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吕建锋

作品数:8 被引量:110H指数:5
供职机构:北京大学人民医院更多>>
发文基金:国家自然科学基金北京大学人类疾病基因研究中心科研基金国家科技重大专项更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 8篇中文期刊文章

领域

  • 8篇医药卫生

主题

  • 7篇细胞
  • 3篇抗原
  • 3篇基因
  • 2篇星状细胞
  • 2篇原基因
  • 2篇特异
  • 2篇肿瘤
  • 2篇细胞癌
  • 2篇免疫
  • 2篇抗原基因
  • 2篇黑色素
  • 2篇黑色素瘤
  • 2篇黑色素瘤抗原
  • 2篇黑色素瘤抗原...
  • 2篇肝癌
  • 2篇肝细胞
  • 2篇肝细胞癌
  • 2篇肝星状细胞
  • 1篇性细胞
  • 1篇血肿

机构

  • 8篇北京大学
  • 1篇北京大学肝病...

作者

  • 8篇冷希圣
  • 8篇吕建锋
  • 8篇彭吉润
  • 5篇杜如昱
  • 5篇牟东成
  • 5篇魏玉华
  • 4篇翁山耕
  • 4篇张佑彬
  • 2篇庞学雯
  • 1篇尚小英
  • 1篇郑恩涛
  • 1篇陈慰峰
  • 1篇陈红松
  • 1篇蔡胜利
  • 1篇商小英
  • 1篇程继华

传媒

  • 2篇中华外科杂志
  • 2篇中华实验外科...
  • 1篇北京大学学报...
  • 1篇中华医学杂志
  • 1篇中华普通外科...
  • 1篇Chines...

年份

  • 1篇2003
  • 4篇2002
  • 3篇2001
8 条 记 录,以下是 1-8
排序方式:
白细胞介素10抑制枯否细胞诱导的肝星状细胞激活的研究被引量:25
2002年
目的 研究白细胞介素 10 (IL 10 )对与枯否氏细胞 (KC)共培养的肝星状细胞 (HSC)激活的影响 ,并初步探讨其作用机制。方法 采用肝脏离体胶原酶灌注消化 ,及密度梯度离心的方法来分离培养HSC和KC ;将原代培养 2d的HSC和KC分为HSC单独培养、KC单独培养和HSC与KC共培养 3大组 ,分别加 2ng/ml和 2 0ng/ml的IL 10处理。 2d后 ,分别采用3 H 胸腺嘧啶脱氧核苷 (3 H TdR)掺入法检测HSC的增殖 ,Western印染法检测HSC中α 平滑肌肌动蛋白 (α SMA)的表达和酶联免疫吸附分析 (ELISA)法检测培养上清中肿瘤坏死因子 α(TNF α)的含量。结果 IL 10对单独培养的HSC的增殖 (P >0 .0 5 )和α SMA表达 (P >0 .0 5 )无明显影响。共培养组HSC的增殖和α SMA表达分别增加了 2 .4倍和 6倍 ;2ng/ml和 2 0ng/ml的IL 10分别使共培养组HSC的增殖降低了 2 3%和 33% ,α SMA表达降低了 35 %和 4 9% ,均呈浓度依赖性 ,和HSC单独培养组相比 ,差异有显著意义 (P <0 .0 5或P <0 .0 0 1)。HSC单独培养组未检测出TNF α ;共培养组的TNF α量比KC单独培养组增加了 74 %(P <0 .0 1) ;2ng/ml和 2 0ng/ml的IL 10分别使共培养组的TNF α量降低了 2 7% (P <0 0 1)和 36 % (P<0 0 1) ,使KC单独培养组的TNF α量降低了 2 9% (P <0 0 5 )和
翁山耕冷希圣魏玉华彭吉润张佑彬吕建锋杜如昱
关键词:HSCΑ-SMA共培养白细胞介素10肝星状细胞
改良法大鼠肝星状细胞的分离培养及鉴定被引量:50
2001年
目的 :改良大鼠肝星状细胞 (hepaticstellatecells,HSC)的分离培养及鉴定方法 ,使之简便易行 ,高效可靠。方法 :采用肝离体胶原酶灌注消化 ,低速离心去除肝细胞 ,密度梯度离心法分离HSC ,采用台盼蓝染色排斥法鉴定细胞活率 ,desmin加GFAP免疫细胞化学双染色法鉴定HSC纯度。结果 :采用改良法 ,每只大鼠的HSC得率为( 2 .5 4± 0 .13)× 10 7个 ,细胞活率为 ( 98.8± 0 .7) % ,高于旧方法的HSC得率 [( 2 .18± 0 .18)× 10 7个 ,P <0 .0 1]和活率 ( 94.3± 0 .6 ) % ,P <0 .0 1]。用desmin加GFAP免疫细胞化学双染色法鉴定 ,HSC纯度为 ( 96 .8± 1.0 ) % ,高于单用desmin鉴定的纯度 ( 91.8± 2 .2 ) % (P <0 .0 1)。结论 :改良的大鼠HSC分离培养方法简便易行又经济 ,在保证纯度的同时 ,提高了得率和活率。采用desmin加GFAP免疫细胞化学双染色法鉴定细胞纯度 。
翁山耕冷希圣魏玉华彭吉润郑恩涛程继华张佑彬吕建锋杜如昱
关键词:肝星状细胞肝硬化病因学
Induction of cytotoxic T lymphocytes from the peripheral blood of a hepatocellular carcinoma patient using melanoma antigen-1 (MAGE-1) peptide被引量:5
2002年
OBJECTIVE: To investigate the possibility of using melanoma antigen-1 (MAGE-1) peptide as a tumor vaccine to treat hepatocellular carcinoma (HCC). METHODS: The expressions of MAGE-1 in 8 HCC cell lines and in liver cancer tissue from a patient were detected using RT-PCR. The type of human leucocyte antigen I(HLA I) of both 8 HCC cell lines and peripheral blood mononuclear cells of the patient was detected using a microcytotoxicity method to screen out target cell lines for the cytotoxicity assay. Peripheral blood mononuclear cells from the HCC patient pulsed with an MAGE-1 peptide (NYKCRFPEI) were used as antigen presenting cells. Autogenous peripheral blood mononuclear cells were stimulated with antigen presenting cells every 7 days for 4 times to elicit cytotoxic T lymphocytes. The phenotype of effector cells was analyzed using flow cytometry. The cytotoxicity of effector cells was detected with a lactate dehydrogenase releasing assay. RESULTS: The expressions of both MAGE-1 and HLA-A24 were detected in BEL7405 cell line which were used as the positive target cell line in the cytotoxicity assay. The expression of MAGE-1 alone was detected in HLE, BEL7402, BEL7404, QGY7703 and SMMC7721 cell lines, and the expression of neither MAGE-1 nor HLA-A24 was shown in QGY 7701 and HpG2 cell lines. The last 7 cell lines could be used as negative target cell lines in the cytotoxicity assay. Peripheral blood mononuclear cells expanded 32 folds during 28-day culture. The ratio of CD3(+) T cells increased by 16% (from 54% to 70%), and the ratio of CD8(+) T cells increased by 20% (from 36% to 56%) during 28-day culture. When the ratio of effector cells to target cells was 10:1, effector cells exhibited 62.5% cytotoxicity against autogenous lymphoblasts pulsed with the peptide (NYKCRFPEI) of MAGE-1 antigen, 40.25% cytotoxicity against BEL7405 cells, compared with 17.88% cytolysis observed against autogenous lymphoblasts, 19.55% against HLE cells, and 1.6% against QGY7701 cells. When the ratio of effector cells to target cells wa
吕建锋冷希圣彭吉润牟东成庞学雯商小英陈慰峰
黑色素瘤抗原基因在肝癌细胞系中的表达被引量:1
2003年
目的 研究黑色素瘤抗原 (MAGE)基因在肝癌 (HCC)细胞系中的表达 ,为应用MAGE抗原肽作为疫苗治疗肝癌的体外实验筛选靶细胞。方法 分别用逆转录 聚合酶链反应(RT PCR)和免疫组织化学方法对MAGE 1和MAGE 3mRNA及MAGE 1蛋白在 8种HCC细胞系中的表达进行检测 ,用微量淋巴细胞毒法测定HCC细胞系的主要组织相容性复合物 (MHC)Ⅰ类分子的表达。结果  6种HCC细胞系MAGE 1基因mRNA阳性表达 ,2种MAGE 3阳性 ;有 5种细胞系MAGE 1基因蛋白阳性。BEL740 5HLA A2 4阳性 ,HLE和HpG2HLA A2阳性。 结论 MAGE基因在HCC细胞系中有较高的表达率 ,HLE和BEL740 5可作为阳性靶细胞 ,其他细胞系可作为相应的对照细胞 ,应用于用MAGE抗原肽疫苗治疗HCC的体外实验研究中。
吕建锋冷希圣彭吉润牟东成魏玉华杜如昱
关键词:肝癌抗原黑色素瘤免疫组织化学
组织胺及其1、2型受体阻断剂对贮脂细胞收缩的影响被引量:5
2001年
目的 探讨组织胺及其 1型受体 (H1R)阻断剂、2型受体 (H2R)阻断剂对贮脂细胞收缩的影响。方法 采用肝脏离体胶原酶灌注消化及密度梯度离心的方法来分离培养贮脂细胞 ;用二甲基多聚硅烷烧制聚硅酮膜 ;传代后的贮脂细胞在聚硅酮膜上培养 3d后 ,随机分为 5组 :A组(对照组 ) ;B组 (组织胺 1× 10 -7mol/L组 ) ;C组 (组织胺 1× 10 -6mol/L组 ) ;D组 (H 1R阻断剂 +组织胺 1× 10 -6mol/L组 )和E组 (H2R阻断剂 +组织胺 1× 10 -6mol/L组 )。各组于加药前及加药后 2 0min摄相 ,在相片上分析同一视野细胞周围的聚硅酮膜皱纹变化 ,皱纹增多表明细胞收缩。结果 B组、C组的贮脂细胞收缩率分别为 2 1.0 %、34.2 % ,远高于A组的 3 .8% ,并呈量效依赖关系 (P <0 .0 0 1) ;D组的贮脂细胞收缩率为 17.7% ,低于C组 (P <0 .0 5 ) ;E组的贮脂细胞收缩率为2 6 .3 % ,与C组相比 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 组织胺通过H1R的介导促进贮脂细胞的收缩 。
翁山耕冷希圣魏玉华彭吉润张佑彬吕建锋杜如昱
关键词:贮脂细胞组织胺聚硅酮门脉高压症
应用MAGE-1抗原肽体外诱导特异性细胞毒T淋巴细胞形成被引量:18
2002年
目的探讨应用MAGE 1抗原肽治疗肝细胞肝癌 (HCC)的可行性。方法接受MAGE 1抗原九肽NYKCRFPEI孵育的外周血单个核细胞 (PBMC)经 30 0 0rad的射线照射后用作抗原呈递细胞 (APC) ,每隔 7d刺激HCC病人自体的PBMC 1次 ,进行混合淋巴细胞培养 (MLCs) ,共 4次后作为细胞毒T淋巴细胞 (CTL) ,应用乳酸脱氢酶 (LDH)释放分析法检测CTL对靶细胞的杀伤效应。结果从培养的第 1周至第 4周 ,淋巴细胞共增加至原细胞数的 32倍 ;在效应细胞∶靶细胞 (E∶T)为10∶1时 ,CTL对MAGE 1抗原九肽NYKCRFPEI孵育的自体淋巴母细胞的杀伤效应为 6 2 5 % ,对MAGE 1阳性、HLA A2 4阳性的HCC细胞株BEL740 5的杀伤效应为 40 2 % ,两者均明显高于对自体淋巴母细胞的杀伤效应 (17 9% )、和对MAGE 1阳性 ,HLA A2 4阴性的HCC细胞株HLE的杀伤效应(19 6 % ) ,及对MAGE 1阴性、HLA A2 4阴性的HCC细胞株QGY 770 1的杀伤效应 (1 6 % ) ;在E∶T为3 3∶1时 ,CTL对肽孵育的自体淋巴母细胞的杀伤效应为 5 3 6 % ,明显高于对自体淋巴母细胞的杀伤效应 (15 6 % )、对HLE的杀伤效应 (13% )和对QGY770 1的杀伤效应 (1% )。结论本实验结果表明 ,应用MAGE 1抗原肽NYKCRFPEI,能在体外从HCC病人的PBMC中有效地诱导出具有特异性杀伤能力的CTL。
吕建锋冷希圣彭吉润牟东成庞学雯尚小英
关键词:肿瘤抗原细胞毒T淋巴细胞肝细胞癌免疫疗法特异性体外诱导
黑色素瘤抗原基因在肝细胞癌细胞株中的表达被引量:3
2001年
吕建锋冷希圣彭吉润张佑彬翁山耕牟东成魏玉华杜如昱
关键词:肝细胞癌黑色素瘤抗原基因基因表达
以MAGE基因mRNA为特异标记检测肝癌患者外周血肿瘤细胞被引量:6
2002年
目的 以黑色素瘤抗原 1(MAGE 1)和MAGE 3基因mRNA为特异性标记物 ,检测肝细胞癌 (HCC)患者外周血中的肿瘤细胞 ,并探讨其临床意义。 方法 采集 2 5例HCC患者及 2 0例健康志愿者的外周血 ,用巢式RT PCR方法检测外周血单核细胞 (PBMC)中MAGE 1和MAGE 3基因mRNA。同时用RT PCR方法检测HCC患者肝癌组织中上述MAGE基因的表达。 结果  4 4 % (11/2 5 )和 36 % (9/ 2 5 )HCC患者的PBMC中可分别检测到MAGE 1和MAGE 3基因mRNA ,而相应肝癌组织中MAGE 1和MAGE 3的表达率分别为 6 8% (17/ 2 5 )和 5 6 % (14 / 2 5 ) ;在 6 4 % (16 / 2 5 )的HCC患者PBMC中至少可检测到一种MAGE基因mRNA ;肝癌组织中不表达MAGE基因的病例以及 2 0例健康志愿者的PBMC中均未测出MAGE基因mRNA。HCC患者PBMC中两种MAGE基因mRNA的检出率与肿瘤TNM分期、直径密切相关 ,而与肿瘤分化程度、血清AFP水平无相关性。但 9例血清AFP正常或轻度升高者 (<5 0ng/ml) ,6例的PBMC中MAGE 1和 /或MAGE 3mRNA为阳性。 结论 MAGE 1和MAGE 3基因mRNA可作为特异性肿瘤标记物用于检测HCC患者PBMC中的肝癌细胞 ,巢式RT PCR的敏感性及特异性较高 ,其检测结果可能有助于判断HCC患者的预后。
彭吉润蔡胜利冷希圣牟东成吕建锋陈红松芮静安
关键词:MAGE基因肝癌外周血肿瘤细胞
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