周仪华
- 作品数：18 被引量：73H指数：6
- 供职机构：南昌大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：江西省科技计划项目国家自然科学基金江西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 可溶性血管内皮细胞生长因子受体1真核表达载体pEGFP-N1/sflt-1的构建及在人脐静脉内皮细胞中的表达
- 背景研究表明,sflt-1基因在多种组织中表达,其在内皮细胞中的表达尚待证实。目的获取人可溶性血管内皮生长因子受体1(sflt-1)基因,构建sflt-1基因真核表达载体pEGFP-N1/sflt-1重组质粒,检测其在人...
- 周仪华王耀晟何力鹏鲍晓明黄晓程晓曙
- 文献传递
- 骨髓间充质干细胞表达的hVEGF_(121)/EGFP融合蛋白的提纯及功能鉴定
- 2009年
- 目的:用hVEGF121/EGFP真核质粒转染骨髓间充质干细胞,提纯其表达的hVEGF121/EGFP融合蛋白,并体外检测其功能。方法:用课题组前期工作构建的pEGFP-N2-hVEGF121重组质粒提取质粒DNA。通过阳离子脂质体介导pEGFP-N2-hVEGF121重组质粒DNA转染体外培养的骨髓间充质干细胞,使用荧光显微镜检测hVEGF121/EGFP融合蛋白表达。用Amicon超滤离心管纯化融合蛋白。结果:荧光显微镜下观察到转染pEGFP-N2-hVEGF121重组质粒的骨髓间充质干细胞,Westen blot证实转染骨髓间充质干细胞的培养液中存在hVEGF121/EGFP融合蛋白表达。MTT试验证实人脐静脉内皮细胞数量在hVEGF121/EGFP融合蛋白组明显多于对照组(P<0.05)。Miles实验证实hVEGF121/EGFP融合蛋白增加血管壁的通透性。结论:①携带hVEGF121/EGFP融合蛋白表达基因的真核表达质粒,在骨髓间充质干细胞中获得表达。②骨髓间充质干细胞表达的hVEGF121/EGFP融合蛋白在体外具有野生型血管内皮细胞生长因子的功能。
- 何力鹏王耀晟周仪华姜宇吴晓玲程晓曙
- 关键词：血管内皮细胞生长因子骨髓间充质干细胞融合蛋白
- 肺纤维化疾病早期生物标志物研究进展被引量：4
- 2016年
- 肺纤维化疾病是由多种原因引起的弥漫性间质性肺疾病的统称,是众多肺部疾病发展的晚期结局。目前针对肺纤维化尚没有特效药和措施可以逆转。肺纤维化疾病早期症状并不明显,呈进行性发展,通常被确诊时已发展为晚期肺纤维化。然而,早期采取措施可以获得很好地预防效果。因此寻找用于肺纤维化及其进程评价的早期生物效应标志物,已成为肺纤维化肺疾病研究中迫切需要解决的问题。近年来研究发现在肺纤维化早期,SP-A、SP-D、PDGF、KL-6及CC16等一种或几种因子在血液中的浓度或状态改变对早期诊断或筛查肺纤维化相关疾病具有重要意义。本文就近几年提出的早期生物标志物在肺纤维化早期诊断的作用进行综述,为肺纤维化疾病防治提供思路。
- 胡丽华袁影周仪华
- 关键词：肺纤维化生物标志物
- 艾司洛尔对老年人感染性休克心肌损伤的保护作用被引量：6
- 2015年
- 目的探讨艾司洛尔对老年人感染性休克心肌损伤是否具有保护作用。方法选取我科60岁以上感染性休克,经标准化治疗后心率仍大于100次/min患者36例。根据其有无冠心病或心房纤颤等心脏基础疾病随机分为3组,A组:既往无冠心病及心房纤颤等基础疾病组;B组:既往有冠心病并接受β受体阻滞剂治疗组;C组:既往有心房纤颤并长期服用β受体阻滞剂控制心室率组。分别给予艾司洛尔进行干预。在给药前及给药后心率达标2h内对患者心脏功能进行评价。结果给予艾司洛尔干预并达标后,患者APACHE-Ⅱ评分、MODS评分下降,CK-MB、cTnI及BNP下降,中心静脉血氧饱和度改善、全血乳酸下降、尿量增加,与给药前相比,有统计学意义(P<0.05);心脏超声检查提示除A组射血分数(EF)稍下降外,其余两组射血分数非但未见下降,反而上升,C组上升明显(P<0.01),给药前后患者舒张功能无明显变化(P>0.05)。结论艾司洛尔对老年人感染性休克患者心肌损伤具有保护作用,特别是伴有冠心病以及心房纤颤等心脏基础疾病者保护作用更突出。
- 周仪华郭良云王萌袁影王舒胡丽华
- 关键词：艾司洛尔感染性休克心肌损伤心肌保护
- 艾司洛尔对脓毒症休克患者左室功能及预后的影响被引量：19
- 2019年
- 目的利用经胸超声心动图(transthoracic echocardiography,TTE)评价艾司洛尔对脓毒症休克患者左室功能的影响,并探讨其预后。方法将134例脓毒症休克患者随机(随机数字法)分成常规治疗组和艾司洛尔组,分别在给药前0.5~2h、心率达标后24、48、72、96h经胸超声测量左室形态及功能参数;记录APACHEⅡ评分、SOFA评分,ICU治疗时间,机械通气时间,28d病死率。结果心率达标72h艾司洛尔组左室收缩末直径(LVIDs)、左室收缩末容积(LVESV)减小,左室收缩末内径(LVIDd)、左室舒张末容积(LVEDV)增加,96h变化明显,组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。心率达标24h内艾司洛尔组患者左室压力上升速率(dp/dt)、二尖瓣环收缩期速度(Sm)、左室射血分数(LVEF)有轻度下降,48h开始回升,96h达高峰,组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。24h内艾司洛尔组E峰下降时间(EDT)稍有上升,E/A比值变化不明显,96hE/A比值升高,EDT下降,组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,艾司洛尔组患者APACHEⅡ评分、SOFA评分降低,机械通气时间、ICU停留时间缩短,28d病死率明显降低(P<0.01)。结论艾司洛尔增强脓毒症休克患者左心功能并改善临床预后。
- 周仪华苑会晶袁影胡洪文郭良云
- 关键词：艾司洛尔脓毒性休克经胸超声左室功能
- 可溶性血管内皮细胞生长因子受体1真核表达载体pEGFP-N1/sflt-1构建及在人脐静脉内皮细胞中的表达
- 2009年
- 背景:研究表明,可溶性血管内皮生长因子受体Flt-1(sflt-1)基因在多种组织中表达,但其在内皮细胞中的表达尚待证实。目的:获取人sflt-1基因,构建sflt-1基因真核表达载体pEGFP-N1/sflt-1重组质粒,检测其在人脐静脉内皮细胞中的表达。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-05/12在南昌大学第二附属医院分子中心完成。材料:pEGFP-N1真核表达载体为南昌大学第二附属医院分子中心保存,人脐静脉内皮细胞株购至南京基凯生物技术公司。方法:从含有目的基因的质粒克隆模板中,利用酶切的方法获得目的基因,将目的载体进行酶切,纯化酶切产物后进行定向连接,其产物转化细菌感受态细胞,PCR鉴定为阳性的克隆,证明目的基因已经定向连入目的载体。再对PCR鉴定阳性的克隆进行测序和分析比对,比对正确的即为构建成功的融合蛋白表达质粒载体。用脂质体法将pEGFP-N1/sflt-1重组质粒转染人脐静脉内皮细胞。主要观察指标:①重组质粒的酶切鉴定结果。②重组质粒的测序鉴定结果。③荧光显微镜及蛋白免疫印迹检测sflt-1基因在人脐静脉内皮细胞中的表达。结果:①对PCR鉴定阳性的克隆进行测序和分析比对,与sflt-1基因片段全长2063bp理论值相符,证实pEGFP-N1/sflt-1重组质粒构建成功。②重组质粒送至上海捷瑞生物技术公司进行通测,测序结果证实插入片段序列与理论值完全一致。③荧光显微镜下可见重组质粒转染人脐静脉内皮细胞发绿色荧光,蛋白免疫印迹检测表明sflt-1基因能在人脐静脉内皮细胞中表达。结论:实验成功构建了携带人血管内皮生长因子受体Flt-1的重组pEGFP-N1/sflt-1真核表达质粒,并证实其在人脐静脉内皮细胞中的表达。
- 周仪华王耀晟何力鹏鲍晓明黄晓程晓曙
- 关键词：可溶性血管内皮生长因子受体1克隆转染
- 压力负荷型心脏肥大大鼠心电图被引量：3
- 2008年
- 目的采集压力负荷型心脏肥大大鼠心电图检测数据并分析其特点。方法常规腹主动脉缩窄法建立大鼠压力负荷型心脏肥大模型,超声心动图、心脏称量评定心脏肥大建模成功。标准化心电图测量各肢体及胸导联并统计分析数据。结果造模2周后超声心动图检测示心脏肥大组的左室后壁舒张末期厚度、室间隔舒张末期厚度、左室舒张末期内径均大于对照组,证实造成心脏肥大。心电图检测显示几个特点:心脏肥大组:1)心电轴较假手术对照组偏左;2)V_A、V_B、V_C 导联 R 波振幅均明显大于对照组(P<0.01);3)心脏肥大组 V_A、V_B、V_C 导联绝大多数"J"点抬高明显,较对照组差异有非常显著意义(P<0.01)。结论压力负荷型心脏肥大大鼠心电图具有明显特征,心电图检查能作为无创性评价大鼠心脏肥大的有效方法。
- 王耀晟何力鹏周仪华肖鲁闽程晓曙
- 关键词：心脏肥大心电图
- 可溶性血管内皮生长因子受体1对动脉粥样硬化斑块的作用被引量：7
- 2016年
- 背景:斑块内血管新生是在动脉粥样硬化病变基础上发生的,而血管新生又促进粥样硬化病变的发展;可溶性血管内皮生长因子受体1基因转染减少兔血管损伤后的新生内膜形成,亦显著减少早期血管的炎症和增生以及晚期的新生内膜形成。目的:观察局部高表达的可溶性血管内皮生长因子受体1对动脉粥样硬化斑块的作用。方法:雄性新西兰大白兔48只,随机分为4组。1正常对照组(n=8)。2假手术组(n=8)。3球囊损伤+高脂饮食+p EGFP-N1组(n=16)。4球囊损伤+高脂饮食+p EGFP-N1-s Flt-1组(n=16)。前2组兔给予正常颗粒饲料饮食。后2两组给予高脂饮食,2周后行髂动脉球囊损伤血管内皮,球囊损伤+高脂饮食+p EGFP-N1组和球囊损伤+高脂饮食+p EGFP-N1-s Flt-1组兔右髂动脉腔分别注射空质粒p EGFP-N1和脂质体包裹的可溶性血管内皮生长因子受体1重组质粒。结果与结论:球囊损伤+高脂饮食+p EGFP-N1组以及球囊损伤+高脂饮食+p EGFP-N1-s Flt-1组兔血脂水平明显升高,造模3 d后髂动脉可溶性血管内皮生长因子受体1表达水平明显增加,均出现不同程度的动脉粥样硬化斑块形成,且球囊损伤+高脂饮食+p EGFP-N1-s Flt-1组兔斑块面积、斑块周径、斑块最大厚度和斑块内阳性细胞数量明显少于球囊损伤+高脂饮食+p EGFP-N1组。表明可溶性血管内皮生长因子受体1基因在动脉粥样硬化斑块动物模型中可有效表达并抑制动脉粥样硬化斑块的发生、延缓斑块的发展。
- 周仪华王舒袁影
- 关键词：可溶性血管内皮生长因子受体1动脉粥样硬化斑块新生血管免疫印迹基因转染
- HO-1在脓毒症大鼠心肌损伤中的作用及其对血清HMGB-1水平的影响被引量：3
- 2018年
- 目的探讨血红素加氧酶-1(HO-1)在脓毒症大鼠心肌损伤中的作用及其对血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)水平的影响。方法选择128只SD大鼠,随机分为假手术组、脓毒症组、钴原卟啉(CoppⅨ)组、锌原卟啉(ZnppⅨ)组,每组32只。CoppⅨ组和ZnppⅨ组均于造模前24 h分别给予腹腔注射HO-1增强剂Co PPⅨ10 mg/kg、HO-1抑制剂ZnppⅨ10 mg/kg,假手术组和脓毒症组不给药。脓毒症组、CoppⅨ组、ZnppⅨ组均采用盲肠结扎穿孔(CLP)法建立脓毒症模型。假手术组无菌状态下开腹找出盲肠后再将其还纳腹腔,不做CLP术。各组均于造模后0、6、12、24 h时处死大鼠8只,开腹经腹主动脉取血,ELISA法检测各组血清心肌损伤指标包括肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白-I(c Tn I)、B型脑钠肽(BNP)、心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP),以及HMGB1、HO-1水平。采用Pearson相关系数法分析HMGB1与HO-1的相关性。结果 (1)各组血清心肌损伤指标水平比较:脓毒症组6、12、24 h时血清CK-MB、c Tn I、BNP、H-FABP水平均高于假手术组(P均<0. 05)。CoppⅨ组24 h血清CK-MB、c Tn I、BNP水平均低于脓毒症组,ZnppⅨ组6、12、24 h时血清CK-MB、c Tn I、BNP水平均高于脓毒症组(P均<0. 05)。ZnppⅨ组12、24 h时血清CK-MB、c Tn I、BNP水平均高于CoppⅨ组,6、12、24 h时血清H-FABP均高于CoppⅨ组(P均<0. 05)。(2)各组血清HMGB1、HO-1水平比较:脓毒症组6、12、24 h时血清HMGB1及HO-1水平均高于假手术组(P均<0. 05)。6、12、24 h时,CoppⅨ组血清HMGB1水平均低于脓毒症组、HO-1水平均高于脓毒症组,ZnppⅨ组血清HMGB1水平均高于脓毒症组、HO-1水平均低于CoppⅨ组(P均<0. 05)。(3)HMGB1与HO-1的相关性:脓毒症组、CoppⅨ组、ZnppⅨ组血清HMGB1与HO-1水平均呈负相关(r分别为-0. 342、-0. 415、-0. 437,P均<0. 05)。结论 HO-1对脓毒症大鼠的心肌具有保护作用,HO-1对心肌的保护作用可能与降低HMGB1水平有关。
- 周仪华袁影盛志勇王舒王萌郭良云
- 关键词：脓毒症心肌损伤血红素氧合酶-1高迁移率族蛋白B1
- 超声弹性成像应变率比值法在睾丸结节鉴别诊断中的应用价值被引量：3
- 2017年
- 目的探讨超声弹性成像应变率比值法在鉴别诊断睾丸良恶性结节中的应用价值。方法对53例睾丸肿瘤患者共61个结节术前常规行超声弹性成像应变率比值检查,并分析其病理结果。结果 61个结节中23个为良性,38个为恶性。良性结节SR为1.23±0.54;恶性结节SR为2.66±0.67,二者比较差异有统计学意义(t=2.07,P<0.01);ROC曲线下面积为0.917,根据ROC曲线确定SR的最佳诊断截点值:SR=2.25;判断睾丸良恶性结节的敏感性、特异性及准确性分别为84.2%、91.3%、86.9%。结论 SR在鉴别诊断睾丸良恶性病变中具有重要价值。
- 郭良云周仪华洪正东章春泉胡震刘燕娜
- 关键词：弹性成像技术结节病睾丸超声弹性成像应变率比值
