孙永亮
- 作品数：6 被引量：20H指数：3
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- 表面图案化二氧化硅空心微球的制备方法
- 一种表面图案化二氧化硅空心微球的制备方法，包括制备混合表面活性剂、配制合成模板油相、制备乳化液、制备水相、制备共聚微凝胶、制备溶胀的共聚微凝胶、制备四乙氧基正硅烷和正庚烷的混合液、制备表面图案化二氧化硅高分子复合微球、制...
- 胡道道杨菊香房喻白超良沈淑坤宋少飞孙永亮
- 文献传递
- 金属螯合亲和色谱填料的制备及其在六聚组氨酸融合蛋白分离中的应用
- 近年来，随着基因工程技术的发展，分离纯化基因重组蛋白的下游技术越来越显示出其重要性。从成分复杂的表达体系中分离纯化目的蛋白是一项艰巨而繁重的任务。目前基于分子的尺寸、形状、电荷、分子量、吸附等性质的差异进行蛋白质分离的方...
- 孙永亮
- 关键词：标记蛋白分离纯化
- 文献传递
- 金属螯合亲和层析介质用于六聚组氨酸融合蛋白的纯化研究被引量：13
- 2007年
- 以Sepharose CL-6B为载体,环氧氯丙烷为活化剂,羧甲基天冬氨酸(CM-Asp)为螯合配基制备载有Co2+的金属螯合亲和层析介质Co-CM-Asp-Sepharose,并将其用于六聚组氨酸融合蛋白的纯化研究。对纯化200μL细胞裂解液中靶蛋白所需Co-CM-Asp-Sepharose介质用量,Co-CM-Asp-Sepharose与细胞裂解液的孵育时间,介质清洗条件及靶蛋白洗脱时所需咪唑浓度等进行了优化。比较了Co-CM-Asp-Sepharose与Ni-NTA-Agarose(Qiagen公司)两种螯合介质对融合蛋白的纯化效果,开展了从5mL细胞裂解液中放大规模纯化融合蛋白的研究,并通过Bradford法测定了Co-CM-Asp-Sepharose对CD155D1蛋白的纯化量。结果表明:对200μL细胞裂解液纯化体系,Co-CM-Asp-Sepharose(50%悬浮液)的优选体积为60μL,最佳孵育时间为30min,洗脱液最佳咪唑浓度为200mmol/L,纯化得到融合蛋白的量约为200μg。介质用量放大为1.5mL(50%悬浮液)对CD155D1蛋白的纯化量可达4.6mg。与商品化Ni-NTA-Agarose相比,本介质具有选择性好,清洗条件简单,得到的靶蛋白纯度高等优点。
- 李淑娟孙永亮胡道道陈超崔亚丽
- 关键词：CO^2+金属螯合亲和层析纯化
- 表面图案化二氧化硅空心微球的制备方法
- 一种表面图案化二氧化硅空心微球的制备方法，包括制备混合表面活性剂、配制合成模板油相、制备乳化液、制备水相、制备共聚微凝胶、制备溶胀的共聚微凝胶、制备四乙氧基正硅烷和正庚烷的混合液、制备表面图案化二氧化硅高分子复合微球、制...
- 胡道道杨菊香房喻白超良沈淑坤宋少飞孙永亮
- 文献传递
- 查苏利奇与俄国社会主义运动
- 薇拉·查苏利奇是俄国著名的女革命家,被称为俄国“第一个女马克思主义者”。她既是俄国马克思主义的先驱之一,是最初组成劳动解放社的五名成员之一,也是19世纪末20世纪初著名的《火星报》的编辑之一。青年时期,她因为特列波夫枪击...
- 孙永亮
- 关键词：孟什维克
- 文献传递
- 纯化组氨酸标签蛋白金属螯合亲和色谱填料的制备与性能被引量：6
- 2007年
- 以琼脂糖(agarose)凝胶的珠状产品SepharoseCl-6B为基质,以环氧氯丙烷为活化剂,将天冬氨酸固定在琼脂糖凝胶微球上,在经与溴乙酸修饰后,最终得到含有羧甲基天冬氨酸结构的琼脂糖凝胶微球.以凝胶微球负载的多羧基为配体分别与Co2+及Ni2+配位分别得到两种金属螯合亲和层析介质.依照上述方法制备了具有不同负载羧基含量的色谱介质.以六聚组氨酸融合蛋白为分离样品,研究了所制备的色谱分离介质的分离纯化性能,并与商品化色谱分离介质Agarose-NTA-Ni进行了比较.结果表明,目标介质蛋白结合容量大,与蛋白结合快、易洗脱、选择性高,金属离子不易脱落.
- 孙永亮李淑娟胡道道崔亚丽陈超杨菊香沈淑坤
- 关键词：纯化
