周华
- 作品数：6 被引量：12H指数：2
- 供职机构：长春生物制品研究所更多>>
- 相关领域：生物学化学工程轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 血小板衍生生长因子(PDGF)A链基因的克隆与表达被引量：1
- 1999年
- 为研究血小板衍生生长因子 A(Platelet- derived growth factor,PDGF- A)的分子生物学 ,从人工饲养的动脉硬化模型兔的主动脉壁平滑肌细胞提取细胞总 RNA,用 RT- PCR法成功地分离了兔血小板衍生生长因子 A基因 ,构建了克隆载体 SK/ PDGF和表达载体 PKK/ PDGF,并成功地表达了 PDGF- A。
- 陈宇闫明洲谈微洁王志武姚为民周华李武平张雪梅郑辉刘丹
- 关键词：PDGF-A克隆血小板生长因子
- IL-2与绿脓杆菌外毒素A嵌合蛋白的研究被引量：1
- 2000年
- 目的获得ＩＬ－２绿脓杆菌外毒素Ａ嵌合蛋白，用于相关疾病的治疗。方法用ＰＣＲ方法扩增分 离ＩＬ－２和ＰＥＡ的基因，将ＩＬ－２基因的３’端与绿脓杆菌外毒素Ａ基因的５’端连接后克隆至ｐＢＶ２２０上，转化大肠杆菌 ＤＨ５ａ。挑取菌落培养，快速提取质粒进行酶切，并在温控条件下表达。结果经鉴定，获得重组质粒ｐＢＶ／ＩＬ－２／ ＰＥＡ。温控诱导表达后ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明，在５１ ０００处有蛋白表达带。以鼠抗人ＩＬ－２单克隆抗体经免疫印迹验 证，该表达蛋白为所设计的嵌合蛋白。结论本研究建立了一种制备ＩＬ－２／ＰＥＡ嵌合蛋白的方法，该方法也可用于 表达其他蛋白。
- 刘柱周华姚为民万里张雪梅王志武石晓丽郑辉朱宏伟盛君周雪艳陈宇贺玉泉周传开
- 关键词：绿脓杆菌外毒素AIL-2基因重组克隆嵌合蛋白
- IGF-1中试工艺的研究
- 盛军赵大鹏刘畅王晓宇蒙冲戚凤春万里张雪梅姚为民王宣军王志武刘涛朱宏伟周华刘延彬王妍
- 该课题应用分子生物学技术构建了人肝脏cDNA文库，并从中分离、克隆了hIGF-Ⅰ基因组建了高效表达hIGF-Ⅰ的分泌型重组载体，筛选了高效表达hIGF-Ⅰ的工程菌株，并对工程菌株进行了全面鉴定。在此基础上，建立了独特的重...
- 关键词：
- 关键词：IGF-1中试工艺
- 人肝脏组织cDNA文库的构建及应用被引量：1
- 1997年
- 用氯化铯-异硫氰酸胍超速离心法（CsCl2-GTC）提取肝检组织总RNA，用mRNA提取试剂盒分离mRNA。将分离得到的mRNA在逆转录酶存在的条件下，合成cDNA的第一链；在大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ和RNaseH存在的条件下，合成cDNA的第二链。在引物设计上，引进M13M4引物及EcoRⅠ酶切位点，同时含有Olygod（T）8。为了验证合成的cDNA文库的可靠性，我们设计了几对引物用于PCR扩增TPO和IGF－1基因。实验结果表明，PCR有效地扩增分离出TPO和IGF－1基因。经酶切鉴定和DNA序列分析证实，该序列与文献报道完全一致。该cDNA文库的构建成功，为今后分离和克隆肝细胞产生的细胞因子打下了基础；同时也为从分子水平上研究肝细胞的生物学功能提供了重要材料。
- 盛君朱宏伟赵大鹏王志武陈梅刘柱周华王宣军安伟
- 关键词：CDNA肝细胞CDNA文库
- 狂犬病病毒糖蛋白真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的表达被引量：3
- 2007年
- 目的构建狂犬病病毒糖蛋白基因的真核细胞表达载体,并在COS-7细胞中表达。方法培养狂犬病病毒,提取负链RNA,采用RT-PCR的方法扩增糖蛋白基因,并将该基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1(A)上,通过脂质体介导的方法,转染COS-7细胞,用ELISA及间接免疫荧光法检测狂犬病病毒糖蛋白在COS-7细胞中的瞬时表达。结果成功构建了真核表达载体pcDNA3.1(A)/G,转染COS-7细胞后,在其培养上清中未检测到狂犬病病毒糖蛋白的表达。间接免疫荧光试验表明,pcDNA3.1(A)/G能有效地表达狂犬病病毒糖蛋白于转染的COS-7细胞膜上。结论真核细胞表达载体pcDNA3.1(A)/G能够在COS-7细胞中表达狂犬病病毒糖蛋白,为开发狂犬病病毒糖蛋白基因工程疫苗奠定了基础。
- 姚为民舒适周华隋红刘原舒王志武
- 关键词：狂犬病病毒糖蛋白COS-7细胞真核表达
- 重组α_(2b)型人干扰素工程菌菌种稳定性试验被引量：6
- 1999年
- 重组α2b型人干扰素 (rIFN 2b)PBV889/JM10 3工程菌菌株传 10 0代后 ,经一系列检定表明 ,干扰素表达水平、质粒性状及其遗传稳定性、染色特性、菌落形态、电镜检查及其他理化特性均与原始菌种差异无显著意义 ,且无支原体及其他微生物污染 。
- 石晓丽万里王东倩刘景会周华盛君郝维杰
- 关键词：稳定性传代人干扰素工程菌
