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吴常伟
作品数:
1
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供职机构:
华西医科大学
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
生物学
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赵晓军
华西医科大学
苏晓东
北京大学
高雄卓
华西医科大学
李兰芬
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2009
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致龋变异链球菌N-乙酰谷氨酸激酶的表达、纯化和生化特性研究
2009年
探讨了在大肠杆菌中实现致龋变异链球菌N-乙酰谷氨酸激酶基因(argB)的表达、蛋白纯化和生化特性研究。以变异链球菌基因组DNA为模板,设计特异引物,PCR扩增argB基因。经消化和连接构建重组载体pET28a-argB,测序确认后转化表达菌E.coli BL21(DE3)。SDS-PAGE鉴定argB基因能诱导表达,且表达物可溶。通过镍离子螯合层析和分子筛纯化成功获得N-乙酰谷氨酸激酶(NAGK)重组蛋白。NAGK酶促反应分析表明:精氨酸生物合成的乙酰化环式路径关键酶NAGK活性不受精氨酸反馈抑制,提示可能存在其他调节方式有待进一步研究。此外,分析型分子筛结果显示:具有催化活性NAGK以单体形式存在,显然不同于此前氨基酸激酶家族中的相关报道。
吴常伟
李兰芬
高雄卓
赵晓军
苏晓东
关键词:
变异链球菌
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