吴聪
- 作品数：7 被引量：24H指数：4
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- 腺病毒介导的AFP基因修饰树突状细胞的体外生物学特性被引量：6
- 2003年
- 目的:探讨腺病毒介导AFP基因修饰树突状细胞瘤苗体外生物学活性。方法:将携带小鼠AFP全长cDNA的重组腺病毒表达载体Ad-AFP转染BMDC,构建AFP-DC肝癌瘤苗,采用电化学发光免疫测定法确证AFP-DC转染的有效性,FACS检测表面分子和内吞功能,~3H-TdR掺入法检测T细胞增殖反应的能力,^(51)Cr释放法检测CTL活性。结果:AFP基因转染12h后DC及其培养上清中可检到AFP的表达,表明腺病毒介导的AFP基因转染的有效性。AFP-DC与BMDC比较B7分子明显上调,MHC分子也有轻度升高,内吞功能降低(P<0.05)。AFP-DC激发同基因型小鼠T细胞增殖功能均明显高于DC对照组和LacZ-DC组(P<0.05)。AFP-DC体外诱导CTL对Hepal-6肿瘤细胞的杀伤作用具有特异性。结论:肝癌相关基因AFP可作为抗肝癌基因治疗的切入点,该研究为肝癌树突状细胞体内免疫治疗提供了实验依据。
- 宋文刚曲迅陈宪锐李雅林吴聪秦庆亮
- 关键词：树突状细胞甲胎蛋白肝癌细胞瘤苗基因转染
- 基因修饰DC与Hepa1-6肝癌细胞融合瘤苗的抗肿瘤作用机制被引量：3
- 2004年
- 目的 :探讨腺病毒介导白细胞介素 1 8(interleukin1 8,IL 1 8)基因修饰的小鼠树突状细胞 (dendriticcells,DC)与Hepa1 6肝癌细胞融合后的瘤苗 (IL 1 8 DC Hepa)体内诱导的抗肿瘤免疫应答机制 .方法 :应用 4h51 Cr释放法检测NK细胞杀伤活性 .体内阻断试验观察免疫细胞亚群及免疫分子在IL 1 8 DC Hepa瘤苗诱导抗肿瘤免疫应答中的作用 .建立基因缺陷鼠荷瘤模型 ,观察瘤苗免疫治疗作用 .结果 :IL 1 8 DC Hepa瘤苗与DC Hepa瘤苗比较能更有效地诱导NK细胞活性 [(4 2 .5± 4 .7) %vs (1 3.5± 2 .2 ) % ,q =2 0 .8,P <0 .0 1 ].在抗肿瘤免疫应答的诱导过程中 ,必需有CD4 + T细胞[(6 7.8± 6 .1 )mm2 ,q =2 8.3,P <0 .0 1 ]、CD8+T细胞[(5 8.9± 6 .2 )mm2 ,q =2 4 .4 ,P <0 .0 1 ]、NK细胞 [(30 .6±4 .5 )mm2 ,q=1 2 .0 ,P <0 .0 1 ]、B7/CD2 8的共刺激信号途径[(75 .4± 6 .5 )mm2 ,q =31 .6 ,P <0 .0 1 ]和IFN γ[(6 2 .3±6 .8)mm2 ,q =2 5 .9,P <0 .0 1 ]的参与 ;而在其效应阶段 ,则依赖于CD8+ T细胞 [(6 8.9± 4 .5 )mm2 ,q =4 2 .3,P <0 .0 1 ]、NK细胞 [(38.6± 3.3)mm2 ,q =2 2 .7,P <0 .0 1 ]和IFN γ[(74 .4± 5 .8)mm2 ,q =4 5 .8,P <0 .0 1 ]的参与 ,CD4 + T细胞为非必需的 [(4 .2± 1 .9)mm2 。
- 宋文刚曲迅陈宪锐李雅林李松吴聪
- 关键词：白细胞介素18自然杀伤细胞Γ-干扰素
- 不同途径免疫的AFP基因修饰DC瘤苗体内抗肿瘤效应的研究被引量：5
- 2004年
- 目的:探讨腺病毒介导AFP基因修饰的:DC(AFP—DC)瘤苗经不同途径免疫后机体抗肿瘤免疫应答反应。方法:采用皮下注射、静脉注射和瘤体注射三种途径回输AFP-DC瘤苗,比较观察AFP—DC瘤苗对荷瘤小鼠免疫治疗作用,应用4 h51Cr释放杀伤实验、T细胞与NK体内剔除实验等方法,观察AFP—DC瘤苗对荷瘤小鼠免疫治疗作用及保护性免疫反应。结果:皮下注射AFP-DC瘤苗治疗效果在抑制肿瘤生长、延长小鼠存活期方面都明显优于瘤体内注射或尾静脉注射(P<0.05),AFP-DC瘤苗体内能更有效地诱导特异CTL细胞毒活性,能使免疫动物产生一定的免疫保护作用,抵抗肿瘤细胞的再攻击。在AFP-DC瘤苗诱导抗肿瘤免疫排斥反应过程中,必需有CD4+T和CD8+T细胞的参与;而在其效应阶段,则依赖于CD8+T细胞的参与,CD4+T细胞为非必需;在免疫诱导及效应阶段剔除NK细胞对抗肿瘤免疫应答无明显影响。结论:皮下注射AFP-DC瘤苗能有效诱导机体产生抗肿瘤免疫反应,为DC介导的肝癌免疫治疗开辟了新的途径。
- 宋文刚曲迅李雅林李松吴聪陈宪锐
- 关键词：瘤苗基因疗法
- 羟基喜树碱对融合瘤苗抗肿瘤效应的实验研究
- 2004年
- 目的 观察羟基喜树碱(HCPT)处理的树突状细胞(DC)与Hepal-6肝癌细胞融合后的瘤苗体内诱导的抗肿瘤免疫应答以及对荷瘤小鼠的治疗效果。方法 应用免疫磁珠分选和贴壁培养法收集融合细胞,Rhodamine 123/PI双标法检测凋亡,4h ^(51)Cr释放法检测细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性,观察瘤苗对荷瘤小鼠保护性免疫反应和免疫治疗作用。结果 用50μg/ml HCPT处理DC-Hepa融合瘤苗24 h后,凋亡率为29.7％±4.1％,HCPT处理的DC-Hepa瘤苗在体内诱导出更强的特异性CTL活性,使免疫小鼠产生一定的免疫保护作用,抵抗Hepal-6肝癌细胞的再次攻击,使治疗小鼠的肿瘤生长明显缓慢,存活期延长。结论 HCPT处理的DC-Hepa瘤苗进行体内免疫保护和治疗,能诱导出显著的抗肿瘤免疫反应,为DC介导的肝癌生物治疗开辟了新的途径。
- 宋文刚曲迅李雅林徐英萍吴聪秦庆亮
- 关键词：羟基喜树碱融合瘤苗抗肿瘤效应树突状细胞免疫应答
- 小鼠骨髓树突状细胞体外扩增方法的建立
- 2003年
- 目的 建立小鼠骨髓树突状细胞 (DC)体外大量扩增方法。方法 应用粒细胞 -巨噬细胞集落刺激因子联合白细胞介素 - 4诱导培养小鼠骨髓细胞 ,应用相差显微镜观察形态学变化 ,3H -TdR掺入法检测细胞增殖能力 ,FACS检测细胞表面分了 ,ELISA检测细胞因子。结果 体外诱导培养 8天后可获得大量形态学典型的DC ,具有强烈的激活同种异体或自体T细胞增殖反应能力。FACS检测表明 ,扩增的DC表达IaKb、CD11c、CD80、CD86、ICAM - 1分子。DC接受LPS刺激后 ,可以促使DC成熟 ,分泌IL - 12 ( p70 )、IL - 6、TNF -α和IL - 1β水平增强。结论 小鼠骨髓细胞体外诱导培养 ,可生成大量功能成熟的DC ,为进一步开展DC基础和临床研究打下基础。
- 宋文刚陈宪锐李雅林秦庆亮吴聪王晓东
- 关键词：树突状细胞粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子白细胞介素-4
- DC肿瘤融合瘤苗抗肿瘤效应的实验研究被引量：7
- 2004年
- 目的:观察DC与肿瘤细胞融合后的瘤苗体内诱导的抗肿瘤免疫应答以及对荷瘤小鼠的治疗作用。方法:应用免疫磁珠分选和贴壁培养方法收集融合细胞,应用3H-TdR掺入法、4h51Cr释放法观察T细胞增殖反应的能力和CTL活性,并观察瘤苗对荷瘤小鼠保护性免疫反应和免疫治疗作用。结果:DC肿瘤融合瘤苗具有强烈的激活T细胞增殖和抗原提呈的能力,在体外、体内诱导出更强的特异CTL细胞毒活性,使免疫小鼠产生一定的免疫保护作用,抵抗Hepa1-6肝癌细胞的再次攻击,使治疗的小鼠肿瘤的生长明显缓慢,具有更明显的治疗作用。结论:DC与肿瘤细胞融合后进行体内免疫和治疗,能诱导出显著的抗肿瘤免疫反应,为DC介导的肿瘤免疫治疗开辟了新的途径。
- 宋文刚陈宪锐李雅林徐英萍吴聪秦庆亮
- 关键词：树突状细胞免疫治疗
- IL-18基因修饰的DC肿瘤融合瘤苗的抗肿瘤效应被引量：6
- 2003年
- 目的 :观察腺病毒介导白细胞介素 1 8(Interleukin1 8,IL 1 8)修饰的小鼠树突状细胞 (Dendriticcells,DC)与Hep a1 6肝癌细胞融合后的瘤苗 (IL1 8 DC Hepa)体内诱导的抗肿瘤免疫应答以及对荷瘤小鼠的治疗效果 .方法 :应用T细胞与NK体内删除实验、4h51 Cr释放杀伤实验、酶联免疫吸附实验等方法 ,观察瘤苗对荷瘤小鼠免疫治疗作用及保护性免疫反应作用机制 .结果 :IL1 8 DC Hepa瘤苗组免疫治疗作用明显优于未转染IL 1 8的融合瘤苗组 (DC Hepa)和LacZ转染对照组 (LacZ DC Hepa) (P <0 .0 5 ) ,阻断CD4 + 、CD8+ T细胞都导致瘤苗免疫治疗作用明显降低 ,阻断NK细胞对抗肿瘤免疫应答具有一定影响 ,表明IL1 8 DC Hepa瘤苗的免疫治疗作用有赖于CD4 + 和CD8+ T细胞及NK细胞 .IL1 8 DC Hepa瘤苗体内诱导特异性CTL杀伤活性明显高于DC Hepa和LacZ DC Hepa组 (P <0 .0 0 1 ) ,诱导脾淋巴细胞产生IL 2和IFN γ的能力显著高于对照组DC Hepa和IL1 8 DC (P <0 .0 0 1 ) ,但各组瘤苗诱导脾淋巴细胞产生IL 4和IL 1 0能力无明显差异 (P >0 .0 5 ) ,表明IL 1 8主要是通过诱导IL 2和IFN γ等Th1型细胞因子来增强DC融合瘤苗的抗肿瘤效应 .结论 :IL1 8 DC Hepa瘤苗进行体内免疫保护和治疗 ,能诱导出显著的抗肿瘤免疫反应 。
- 宋文刚陈宪锐李雅林徐英萍吴聪秦庆亮
- 关键词：白细胞介素18树突细胞
