孔令君
- 作品数：20 被引量：138H指数：7
- 供职机构：北京协和医院更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学理学更多>>
- 2008至2011年美国CAP病毒培养室间质量评价及结果分析被引量：1
- 2013年
- 传统病毒细胞培养及鉴定技术因为花费大、操作繁琐、周期长且实验室技术要求高，一般临床实验室较少开展。但是，病毒培养技术仍然是临床实验室高水平的标志，其结果许多情况下仍被视为“金标准”[1]。病毒培养特异度是100％，虽然敏感度低于100％，但2009年的甲型流感病毒大流行，病毒培养敏感度远高于POCT等免疫学方法[2]。
- 崔京涛倪安平吴叶丽孔令君严文娟李倩
- 关键词：病毒培养CAP甲型流感病毒
- 自身免疫病和非自身免疫病患者巨细胞病毒抗原血症检测及抗病毒治疗后复检观察被引量：6
- 2012年
- 目的分析自身免疫病和非自身免疫病患者巨细胞病毒（CMV）抗原血症检测及抗病毒治疗后复检结果。方法回顾性分析2008年5月至2012年2月北京协和医院门诊及住院疑似CMV感染的5325例患者的6471份外周血CMVpp65抗原检测资料。外周血白细胞内CMVpp65抗原检测采用Brite试剂盒和间接免疫荧光法，阳性定义为CMV活动性感染。结果CMVpp65抗原血症阳性共948份，阳性率为14．6％（948／6471）。13种自身免疫病患者CMV抗原血症平均阳性率为34．9％（670／1922），其中系统性红斑狼疮高达52．4％（551／1052）；与CMV感染可能相关的12种非自身免疫病患者CMV抗原血症平均阳性率仅为6．1％（144／2367），但其中呼吸衰竭或急性肾衰竭、获得性免疫缺陷综合征（AIDS）和肾移植术后3个高危病种的CMV抗原血症平均阳性率为17．3％（27／156）。CMV抗原血症阳性经抗病毒治疗后进行1次及以上复查的患者共189例，64例（33．9％）阴转。结论自身免疫病患者已取代AIDS和肾移植术后等传统免疫抑制患者，成为CMV活动性感染的高危人群；抗病毒治疗后复检CMV抗原血症阴转率较低。
- 崔京涛倪安平吴叶丽孔令君严文娟李倩窦亚玲陈兰兰
- 关键词：巨细胞病毒自身免疫疾病抗原血症
- 低危人群梅毒螺旋体抗体初筛试验结果分析及流程改进建议被引量：11
- 2015年
- 目的通过分析低危人群中梅毒螺旋体抗体初筛试验结果,对相应流程提出改进措施。方法用化学发光微粒子免疫分析法(chemiluminescent microparticle immunoassay,CMIA)进行梅毒血清学初筛试验,阳性标本进行梅毒螺旋体颗粒凝集试验(Treponema pallidum particle agglutination,TPPA)和梅毒快速血浆反应素环状卡片试验(rapid plasma regain card test,RPR)。CMIA与TPPA结果不符者用荧光螺旋体抗体吸收试验(fluorescent treponemal antibody absorption test,FTA-ABS)验证。结果41 275份血清标本中,经CMIA初筛阳性608份(1.47%),CMIA S/CO值中位数(25分位数,75分位数)为7.31(2.12,20.33)。608份初筛阳性标本中,TPPA复检阳性仅369份(占60.69%),RPR阳性182份(占29.93%)。239份CMIA阳性而TPPA阴性的标本中,FTA-ABS验证结果显示,Ig M类抗体全部阴性,19份Ig G类抗体阳性。当CMIA S/CO≥1时进行TPPA法复检,TPPA复检阳性者判断为梅毒感染血清学阳性时,假阴性率为4.9%(19/388),假阳性率为0%。结论 CMIA法梅毒血清学初筛试验存在假阳性问题,应当结合TPPA复检结果进行判断,并注意定期复查。
- 陈兰兰王巧凤崔京涛许少侠张伟红闫文娟孔令君杨启文倪安平
- 关键词：梅毒化学发光微粒子免疫分析法梅毒螺旋体颗粒凝集试验
- 实时荧光PCR法和流式细胞术检测HLA-B27的结果分析被引量：4
- 2017年
- 目的比较实时荧光PCR法和流式细胞术两种方法检测人类白细胞抗原B27(HLA-B27)的临床应用价值。方法分别采用实时荧光PCR法和流式细胞术两种方法检测225例疑似强直性脊柱炎患者血中HLA-B27,比较和分析两种方法的检测结果。结果 95.11%样本检测结果相同,差异不具有统计学意义(P>0.05),将存在差异的标本进行基因测序后,结果与实时荧光PCR的检测结果一致。结论两种方法检测HLA-B27均具有较高的灵敏度和特异度,实时荧光PCR法在结果的准确性上更优于流式细胞术。
- 叶阿里窦亚玲孔令君张睿伊洁
- 关键词：HLA-B27荧光PCR流式细胞术脊柱炎
- 人乳头瘤病毒在临床患者中的感染现状及主要型别分析被引量：14
- 2017年
- 目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)不同基因型别的感染和现状,以期对HPV感染和病变的防治及相关疫苗研制提供参考。方法收集2013年1月1日至2015年6月30日就诊于北京协和医院的6917份样本,采用高危型HPV分型(16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59和68型)和低危型HPV(6+11)型多重PCR核酸测定试剂盒,剔除重复检测样本1331份(588人次),分析5586份样本中HPV总检出率和各亚型、不同年龄段的检出状况,对复检病例单独进行分析。结果 HPV总检出率为36.29%(2027/5586),其中高危型检出率是24.92%(1392/5586)、低危型检出率是1.66%(93/5586)、混合型检出率是9.70%(542/5586)和HPV高危型混合检出率是7.75%(433/5586);女性和男性在HPV高危型检出率分别为25.52%(1366/5353)和11.16%(26/233)(χ~2=24.61,P<0.001),混合型检出率分别为9.99%(535/5353)和3.00%(7/233)(χ~2=12.45,P<0.001)。男性HPV低危型检出率3.86%(9/233)明显高于女性的1.57%(84/5353)(χ~2=5.84,P=0.007)。HPV高危型感染年龄分布主要在31~50岁,低危型感染主要分布在21~40岁;混合感染以31~40岁居多。HPV52、HPV58型感染阴转率最低。HPV各亚型中检出率最高的前3位为HPV52、HPV16和HPV58型。结论 HPV高危和低危型在男女性别之间的检出率明显不同,男性以低危型为主,女性以高危和高、低危混合感染为主。检出率最高为HPV52型,其次为HPV16和HPV58型;再次阴性检出率最低的为HPV52和HPV58型;HPV感染主要集中在青壮年。
- 张睿毕鑫星叶阿里孔令君窦亚玲
- 关键词：人乳头瘤病毒基因型宫颈癌疫苗
- 2008~2013年肺炎衣原体血清抗体检测及流行病学分析
- 目的 检测血清肺炎衣原体抗体并进行流行病学分析方法 微量免疫荧光法检测血清标本肺炎衣原体IgG 和IgM 抗体.结果 7802 例送检血清标本中,肺炎衣原体IgG 抗体阳性6827 例,阳性率87.5％,2～4 岁年龄组...
- 崔京涛闫文娟倪安平孔令君陈兰兰
- 四种甲型流感病毒核酸检测试剂的性能评价被引量：3
- 2020年
- 目的:对国家食品药品监督管理总局(CFDA)批准的4种国产甲型流感病毒核酸检测试剂性能进行评估和临床确认试验。方法:使用美国病理学家协会(CAP)提供的标准毒株(2份)及北京协和医院就诊患者的300份呼吸道剩余样本,对其中2018年1月间84份患者的鼻咽拭子剩余样本进行临床确认试验。参考美国临床和实验室标准协会文件指南,使用CAP提供的A/H1N1和A/H3N2标准毒株制备样本盘,分别从重复性、重现性、检测下限、抗干扰能力、特异性、稳定性和模拟临床评估等方面的性能对试剂A、B、C和D进行评估;结果:试剂C的稳定性较好但其聚合酶链反应(PCR)酶对血液造成的干扰影响较大;试剂D的重复性、重现性、检测下限、抗干扰能力以及稳定性均未达到本实验室的临床应用需求。试剂D与试剂A、试剂B和试剂C的3种试剂评估结果比较,试剂D的重复性、重现性和抗干扰能力结果存在明显差异,具有统计学意义(F=6.53,F=25.44,F=14.15;P<0.05)。试剂A的检测下限可以达到10^2copies/ml,在4种试剂中具有较明显优势。临床确认实验中试剂A和试剂B检测结果的阳性率分别为38.1%(32/84)和23.8%(20/84),两者比较差异具有统计学意义(Z=-3.464,P<0.05)。结论:通过对重复性、重现性、检测下限、抗干扰能力、特异性、稳定性及模拟临床评估等方面的性能评估和临床确认试验,试剂A漏检率更低,临床检测准确率更高。
- 张栋杨启文倪安平伊洁吴洁陈雨孔令君侯欣周梦兰徐英春
- 关键词：甲型流感病毒核酸检测
- 一种寨卡病毒富集检测方法的性能评价
- 2022年
- 目的 对一种无需核酸提取纯化的寨卡病毒实时荧光定量反转录PCR检测方法的性能进行评价。方法 该检测方法基于实时荧光定量反转录PCR技术,样本处理采用病毒富集法:取100~200μL待测样本,加入112~224μL样本处理液Ⅰ,5~10μL样本处理液Ⅱ,混匀后进行离心富集(12 000 r/min,离心半径8.6 cm,离心5 min)。离心后弃上清液,加入20μL复溶缓冲液重悬沉淀;取10μL重悬液,加入50μL PCR反应液上机检测。从定量检测下限、交叉反应、抗干扰性、精密度方面评价该检测方法的性能。收集北京协和医院检验科临床样本(血清、尿液、唾液样本),随机选取约1/5构建寨卡病毒感染模拟临床样本,进一步评定该检测方法的性能。结果 该检测方法对MR766、ZKC2/2016毒株的检测下限均为10;半数组织培养感染剂量(50%tissue culture infective dose, TCID50)/mL;对17种常见虫媒病原体检测结果均为阴性,无交叉反应发生;潜在干扰物质胆红素(15 mg/L)、血红蛋白(100 mg/L)、甘油三酯(2000 mg/L)、IgG(37.5 g/L)和EDTA-Na;(2.5 g/L)对其检测结果无干扰;检测低、中、高浓度寨卡病毒的批次内和批次间Ct值变异系数均<10%,精密度良好。共收集344份北京协和医院检验科临床样本,其中构建寨卡病毒感染模拟临床样本73份。采用该检测方法对344份样本进行检测,结果均与实际相符,无假阳性和假阴性。结论 寨卡病毒简单富集后再检测的方法特异性高、重复性好,检测结果不受干扰物质的影响,检测下限满足临床需求,且操作简便,但应用效果仍需在真实临床样本中进一步验证。
- 李阿茜孔令君刘洋伊洁李川梁米芳窦亚玲
- 关键词：性能评价
- 北方地区非缺失型HbH病复合β-珠蛋白生成障碍性贫血孕妇1例被引量：1
- 2021年
- 珠蛋白生成障碍性贫血是由于珠蛋白基因缺失或突变导致珠蛋白肽链合成障碍的一种溶血性贫血,其属于单基因遗传病,具有严重的危害性,可分为α-珠蛋白生成障碍性贫血和β-珠蛋白生成障碍性贫血[1]。该病广泛分布于世界各地,全球约有5.00%的人口是α-珠蛋白生成障碍性贫血的携带者,其中东南亚为高发区之一,在我国多见于南方地区,北方少见[2-4]。
- 杜云玲孔令君张睿吴洁窦亚玲
- 关键词：血红蛋白H病基因诊断
- 全自动核酸提取仪对三种性传播病原体检测的性能评价被引量：3
- 2017年
- 目的评价全自动核酸(RNA)提取仪(型号MagX)对沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,CT)、淋病奈瑟菌(Neisseria gonorrhoeae,NG)和解脲脲原体(Ureaplasmaurealyticum,UU)检测结果应用于临床的可行性。方法收集检测CT样本159例、NG样本128例、UU样本144例,应用荧光核酸恒温扩增检测技术(Simultaneous Amplification and Testing,SAT),同一样本分别采用手工提取分装加样和MagX提取分装加样两种检测方法,然后进行实时荧光PCR。以手工检测结果为金标准,对MagX检测结果进行阳性符合率(灵敏度)、阴性符合率(特异度)、总符合率(准确度)的评价。同时,对该仪器进行防污染验证。全自动核酸(RNA)提取仪与手工检测结果进行Kappa一致性分析。结果 159例CT,128例NG和144例UU样本的阳性符合率、阴性符合率、总符合率依次为CT:0.910 6,92.59%,98.48%和97.48%;NG:0.938 3,100.00%,98.18%和98.44%;UU:0.885 6,93.33%,95.24%和94.44%;其Kappa系数均>0.8(CT:Kappa=0.910 6,NG:Kappa=0.938 3,UU:Kappa=0.885 6),CV值均<5%;没有携带污染现象存在。结论上海仁度生物科技生产的CT,NG和UU核酸检测试剂盒(RNA恒温扩增)在全自动核酸(RNA)提取仪(型号MagX)的检测符合临床检测标准,可在临床使用。
- 张睿叶阿里孔令君窦亚玲伊洁
- 关键词：沙眼衣原体淋病奈瑟菌解脲脲原体
