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基于蛋白质组学技术筛选唐氏妊娠母体血清蛋白标志物的研究被引量：1: 2015年; 目的筛选唐氏(DS)妊娠母体血清蛋白标志物,初步验证其临床应用价值。方法收集确诊为DS妊娠的母体血清(DS组)和正常孕妇血清标本(对照组)各6例(均为16孕周采集),经二维凝胶电泳(2-DE)获得2组血清蛋白电泳图像,比较2组间蛋白含量变化,选取差异显著的蛋白质点进行生物质谱分析与鉴定,并采用Western blot方法验证筛选获得的血清蛋白标志物在DS妊娠母体血清中的变化情况(n=12)。结果通过2-DE图谱分析,共筛选出29个表达显著差异的血清蛋白质点。从中选取6个表达差异较大的蛋白质点,经生物质谱技术分析和NCBI数据库搜索与匹配,发现CFHR1和Kininogen 1等10个蛋白质与其匹配的可能性较大(匹配分值>66分)。Western blot结果显示,CFHR1和Kininogen 1在DS组的积分光密度值分别为(5 687.0±727.8)和(133 451.8±32 118.8),均明显高于对照组水平[(1 414.1±715.6)(P<0.01)和(33 073.9±14 390.4)(P<0.05)]。结论2-DE和生物质谱分析是筛选蛋白质标志物的可靠方法,Western blot结果证实CFHR1和Kininogen 1的异常变化可能与DS妊娠密切相关,有望成为DS早期产前筛查的母体血清蛋白新标志物。; 姚远张波蒋滢罗娟吴玉娇姚宏; 关键词：唐氏综合征 KININOGEN 母体血清产前筛查

双循环线性滚环扩增检测HBV替诺福韦耐药位点的方法学研究: 2013年; 目的探讨双循环线性滚环扩增(rolling circle amplification,RCA)检测HBV替诺福韦耐药基因突变位点的可行性。方法以HBV替诺福韦耐药基因突变位点为检测靶点,设计该位点的锁式探针以及包括该位点的HBV野生型、突变性模板。锁式探针与野生型模板特异识别并结合,通过E.coli连接酶连接为闭合环形结构,加入引物启动第1轮RCA;扩增产物用HpaⅠ酶切游离出检测模板,重复上述过程进行第2轮RCA,琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物;并对该方法的特异性、检测限及连接效率的影响因素进行初步探讨。结果探针与模板的杂交温度为45℃时,探针的环化连接效率最高、特异性最好。通过对不同浓度野生型模板的检测,单循环RCA的检测限为50pmol/L,双循环RCA的检测限为5pmol/L,检测灵敏度提高了10倍。结论初步建立了检测HBV替诺福韦基因耐药位点突变的双循环RCA方法。; 林钟劝陈瑶韩梅夏宇姚远和昱晨张波; 关键词：突变

核酸适配体及其应用研究进展被引量：4: 2014年; 1990年Tuerk等1]报道了一种新的寡核苷酸筛选技术。该技术与PCR扩增相结合,在体外人工构建的短链核苷酸文库中筛选出能与噬菌体T4DNA聚合酶特异性结合的RNA配体。其原理基于生物自然进化机制,即:变异、选择和复制,故被命名为指数富集的配基系统进化(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)技术,筛选出的短链DNA或RNA配体称为适配体。; 姚远张波; 关键词：适配体核酸

HCMV PP65抗原核酸适配子的筛选及活性鉴定: 2014年; 目的以人巨细胞病毒HCMV PP65抗原为靶分子,筛选与其有高亲和力、高特异性的适配子。方法采用SELEX技术筛选HCMV PP65抗原特异的适配子,进行亲和性检测以及二级结构预测,以筛选获得的最优序列作为捕获适配子,建立基于"磁珠-适配子-抗原-荧光单克隆抗体"的夹心检测方法,实现对PP65抗原的初步检测。结果本实验经过8轮筛选获得6条与靶物质高亲和性,高特异性结合的适配子。结论适配子的成功筛选,为建立基于适配子检测HCMV PP65抗原的新方法奠定了基础。; 夏宇王永虎秦莲花韩梅姚远和昱辰罗娟张波; 关键词：PP65 抗原 SELEX 适配子

血清单胺类神经递质及其代谢产物在重度抑郁症及抑郁共病焦虑障碍诊断中的应用被引量：52: 2014年; 目的观察血清单胺类神经递质及其代谢产物在抑郁症及抑郁共病焦虑障碍中水平的变化,并探讨其相关性。方法采用高效液相色谱法测定26例抑郁共病焦虑障碍、19例重度抑郁症评定:24项汉密尔顿抑郁量表总分>24和23例正常人血清的单胺类神经递质代谢产物血清肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)、五羟色胺(5-HT)以及二羟基苯乙酸(DOPAC)、高香草酸(HVA)、5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)的浓度,并比较两组上述单胺类神经递质及其代谢产物浓度的变化、比值和相关系数的差异。结果抑郁症组患者血清NE和E的浓度分别为(1.95±1.08)、(2.55±0.96)ng/L,共病组为(4.51±3.4)、(4.06±2.26)ng/L,对照组为(4.71±1.93)、(3.89±2.44)ng/L,3组两两之间相比均具有显著差异(P<0.05)。共病组血清5-HIAA、HAV的浓度为(0.9±1.5)、(1.58±1.48)ng/L,其浓度与对照组[分别为(0.17±0.08)、(0.76±0.39)ng/L]相比具有显著差异(P<0.05)。抑郁症组DOPAC与NE、5-HT与5-HIAA、HVA与5-HIAA的有明显的相关性(P<0.05);同时,抑郁症组与对照组相比,HVA/NE、DOPAC/NE、5-HIAA/NE、5-HT/5-HIAA、DOPAC/HVA比值存在显著差异(P<0.05),共病组在HVA/NE、5-HT/5-HIAA及DOPAC/HVA比值有显著差异(P<0.05)。抑郁症组与共病组各比值间均无显著差异(P>0.05)。结论血清单胺类神经递质及其代谢产物可反映大脑单胺类神经递质的平衡状态,其水平变化可作为抑郁症诊断生物标志的一个重要参考指标。; 和昱辰张波瞿玮宁洁全弘宇夏宇姚远韩梅; 关键词：抑郁症单胺类神经递质代谢产物

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姚远

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