吕磊
- 作品数：48 被引量：212H指数：7
- 供职机构：武汉市第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金武汉市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生交通运输工程理学文化科学更多>>
- 膀胱癌中Twist蛋白表达与上皮-间质转化的关系被引量：5
- 2010年
- 目的 探讨膀胱癌中上皮-间质转化因子Twist表达及其与上皮-间质转化及病理参数之间的关系.方法 应用E-钙黏蛋白和N-钙黏蛋白的表达来检测上皮-间质转化的发生.采用免疫组织化学SABC法、实时定量聚合酶链反应（PCR）和Western blot法观察45例膀胱癌组织和5例正常膀胱组织中Twist蛋白、E-钙黏蛋白和N-钙黏蛋白的表达.结果 45例膀胱癌组织和5例正常膀胱黏膜中Twist阳性率分别为26.66%和0,随着膀胱癌的病理分级及临床分期的增高,Twist的表达率逐渐升高.且Twist在有淋巴转移中的表达明显高于无淋巴结转移的膀胱癌.Twist的表达与E-钙黏蛋白和N-钙黏蛋白的表达显著相关.结论 Twist蛋白的表达对上皮-间质转化有重要影响,可为膀胱癌侵袭转移的研究和患者的预后判断提供参考.
- 张学能李叶红邢诗安朱朝辉王智宇吕磊何远桥刘朝祝建芳
- 关键词：膀胱癌TWIST蛋白
- 泛素特异肽酶22基因通过Myc调控人膀胱癌EJ细胞增殖的机制研究被引量：2
- 2014年
- 目的 研究非对称小干扰RNA（asymmetric structure of interfering RNA,aiRNA）沉默泛素特异肽酶22（ubiquitin specficpeptidase 22,USP22）基因对膀胱癌EJ细胞增殖的影响及其相关机制.方法 2010年8月至2012年3月,我们设计并合成USP22 aiRNA及阴性对照aiRNA（NC-aiRNA） USP22 aiRNA序列结构包括长度分别为15 bp和21 bp的正义链和反义链,将此aiRNA命名为USP22 aiRNA（15/21）,利用脂质体转染膀胱癌EJ细胞.实验分3组：对照组、NC-aiRNA组和USP22 aiRNA（15/21）组转染后48 h,通过逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western印迹法分别检测USP22、Myc、cyclin D1和cyclin E1基因mRNA和蛋白表达水平,噻唑蓝（MTT）法检测EJ细胞的增殖活性,荧光素酶报告基因检测系统检测Myc启动子活性 利用染色质免疫共沉淀法（chromatin immunoprecipitation,ChIP）分析沉默USP22基因后转录因子Sp1与Myc基因启动子的结合情况结果 与对照组相比,转染USP22 aiRNA（15/21） 48 h后EJ细胞中的USP22、Myc、cyclin D1和cyclin E1的mRNA和蛋白表达水平分别下调了（87.4±5.2）％和（91.2±7.3）％、（69.2±4.3）％和（61.0±6.6）％、（78.5±4.1）和（67.4± 5.5）％、（81.0±5.5）％和（78.3±4.0）％（P＜0.05）.MTT结果显示,USP22aiRNA（15/21）组EJ细胞的增殖活性明显受到抑制,在24、48、72和96h4个时间点的细胞生长活性分别为（85.4±5.7）％、（71.3±8.4）％、（52.5±6.7）％和（45.8±6.4）％（P＜0.05）.荧光素酶报告基因检测结果显示,USP22 aiRNA（15/21）组Myc启动子的转录活性下调（65.5±4.2）％（P＜0.05）.ChIP结果进一步显示,沉默USP22抑制了转录因子Sp1与Myc启动子的结合,USP22 aiRNA（15/21）组Sp1与Myc启动子的结合能力相比对照组下调了（48.0±3.2）％（P＜0.05）.结论 USP22 aiRNA（15/21）可能通过抑制Myc基因启动子与转录因子Sp1的结合,下调Myc的表达,从而抑制膀胱癌EJ细胞的增殖.
- 吕磊章传华袁敬东汪良蒋国松曾甫清
- 关键词：MYC基因转录因子SP1转录调控膀胱癌
- SLC9A3-AS1调控miR-148a-3p/ROCK1信号轴影响肾癌细胞生物学功能
- 2024年
- 目的检测lncRNA SLC9A3-AS1在肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)组织与肾癌细胞中的表达水平,探讨其促进肾癌细胞恶性生物学行为的机制。方法应用GEPIA2在线软件(http://gepia2.cancer-pku.cn/)分析TCGA数据库中SLC9A3-AS1在ccRCC组织中的表达水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测SLC9A3-AS1在不同肾癌细胞系、24例ccRCC组织与癌旁正常肾脏组织中的表达水平;应用细胞增殖/毒性检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)和Transwell小室迁移实验检测敲低SLC9A3-AS1表达对肾癌细胞增殖与迁移的影响;应用蛋白质免疫印迹法检测增殖与迁移相关信号通路蛋白的表达水平;采用双荧光素酶报告基因实验验证SLC9A3-AS1与miR-148a-3p/ROCK1轴的靶向调控关系。结果GEPIA2软件分析结果显示,相较正常肾脏组织,SLC9A3-AS1在肾透明细胞癌组织中表达显著上调(P<0.01)。qRT-PCR结果显示,相较癌旁正常肾脏组织,SLC9A3-AS1在24例ccRCC组织中表达显著上调(P<0.01);相较永生化肾小管上皮细胞,SLC9A3-AS1在4种肾癌细胞系中表达均显著上调,以786-O细胞最为显著(P<0.01)。干扰SLC9A3-AS1表达,可显著抑制786-O细胞的增殖与迁移能力,上调E-cadherin的蛋白表达水平,而下调N-cadherin、MMP2的蛋白表达水平(均P<0.05);过表达miR-148a-3p可显著抑制786-O细胞的增殖与迁移能力(P<0.01)。双荧光素酶报告基因检测结果表明,SLC9A3-AS1可特异性结合miR-148a-3p,后者进一步靶向结合ROCK1 mRNA的3′UTR区域;过表达miR-148a-3p可明显下调ROCK1 mRNA的表达水平,敲低miR-148a-3p表达则产生相反的效应;敲低SLC9A3-AS1表达可显著下调786-O细胞中ROCK1 mRNA与蛋白的表达水平(P<0.01);下调miR-148a-3p表达可部分逆转SLC9A3-AS1沉默对786-O细胞增殖与迁移的抑制作用(P<0.05)。结论SLC9A3-AS1在ccRCC中通过调控miR-148a-3p/ROCK1轴发挥促癌作用,有望成为ccRCC的一个新的分子标志物。
- 向威吕磊郑福鑫章传华袁敬东
- 关键词：肾透明细胞癌
- 孤立肾肾盂癌的治疗方案
- 2014年
- 患者,女,57岁。因＂体检发现右肾盂占位性病变1周＂入院。患者无腰部胀痛不适,无肉眼血尿,无明显尿路刺激征,不伴畏寒发热。既往史：高血压病史10年余,于2011年因左肾盂癌（病理类型不详）行后腹腔镜下左肾、输尿管全切术。无家族遗传史。入院后行血常规、尿常规、肝功能、肾功能、电解质、凝血功能、心电图、胸片等检查，结果基本正常。CTU示右肾盂扩张，内见大小约16mm×11mm结节状软组织密度影，增强扫描示中等强度强化，肿瘤性病变可能性大（图1）。
- 吕磊袁敬东章传华
- 关键词：肾盂癌孤立肾无肉眼血尿尿路刺激征高血压病史家族遗传史
- miR-124通过靶向调控PKM2基因的表达抑制前列腺癌PC3细胞的增殖被引量：3
- 2014年
- 目的:探讨miR-124抑制前列腺癌PC3细胞增殖活性的机制。方法:利用荧光素酶报告基因验证miR-124能否靶向作用于丙酮酸激酶M2型(PKM2)3'端非编码区(UTR)。将miR-124 mimic转染至PC3细胞后,采用实时荧光定量PCR和Western印迹检测前列腺癌PC3细胞PKM2 mRNA和蛋白的表达水平,MTT法检测miR-124 mimic与PKM2 siRNA对PC3细胞生长活性的影响。结果:与人前列腺上皮细胞RWPE-1比较,PC3细胞中PKM2 mRNA和蛋白水平表达分别上调(5.12±0.35)倍和(4.05±0.20)倍(P<0.05)。荧光素酶报告基因结果证实,PKM2是miR-124调控的靶基因,miR-124可特异性地结合于PKM2 mRNA的3'-UTR。转染miR-124 mimic 24 h后,PKM2蛋白水平下调至阴性对照组(0.16±0.04)倍(P<0.05),但对PKM2 mRNA表达无显著影响(P>0.05)。MTT结果显示,转染miR-124 mimic和PKM2 siRNA都能显著抑制PC3细胞的增殖,但miR-124 mimic对PC3细胞生长活性的抑制能力较PKM2 siRNA强。转染miR-124 mimic和PKM2 siRNA 24 h和48 h后,PC3细胞的增殖率分别为(66.20±5.10)%和(82.10±6.35)%(P<0.05)、(49.34±2.37)%和(70.10±5.80)%(P<0.05)。结论:miR-124可通过靶向调控PKM2基因的表达而抑制前列腺癌PC3细胞的增殖。
- 吕磊袁敬东操作亮黄韬章传华汪良曾甫清
- 关键词：前列腺癌PC3细胞细胞增殖
- 沉默TK1对前列腺癌PC3细胞增殖及侵袭的影响被引量：1
- 2021年
- 目的探讨胸苷激酶-1(TK1)对前列腺癌PC3细胞增殖和侵袭能力的影响。方法实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测TK1mRNA和蛋白在人正常前列腺上皮细胞和前列腺癌PC3细胞中的表达;利用脂质体转染PC3细胞,根据转染情况将实验分为对照组(未转染siRNA)、NC siRNA(转染阴性siRNA)组和TK1siRNA组(转染TK1siRNA)。转染48h后,通过MTT细胞增殖实验、克隆形成实验和侵袭实验检测各组PC3细胞的存活能力、增殖活性和侵袭活性。结果人正常前列腺上皮细胞RWPE-1和前列腺癌PC3细胞中TK1mRNA相对表达水平分别为1.000±0.022和6.512±0.708,组间均值差异有统计学意义,t=13.612,P=0.005;TK1蛋白相对表达水平分别为1.000±0.031和3.508±0.583,组间均值差异有统计学意义,t=20.663,P=0.002。PC3细胞转染NC siRNA和TK1siRNA 48h后,TK1mRNA在对照组中的相对表达量为1.000±0.013,NC siRNA组为1.023±0.018,TK1siRNA组为0.142±0.050,3组比较差异有统计学意义,F=44.27,P<0.001。其中,TK1siRNA组TK1mRNA表达量显著低于对照组(t=14.625,P=0.005)和NC siRNA组(t=13.374,P=0.006),差异有统计学意义。TK1蛋白在对照组中的相对表达量为1.000±0.041,NC siRNA组为1.018±0.052,TK1siRNA组为0.250±0.062,3组比较差异有统计学意义,F=42.52,P<0.001。其中,TK1siRNA组TK1蛋白表达量显著低于对照组(t=21.330,P=0.002)和NC siRNA组(t=16.426,P=0.004),差异有统计学意义。MTT结果显示,TK1siRNA组PC3细胞的存活能力降低,与NC siRNA组比较差异有统计学意义,并呈时间依赖,F_(组别)=68.37,F_(时间)=114.88,F_(组别×时间)=43.62,均P<0.001。克隆形成实验结果显示,NC siRNA组和TK1siRNA组克隆细胞集落数分别为32.25±5.82和8.64±1.50,2组比较差异有统计学意义,t=32.181,P=0.001。细胞侵袭实验结果显示,NC siRNA组和TK1siRNA组的侵袭细胞数分别为158.35±18.62和60.52±7.33,2组比较差异有统计学意义,t=28.742,P=0.001。结论TK1mRNA和蛋白在前列腺癌PC3细胞中呈
- 吕磊黄遂斌吴维柳懿鹏蒋国松周高峰
- 关键词：前列腺癌增殖
- 计及多因素影响的输流管道动力学行为分析
- 输流管是广泛应用于核电、化工、航天以及碳纳米管元器件等诸多领域用于输送流体介质的工程结构，由于其支撑形式众多、工作环境复杂，存在不同支撑、不同介质、变温环境、不同尺度效应及不同载荷等多因素作用，导致输流管的动力学行为十分...
- 吕磊
- 关键词：输流管道临界流速非线性动力学
- 床边B超监视下注水试验在诊断车祸伤致膀胱破裂中的应用被引量：2
- 2010年
- 目的探讨床边B超监视F注水试验在诊断车祸伤致膀胱破裂中的临床应用价值。方法对35例车祸伤怀疑膀胱破裂患者使用便携式B超床边监视下行膀胱注水试验进行检查，观察膀胱壁的完整性、膀胱内液体外流声像、腹腔和盆腔积液量及膀胱裂口部位大小的动态变化，分析其临床资料。结果26例患者经床边B超监视下注水试验明确诊断，9例患者提示膀胱破裂经手术探查或膀胱造影证实。结论急诊床边B超监视下注水试验可以早期诊断膀胱破裂，具有操作方便、无痛苦、迅速、准确等特点，可以作为诊断车祸伤致膀胱破裂的首选检查方法。
- 何远桥吕磊郭炬胡涛刘庆鞠文曾甫清
- 关键词：注水试验膀胱破裂车祸伤
- 藤黄酸抑制前列腺癌PC-3细胞增殖并诱导其细胞凋亡被引量：12
- 2011年
- 目的:研究中药藤黄的有效成分藤黄酸(gambogic acid,GA)对前列腺癌PC-3细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用不同浓度的GA作用前列腺癌PC-3细胞后,在体外通过CCK-8比色法分析细胞的增殖情况,吖啶橙/溴化乙啶(acridine orange/ethidium bromide,AO/EB)双重染色法和FCM法分析细胞的凋亡情况;蛋白质印迹法检测细胞中凋亡相关蛋白P53、Bax和Bcl-2的表达变化。结果:GA不仅能抑制PC-3细胞的增殖,而且能有效诱导其细胞凋亡,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),并且其抑制增殖和促凋亡作用呈浓度依赖性。CCK-8法检测结果表明,GA浓度>1μmol/L时,细胞的增殖能力受到明显抑制。AO/EB染色法显示,GA处理后的前列腺癌PC-3细胞核呈致密浓染橘红色,并伴有核浓缩和偏向。FCM法检测结果显示,GA处理后的前列腺癌PC-3细胞凋亡峰明显。蛋白质印迹法进一步表明,GA能够上调PC-3细胞中Bax和P53的表达水平,下调Bcl-2表达水平。结论:GA对前列腺癌PC-3细胞具有明显的抑制增殖和诱导凋亡作用。
- 唐冬吕磊曾甫清何俊蒋国松王振迪
- 关键词：前列腺肿瘤细胞增殖细胞凋亡藤黄酸
- 藤黄酸对膀胱癌BIU-87细胞侵袭及迁移能力的影响被引量：4
- 2016年
- 目的观察藤黄酸(Gambogic Acid,GA)对人膀胱癌BIU-87细胞侵袭及转移能力的影响。方法将不同浓度的GA作用于膀胱癌BIU-87细胞24 h后,采用MTT检测BIU-87细胞的生长活性,细胞侵袭实验和迁移实验检测GA对BIU-87细胞侵袭及迁移能力的影响。实时荧光定量RT-PCR和Western印迹法检测E-cadherin和vimentin基因的mRNA和蛋白的表达水平。结果浓度大于0.5μmol/L的GA能明显抑制BIU-87细胞的生长,与对照组比较,GA浓度为1、2.5、5、10μmol/L实验组的细胞生长活性分别为对照组的(78±8)%、(55±6)%、(38±4)%和(18±2)%。而浓度为0.125、0.25、0.5μmol/L的GA能明显抑制BIU-87细胞的侵袭和转移。对照组,各浓度GA(0.125、0.25、0.5μmol/L)组的侵袭细胞数分别为(109±8)、(84±6)、(53±5)、(28±3)个,迁移细胞数分别为(162±12)、(124±8)、(86±5)、(54±5)个。同时,0.125、0.25、0.5μmol/L的GA处理后的膀胱癌BIU-87细胞的E-cadherin基因的mRNA和蛋白表达明显上调,vimentin基因的mRNA和蛋白表达水平则显著降低。结论低浓度的GA(≤0.5μmol/L)能够有效抑制膀胱癌BIU-87细胞的侵袭及转移,其作用机制可能与调节E-cadherin和vimentin基因的mRNA和蛋白表达有关。
- 吕磊袁敬东黄韬章传华蒋国松曾甫清
- 关键词：藤黄酸膀胱肿瘤肿瘤侵袭细胞迁移
