的研制等奠定基础。 孙晨 王丽 孙秀萍 苏高莉 潘伟 赵魁 宋德光关键词:水泡性口炎病毒 单克隆抗体 酶联免疫吸附试验 水泡性口炎病毒糖蛋白主要抗原决定区片段基因的原核表达和纯化 被引量:1 2011年 参照GenBank中水泡性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus,VSV)G蛋白基因的核苷酸序列,设计合成1对特异性引物,采用RT-PCR方法扩增约为810bp的G基因片段,并将其克隆到pGEX-4T-1表达载体上,将经PCR、酶切鉴定以及测序分析正确的阳性重组质粒命名为PGEX-G810,之后将其转化至表达菌株E.coli BL21(DE3),经IPTG进行诱导表达;表达产物经SDS-PAGE、Western blotting等方法进行检测。SDS-PAGE结果表明,重组蛋白主要以包涵体形式存在,相对分子质量约为60 000;包涵体经变性、复性、Glutathione Sepharose 4B亲和层析纯化后,分离得到复性的融合蛋白。纯化的融合蛋白能与VSV阳性血清发生特异性免疫反应,证明表达的目的蛋白具有良好的抗原性。 张巍 王丽 孙晨 孙秀萍 苏高莉 赵魁 陈克研 宋德光关键词:水泡性口炎病毒 G基因 原核表达 羊口疮病毒农安分离株的分离鉴定及Orf059(F1L)基因的序列分析 被引量:7 2013年 利用初生胎羊鼻甲骨(Primary ovine fetal turbinate,OFTu)细胞从送检的疑似"口疮"症状的病羊唇部痂皮中分离获得1株病毒,用PCR检测、电镜负染观察及理化性质测定等方法对该分离株病毒进行鉴定,证实该分离株为羊传染性脓疱病毒(Orf virus,ORFV),命名为(Orf virus Jilin-Nongan,ORFV JL-NA株)。对ORFV JL-NA分离株Orf059(F1L)基因进行克隆、测序并对测序结果进行序列分析。结果显示,获得的ORFV JL-NA分离株Orf059(F1L)基因序列长为994bp,编码329个氨基酸,与ORFV-D1701株、ORFV-Jilin株、ORFV-NZ2株、ORFV-20株、ORFV-7株、ORFV-C2株、ORFV-IA82株、ORFV-SA00株、ORFV-mi90株、ORFV-torino株、ORFV-Shanxi株核苷酸序列同源性分别为96.4%、97.3%、99.1%、98.7%、99.0%、97.5%、98.4%、97.2%、97.4%、96.9%和96.8%。遗传进化树结果显示,ORFV JL-NA分离株与意大利ORFV-7毒株的亲缘关系较近,表明不同地区分离株的Orf059(F1L)基因差异不大。 苏高莉 赵魁 孙秀萍 何叶 周平 潘伟 包英夫 李吉达 宋德光 高丰关键词:羊传染性脓疱病毒