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建立猪MHCⅠ类抗原特异性人T细胞系的探讨被引量：1: 2002年; 目的　建立间接识别中国版纳猪SLAⅠ类P1分子的特异性人T细胞系的方法 ,以进一步研究SLAⅠ类分子的间接识别在猪→人异种细胞性排斥中的作用。方法　以E·coli中表达并纯化的SLAⅠ类分子P1为抗原 ,体外反复刺激健康人PBMC ,3H TdR掺入法筛选特异性增殖的T细胞 ,FACS作表型初步分析。结果　初步测定健康人外周血版纳猪SLAⅠ类P1分子特异性T细胞反应频率约 6 .67× 1 0 - 7,所建 4个T细胞系表型均为TCRαβ+ ,其中 3株以CD4+ 为主 ,1株以CD8+ 为主。结论　利用E .coli表达的纯蛋白抗原可建立间接识别版纳猪SLAⅠ类P1分子的特异性人T细胞系。; 唐军张冬青沈佰华周洪周芸柳子星周光炎; 关键词：基因表达 T细胞系器官移植

异种移植中急性细胞性排斥的研究进展被引量：5: 2001年; 异种移植是极具应用价值的一个医学领域 ,当前异种移植主要以猪→人为研究对象 ,它的临床应用至少要克服超急性排斥、急性血管性排斥和急性细胞性排斥这三大障碍。本文就急性细胞性排斥方面的研究进展包括人T淋巴细胞对猪异种抗原的直接识别。; 唐军谢晋; 关键词：异种移植 NK细胞

人外周血T细胞系间接识别SLAⅠ类分子引起的异种细胞增殖反应: 2003年; 目的　确认猪→人异种移植中存在针对猪白细胞抗原 (swineleukocyteantigen ,SLA)Ⅰ类分子的间接识别而引起的急性细胞性排斥。方法　用纯化的中国版纳猪SLAⅠ类P1基因工程蛋白为抗原 ,体外反复刺激健康人外周血T细胞 ,建立P1特异性T细胞系。观察抗原特异性CD4 + T细胞系在自身APC存在下对版纳猪外周血单个核细胞与软骨细胞的反应性 ,以及HLA DR单抗与氯喹的阻断作用。结果　建立 10株SLAⅠ类P1抗原特异性T细胞系 ,其中 8株以TCRαβ+ CD4 + 为主要表型 ,将其合并使用。该CD4 + P1特异性T细胞系在自身APC存在下对相同品系版纳猪PBMC与软骨细胞均产生显著增殖反应。经抗人HLA DR单抗与氯喹处理均能明显阻断其增殖反应。结论　健康人外周血T细胞可通过间接识别SLAⅠ类抗原对版纳猪细胞产生明显应答。; 唐军周芸柳子星张勇王胜旺周光炎; 关键词：异种移植

中国版纳猪MHCI类P1分子全长的原核表达与纯化被引量：8: 2002年; 目的：获得原核表达的中国版纳猪ＳＬＡＩ类Ｐ１蛋白质分子。方法：ＰＣＲ扩增去信号肽的ＳＬＡＩ类Ｐ１ｃＤＮＡ序列，亚克隆至ｐＧＥＭＴ载体，测序。将亚克隆的Ｐ１　ｃＤＮＡ片段插入表达载体ｐＥＴ４２ｂ（＋），构建重组表达质粒ｐＥＴ－４２ｂ（＋）／ｓｌａ－ｐｌ，转化Ｅ·ｃｏｌｉ表达菌ＢＬ２１－ＣｏｄｏｎＰｌｕｓ（ＤＥ３）－ＲＩＬ，ＩＰＴＧ诱导Ｐ１－８ｘｈｉｓ融合蛋白表达，经包涵体洗涤，８ｍｏｌ／Ｌ尿素变性溶解，Ｎｉ２＋亲和层析，梯度透析后，定量保存。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔｔｉｎｇ鉴定目的蛋白的表达与纯化。结果：目的蛋白（分子量３９．５ｋＤ）表达量占细菌总蛋白１５％，每升表达菌获得纯度９５％的目的蛋白４０ｍｇ～６０ｍｇ。结论：成功建立猪ＳＬＡ分子全长原核表达、纯化体系，为建立间接识别猪移植抗原ＳＬＡＩ类分子的人Ｔ细胞系及表位分析打下基础。; 唐军陈福祥李宁丽王颖沈伯华周洪周光炎; 关键词：原核表达蛋白纯化

表达B7H1共刺激分子的角朊细胞激发新的调节性T细胞?: 角朊细胞(KC)作为一种非专职性APC,激活后表达一系列表面分子,包括MHC Ⅱ类分子和共刺激分子,影响T细胞增殖和亚群分化,对皮肤疾病的发生发展和移植物排斥或耐受的研究都具有深远的意义。我们在对混合皮肤移植局部免疫抑制...; 陶箭周洪唐军周芸周光炎; 文献传递

人外周血中SLA-P1抗原特异性T细胞前体频率及其细胞因子分泌格局分析: 2002年; 用基因工程表达并纯化的版纳猪SLAI类P1为抗原 ,经两轮刺激PBMC以3H TdR法检测 1 0名健康人外周血中的特异性T细胞前体频率在 6 67× 1 0 7～ 1 0 8× 1 0 6 之间。用ELISA与RT PCR法进一步分析了抗原特异性细胞的细胞因子分泌特点 ,发现所有抗原阳性孔都呈现IFN γ (+) /IL 4( )的典型Th1型格局。以上结果部分明确了外周血SLA P1特异性T细胞的特征 ,为揭示SLA P1特异性T细胞在猪; 唐军周芸陶箭张勇王胜旺周光炎; 关键词：SLA ELISA法 RT-PCR法

人T细胞对版纳猪SLA-P1抗原的间接识别和表位分析: 猪→人异种器官移植中涉及人T细胞介导的排斥反应,即急性细胞性排斥。人T细胞对猪移植物阴转抗原的排斥应答,有直接识别与间接识别两种方式。间接识别的排斥反应是指猪的异种抗原作为外源性蛋白质被人APC摄取和加工后,递呈给自体T...; 唐军张冬青周芸柳子星张勇陶箭王胜旺周光炎; 文献传递

Toll样受体—一个新发现的介导天然免疫的古老家族(上)被引量：8: 2001年; Toll样蛋白是近年在人和小鼠细胞上发现的跨膜信号传递受体家族 ,它在进化上高度保守。本文介绍了它在人类的家族成员、组织表达分布和分子结构特征 ,重点介绍了TLR2。; 唐军; 关键词：TOLL样受体分子结构细胞内信号转导

Tol1样受体—一个新发现的介导天然免疫的古老家族(下)被引量：4: 2001年; 在前文基础上 ,介绍了Toll样受体家族重要成员TLR2、TLR4的配体 ;LPS与TLR2、TLR4的相互作用 ;归纳了Toll样受体的免疫学意义。它是迄今认识的第一个机体通过感知微生物病原体直接作出防御反应的天然免疫受体。Toll样受体的发现和功能研究为了解与感染有关的免疫现象 ,如炎症、自身免疫病、天然免疫与获得免疫的关系等。; 唐军; 关键词：TOLL样受体病原微生物天然免疫

TPA和IFN-γ活化角朊细胞对T淋巴细胞增殖和细胞因子分泌的作用被引量：5: 2003年; 角朊细胞激活对T淋巴细胞增殖和细胞因子分泌的作用。TPA和IFN γ联合作用 ,激活角朊细胞表达表面分子 ,FACS检测MHCI、II类分子和CD80、CD86分子水平 ,RT PCR检测B7 H1共刺激分子表达。由激活角朊细胞提供T淋巴细胞激活的第二信号 ;绵羊红细胞花环沉淀分离纯化T细胞 ,抗CD3单抗提供第一信号 ,建立体外混合培养系统 ,3 H TdR渗入法检测T细胞增殖 ,ELISA检测培养上清细胞因子浓度。结果显示 ,TPA和IFN γ联合作用可诱导角朊细胞表达B7 H1共刺激分子 ,并上调其MHCII类分子。以B7 H1为第二信号 ,可以协同抗CD3单抗对T细胞的增殖作用 ,并呈现独特的细胞因子分泌格局。因此角朊细胞激活后表达B7 H1共刺激分子 ,此第二信号可刺激T淋巴细胞增殖。; 陶箭周洪唐军周芸周光炎; 关键词：角朊细胞 B7-H1 共刺激分子 T淋巴细胞增殖细胞因子

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唐军